资源描述：
《哺乳动物卵母细胞体外成熟培养的研究_王俊全》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、54陕西农业科学2011(4)哺乳动物卵母细胞体外成熟培养的研究王俊全,李守杰,洪伟,魏恒,李娟娟(渭南职业技术学院,陕西渭南714000)摘要:哺乳动物卵母细胞体外成熟培养一直以来对胚胎生产和移植有着重要的影响,而培养因素又表现在四个方面:一是卵母细胞的超微结构中线粒体、核仁、细胞间隙、皮质颗粒等微结构的变化;第二,卵母细胞获取时卵泡的直径、卵母细胞的采集时期、采卵方法、运输时间以及卵丘--卵母细胞复合体的级别;第三,卵母细胞培养液体积和培养液中激素、血清、生长因子以及其他物质的添加;第四,培养时的温度、湿度、气体条件、培养的时间、方式等。目前在
2、这些条件中仍存在一定的争议,有待在相关机制和机理上进一步进行研究论证,以使培养条件逐步得到创新和完善。关键词:卵母细胞;体外培养;影响因素卵母细胞体外成熟培养(in-vitromatura1.5-3mm卵泡卵母细胞中,线粒体全都变为带tion,IVM)是指离体条件下的卵母细胞在模拟体帽状;核仁内出现的纤维中心最多,但尚未发生致内的生长环境培养,使其在体外达到成熟。卵母密化。到直径3.5-5mm卵泡,颗粒细胞突起开细胞成熟发育能力对其后的受精率、胚胎卵裂率、始退化,卵母细胞微绒毛自透明带中退缩,此期卵[2]囊胚形成率均具有直接的影响,是制约体外生产母细胞才最适合于体
3、外培养成熟。囊胚率和胚胎移植受胎率的关键。为了探索形成卵丘卵母细胞复合体(Comulusoocytecom大量早期胚胎所需的成熟卵母细胞来源,国内外plexes,COCs)的质量也直接影响到卵母细胞的许多学者对哺乳动物卵母细胞体外培养特别是对成熟。有研究表明,在牛体内,不仅与卵母细胞直卵母细胞体外生长成熟过程中的各种影响因素及接联系的卵丘细胞与卵母细胞有功能联系,外层其作用机理进行了广泛的研究,并尽可能模拟卵卵丘细胞,甚至颗粒细胞的合成物也要输送到卵母细胞成熟的体内卵泡和输卵管环境进行体外成母细胞中。与此同时,卵母细胞中合成的因子也熟培养,旨在建立一套完全在体外培养条
4、件下快要通过细胞间的间隙连接输送到卵丘细胞。所速生产和保存大量优质廉价卵母细胞的体系,这以,在卵丘-卵母细胞复合体(COC)体外成熟培不仅有利于充分挖掘优良母畜的繁殖潜力,加速养过程中,卵丘细胞间的间隙连接对卵母细胞合良种家畜的繁殖和育种进程,而且为胚胎工程的成物质逐级传向外层卵丘细胞和外层卵丘细胞合其它研究以及拯救濒危动物和开发利用珍稀动物成物逐级传送给卵母细胞起重要作用。弓超通过[1]等方面具有重要意义。笔者从卵母细胞的超微试验对牛卵母细胞不同形式的处理,讨论细胞间结构、卵母细胞的获取等几个方面详细分析了其隙连接对于其体外成熟的影响作用。在最适于卵对哺乳动物卵母细胞
5、体外培养的影响,为卵母细母细胞体外成熟的浓度(1.2IU/ml)条件下,发胞的受精以及胚胎的培养等后续工作奠定基础。现卵母--卵丘细胞之间的间隙连接对卵母细胞的成熟有着直接的影响,并且是体外成熟的一个1卵母细胞的超微结构对其体外成[3]有利条件。另外,卵母细胞的皮质区存在大量熟培养的影响的皮质颗粒,皮质颗粒沿质膜下排列方式对卵母卵母细胞的发育在超微结构的研究是成功进细胞的培养也有重要影响。经体外培养24h后,行体外受精的基础。因此,探明卵泡细胞变化与皮质颗粒如果沿质膜下呈单线状排列,则卵母细卵母细胞成熟度之间的关系,确定卵母细胞核和胞可得到成熟;如果培养异常出现成
6、团分布,则会[4]胞质的成熟时间、过程和特征,以便挑选用于体外造成培养失败。培养的卵母细胞就尤为重要。有研究表明在直径收稿日期:20110315作者简介:王俊全(1963),男,汉族,陕西白水人,副教授,主要从事预防兽医学研究。王俊全等:哺乳动物卵母细胞体外成熟培养的研究552.4获取卵巢时的温度和卵巢的运输时间2卵母细胞获取时相关因素影响从屠宰场获得的卵巢,其保存温度具有非常2.1卵丘卵母细胞复合体级别对卵母细胞成熟关键的作用。李兵兵以生理盐水为保存液,保存的影响时间在4h左右,研究不同卵巢保存温度对牛卵目前,国内按照COCs分级标准,通常都将
7、母细胞体外成熟的影响。结果表明,在一定时间COCs分为4级。COCs选择级别不同,其培养成内,温度控制在20-37,可以减少因温度变化[10]熟率之间存在很大差异。Pavlok在研究中发现,而对卵母细胞造成的损害,提高其成熟率;在成熟率由高到低的顺序为A级、B级、C级和D卵巢运输时间上,有研究证明从屠宰场取卵巢到级,实验中各组之间的差异均达到极显著水平(p带回实验室收集卵母细胞的时间以4h之内成熟<0.01),其中A级COCs成熟率达到63.81%,B率最高,时间越长,卵的质量越差,表明卵母细胞[11]级COCs成熟率达到47.81%,
