肝癌患者血清和癌组织中锌指蛋白216表达增加

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1、2008年6月第28卷第6期基础医学与临床Basic&ClinicalMedicineJune2008V01．28No．6文章编号：1001-6325(2008)06—0610．04肝癌患者血清和癌组织中锌指蛋白216表达增加研究孛g-文顾香芳1，余德才2(南京大学医学院附属鼓楼医院1．医学检验中心科研部；2．普外科，江苏南京210008)摘要：目的寻找肝癌相关抗原。方法应用SEREX技术对肝癌组织cDNA文库进行血清学筛选，获得人类锌指蛋白ZNF216。利用原核表达和亲和层析技术获得ZNF216的6·His

2、融合蛋白，建立间接ELISA方法，检测血清中产生的ZNF216抗体水平；利用RT．PCR技术检测肝癌患者肝癌组织及癌旁组织内ZNF216mRNA的水平。结果肝癌患者血清中产生的抗ZNF216抗体水平高于正常个体，ZNF216mRNA在肝癌组织内的表达明显高于癌旁组织。结论ZNF216在肝癌病人血清及癌组织内的过表达可能参与肝癌的发生，但还需要进一步研究证明。关键词：肝癌；SEREX；肿瘤抗原；锌指蛋白216中图分类号：R730．3文献标志码：AZincfingerprotein216up—expressedi

3、nhepatocellularcarcinomatissueandseraGUXiang—fan91，YUDe—cai2(1．Dept．ofScienceandResearchofLaboratoryMedicine；2．Dept．ofGeneralSurgery，theAffiliatedDrumTowerHospitalofNanjiIlgMedicalSchool。Nanjing210008，Chim)Abstract：ObjectiveTofindantigensrelatedwithhepatoce

4、llularcarcinoma(HCC)．MethodsHumanZincFin—gerProtein216(ZNF216)WasidentifiedbySEREX(serologicalanalysisofrecombinantcDNAexpressionlibrar-ies，SEREX)．rIk6宰HisfusionproteinofZNF216wasexpressedbybacteriaandpurifiedwithanickelaffinitychromatographycoluinn．Theleve

5、lofanti．ZNF216antibodyintheseraWasdetectedbyEHSA．andZ^f眩J6mRNAlevelinHCCtissueanditsperipheralnormaltissueWasdetectedbyRT．PCR．ResultsThelevelofanti．ZNF216antibodyintheseraofHCCpatientswashigherthanthatofhealthyindividuals．ZⅣF2J6mRNAlevelinHCCtissueiSevident

6、lyhigherthanperipheralnormaltissue．ConclusionTheover—expressionofZNF216intheHCCseraandtissueindicatesthatZNF216perhapsplaysaroleinHCC．Keywords：HCC；SEREX；tumorantigen；ZNF216肝癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)是全球最常见的恶性肿瘤之一。目前，临床中用于诊断肝癌的标志物仅有AFP，并且还有30％的漏诊率。因此，迫切需

7、要鉴定一些能特异性在早期肝癌组织中表达而在正常组织中不表达或极少量表达的分子和细胞标志物，这对于肝癌早期诊断和治疗将具有重要的指导意义。SEREX(semlogicalidentificationof收稿日期：2007—07—31修回日期：2007—12—28antigensbyrecombinanteDNAexpressioncloning，SEREX)技术，即应用重组cDNA表达克隆对肿瘤抗原进行血清学鉴定的一种手段¨。2]。我们应用SER-EX方法对肝癌组织cDNA文库进行血清学筛选，获得N36这一克隆

8、，N36即为人类锌指蛋白ZNF216(ZincFingerProtein216，ZNF216)。本研究初步研究了ZNF216在肝癌中的可能作用，这将丰富肿瘤抗原2008．28(6)基础医学与临床Basic&ClinicalMedicine611库，并对肝癌的临床诊断和治疗提供重要依据。1实验1．1肝癌患者血清筛选cDNA文库肝组织eDNA文库购于NOVAGEN，是由7个肝癌病人的肝组织构建成的，其连