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《高效液相衍生化法测定大蒜氨基酸指纹图谱》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、新疆医科大学学报JOURNALOFXINJIANGMEDICALUNIVERSITY2010May.,33(5)509*高效液相衍生化法测定大蒜氨基酸指纹图谱1*****11杨瑾,陈坚,李新霞,高晓黎(新疆医科大学药学院,新疆乌鲁木齐830011)摘要:目的参照中药材指纹图谱研究的技术要求(暂行),建立大蒜中氨基酸指纹图谱及技术参数。方法高效液相色谱法,以邻苯二甲醛为衍生化试剂,以0.045mol/ml磷酸盐缓冲液乙腈1,4-二氧六环四氢呋喃(69.925.02.92.2)为流动相,
2、337nm检测。10个不同产地大蒜所得的色谱图用中药色谱指纹相似度评价系统(2004年A版)分析评价。结果精密度、重现性、稳定性实验RSD不大于3%。指纹图谱共有峰6个,相似度在0.90以上。结论本方法稳定、准确,为进一步控制大蒜的质量提供依据。关键词:大蒜;高效液相色谱;衍生化;指纹图谱中图分类号:R9文献标识码:A文章编号:1009-5551(2010)05-0509-03DeterminationoffingerprintofaminoacidsingarlicbyderivationHPLC
3、YANGJin,CHENJian,LIXin-xia,etal(FarmacyInstitute,XinjiangMedicalUniversity,Urumqi830011,China)Abstract:ObjectiveDeterminationoffingerprintandtechnicalparameterofaminoacidsingarlicaccordingtoSpecificationaboutfingerprintofChineseherbalmedicines(Tentativestand
4、ard).MethodsAHPLCmethodwasusedwitho-phthaldialdehydederivatization,withthedetectionwavelengthof337nm,themobilephasewas0.045MPhosphatebuffer,acetonitrile,1,4-dioxane,tetrahydrofuran(69.925.02.92.2).Tensamplesfromdifferenthabitatswereanalyzedandevaluatedusi
5、ngthesimilarityevaluationsystemforchromatographicfingerprintoftraditionalChinesemedicine(Version2004A).ResultsTherelativestandarddeviation(RSD)ofprecisionandreproducibilitywasnotmorethan3%.Inthefinger-printofgarlic,chromatographicpeakownedbyallofgarlicsamples
6、wassix.Thesimilarityofsampleswasallabove0.90.ConclusionThemethodisaccurate,convenient,stableandthechromatographicfingerprintscanbeservedasapowerfultoolforthefurtherqualitycontrolofgarlic.Keywords:garlic;HPLC;derivation;fingerprint[1]百合科葱属植物大蒜(AlliumsativumL
7、)的胱氨酸等。蒜氨酸是大蒜中主要的含硫氨基酸,[2]氨基酸可分成两类:一类是组成蛋白质的氨基酸,另具有多种药理活性。袁耀佐等采用HPLC-MS/一类是非蛋白质氨基酸。前者包括半胱氨酸、组氨MS测定大蒜中有关物质,结果表明大蒜中不仅含酸、赖氨酸、丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸等。非蛋白质有脯氨酸、门冬酰胺、谷氨酰胺、精氨酸,还含有甲基氨基酸主要有蒜氨酸(S-烯丙基-L-半胱氨酸亚砜,-L-半胱氨酸亚砜,异蒜氨酸和环蒜氨酸。SACS)、脱氧蒜氨酸(S-烯丙基-L-半胱氨酸,由于氨基酸种类较多,结构相近,紫外吸收靠近[3]SA
8、C)、S-甲基-L-半胱氨酸(SMC)、-L-谷氨二酰末端,衍生化分析法可提高分析检测的灵敏度。-S-烯丙基-L-半胱氨酸、(-)-N-(1-去氧-1--D-衍生化试剂邻苯二甲醛(OPA,o-phthaldialdelhyde)吡喃果糖基)-S-烯丙基-L-半胱氨酸亚砜、(+)-S能与一级氨基酸反应生成具有荧光的异吲哚衍生产-(反-1-丙烯基)-L-