奶牛微生态制剂中几种益生菌生物学特性的研究

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1、试验研究;<=>?9<@@8:奶牛微生态制剂中几种益生菌生物学特性的研究王美秀3，张爱荣/，郝永清/（3’内蒙古鄂尔多斯市农牧业局，内蒙古东胜034000；/’内蒙古农业大学动物科学与医学学院，内蒙古呼和浩特030035）微生态制剂具有增强动物机体免疫力、生物颉颃、维持肠道微生态平衡、产生有益代谢产物等摘要：该试验对益生菌酿酒酵母、产朊假多种功能，且具有不残留、不产生耐药性等优点。丝酵母、嗜酸乳杆菌、地衣芽孢杆菌、丙酸因此，用微生态制剂来增强奶牛的免疫力和抗病丙酸杆菌的生物学特性进行了研究。试验力，可达到防治隐性乳房炎的目的。笔者选择了/结果表明，这几种

2、益生菌可以用于研制防株酿酒酵母、产朊假丝酵母、嗜酸乳杆菌、地衣芽治奶牛隐性乳房炎的微生态制剂。孢杆菌、丙酸丙酸杆菌共1株益生菌，准备用于研关键词：益生菌；生物学特性；微生态制剂制防治奶牛隐性乳房炎的微生态制剂。中图分类号：P8N8’84；D525’/N4’/1!试验材料文献标识码：Q!"!菌种文章顺序编号：314/62380（/001）0260003602!试验菌种：地衣芽孢杆菌（!"#$%%&’%$#()*$+,-./$’，AB6/），从土壤中分离获得；丙酸丙酸杆菌（0.-1$-*$2"#3).$&/"#$41.-*$-*$#$，CC63），从青贮饲#

3、试验方法料中分离获得；酿酒酵母（5"##(".-/6#)’#).)7$’$")，#"!CC63菌培养基的确定DE63）、嗜酸乳杆菌（8"#3$2"#$%%&’"#$4-1($%&’，BA63）液体培养基（CCE）：牛肉膏30=，蛋白胨30=，均由内蒙古农业大学动物科学与医学学院微生物葡萄糖/0=，J/!CK7/=，酵母浸膏2=，加蒸馏水!教研室保存。酿酒酵母（5"##(".-/6#)’#).)7$’$")，3000)B，#!值4’0，32GC:，灭菌/0);.。DE6/）、产朊假丝酵母（9"*4$4"&3$%$’，EF63）均购自固体培养基：在液体培养基

4、中加入3’2LM/L中国科学院微生物研究所菌种保藏中心。琼脂粉。先将CC63菌用上述液体培养基在试管内畜"抑菌试验指示菌：致病性大肠杆菌（:’+传/代（每一代在N4O温箱培养35M/7?），然后牧#().$#($"#-%$）、金黄色葡萄球菌（53"1(6%-#-##&’"&+接入200)B三角瓶内（内装300)B上述液体培与饲.&’）均从患隐性乳房炎奶牛的乳中分离获得。养基），在N4O温箱内培养35M/7?后，从三角瓶料中取3)B培养液，用灭菌生理盐水做3063，306/，!"#培养基科营养肉汤，营养琼脂斜面，GHD，脱脂乳，葡萄306N，3067，30

5、62，3061，3064稀释。取3067，3062，3061稀释学糖6蛋白胨6酵母汁（ICD）。度的稀释液各0’/)B，加入到灭菌平皿中，每个稀!!"$试验动物释度加N个平皿，然后加入冷却到72O左右的""#$小白鼠（昆明系）购自内蒙古大学实验动物中心。CCE固体培养基，摇匀，待凝固后，置于N4O温箱%%&&培养35M/7?，等长出菌落后，进行菌落计数。&收稿日期：/0016076/5’(项目来源：内蒙古自治区科技攻关项目（/0070303）。#"#单个菌株的毒性检验)*+作者简介：王美秀（3818—），男，硕士，兽医师，主要将DE63、DE6/、EF6

6、3在ICD固体斜面培养基,’-.从事预防兽医学的研究。上传代/次（每一代在N0O温箱培养/7MN1?）通讯作者：郝永清，男，教授，博士，主要从事预防兽后，用灭菌生理盐水把斜面上的菌苔冲洗下去，用医学的研究，96):;,$*<.=>;.=?:<3810@*:?<<’-<)’-.。麦氏比浊管调整菌液浓度，制成每毫升含菌约20/001年第2期!!试验研究!"#$%&"’’()亿个的菌液，备用。!"%"$"$98"5、BB"1菌的培养：将98"5、BB"1菌将89"1菌在脱脂乳培养基中传代1次，再接分别在营养琼脂斜面、BBC斜面上培养3代（每一种到:;<液体培养

7、基中，3=>下培养5?@。然后代在3=>温箱培养1DE5?@）。将培养液3666A/#离心16#%)，弃掉上清液，用!"%"$"!调培养基的/J值：配制营养肉汤和灭菌生理盐水将菌液稀释，并用麦氏比浊管调整BBC液体培养基各1566#8，分别分装到11个菌液浓度为每毫升含菌76亿个的菌液，备用。小输液瓶中，用酸度计初步调/J值分别为107，将98"5和BB"1菌分别用营养琼脂斜面和506，306，?06，706，707，=06，D06，I06，16，然后高压灭BBC固体斜面传5代后，用灭菌生理盐水把斜面菌。灭菌后，用酸度计精确调/J值分别为107，506，

8、上的菌苔冲洗下去，用麦氏比浊管调整菌液浓度，305，?06，706，70?，=0