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《甲醇对胰蛋白酶催化活性影响的机理研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第14卷第4期生命科学研究Vo1.14No.42010年8月IJifeScienceResearchAug.2010甲醇对胰蛋白酶催化活性影响的机理研究宋翼行,黎春怡,黄卓烈,郭诗静,巫光宏,,何平·(1.华南农业大学生命科学学院,中国广东广州510642;2.茂名职业技术学院化工系,中国广东茂名525000)摘要:为了探索甲醇影响胰蛋白酶催化活性的作用机理,将胰蛋白酶纯化到电泳纯的水平,用纯酶进行了催化动力学研究;测定了酶分子的紫外吸收光谱、紫外差示光谱和荧光发射光谱的变化.试验结果表明:胰蛋白酶经7%甲醇处理时,其比活力比对照提高了l7.97%.经甲醇处理后的胰蛋白酶,其动力学
2、参数K值及~值均得到提高,且提高幅度比较大.甲醇处理后,酶的紫外吸收光谱基本没有变化.其差示光谱出现明显的正峰和负峰,而其荧光发射光谱也基本不变,只是荧光强度有所增加.实验结果证明,在7%甲醇存在下.胰蛋白酶分子构型不变,酶活性的变化是甲醇引起酶分子构象改变的结果.关键词:甲醇;胰蛋白酶;动力学:光谱分析中图分类号:Q55文献标识码:A文章编号:1007—7847(2010)04—031l一05StudyontheEffectsofCarbinolSolventsonTrypsinActivitySONGYi—hang,LIChun.yi,一,HUANGZhuo—lie,GUOSh
3、i-jing,WUGuang—hong.HEPing(1.CollegeofLifeSciences,SouthChinaAgriculturalUniversity,Guangzhou510642,Guangdong,China;2.MaomingVocationalandTechnicalCollege,Maoming525000,Guangdong,China)Abstract:Inordertofindthemechanismoftrypsinincarbinolsolution,thetrypsinwaspurifiedtoelectrophoresispurity.Th
4、epurifiedenzymewasusedtotestthecatalytickinetics,theultravioletabsorptionspectrum,thedifferentialultravioletspectrum,aswellasthefluorescentemissionspectrumoftheenzyme.Itwasindicatedthatthespecificactivityoftrypsinin7%carbinolsolutionincreasedby17.97%.Whentrypsinwastreatedwithcarbinol,bothKandw
5、ereincreased.Aftertreatingwithcarbinol,theultravioletabsorptionspectrumandthefluorescenceemissionspectrumofenzymewerealmostunchanged.Butthedifferentialultravioletspectrumshowedfaintnegativeandpositivepeaks.Theresultsshowedthatthechangeoftheactivityoftrypsinin7%carbinolsolutionwasnottheresultso
6、ftheconfigulationchangebuttheconformationchangeoftheenzyme.Keywords:carbinol;trypsin;kineticsanalysis;spectrumanalysis(,J/reScienceResearch,2010,14(4):311~315)胰蛋白酶是动物来源的一种蛋白水解酶,分蛋白胨制备、蛋白质的序列分析、多肽的酶促合子质量为23800,易溶于水,具有较好的热稳定成以及亲和吸附分离等方面显示出广泛的应用性,临床上可用于抗炎症和消化药物的复配,工前景.以往普遍认为,酶只有在水溶液里才能业上可用于皮革加工和生
7、丝处理.近年来,该酶维持催化活性结构,有机合成常用到的有机溶剂还在酒类和饮料的澄清、畜血蛋白质的水解、胰常常使酶变性或失活.但也有研究结果表明,酶收稿日期:2010—04.10;修回日期:2010—06.17基金项目:国家自然科学基金资助项目(10074016)作者简介:宋翼行(1985一),女,广东汕头人,硕士研究生,主要从事酶学和蛋白质研究;通讯作者:黄卓烈(1950-),男,广东廉江人,华南农业大学生命科学学院教授,博士生导师,主要从事酶学、酶工程和蛋白质研究,
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