资源描述：
《中华检验医学杂志》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中华检验医学杂志2002年7月第25卷第4期 ChinJLabMed,July2002,Vol25,No.4·197··论著·缺氧时内皮细胞中血管内皮生长因子受体的表达张曼 沈乐 周爱儒 【摘要】 目的 探讨脐带静脉内皮细胞在缺氧条件培养下血管内皮生长因子特异受体的表达,为进一步研究血管内皮生长因子及其受体在新血管生成中的作用提供理论依据。方法 体外培养脐带静脉内皮细胞,不同缺氧时间处理及血管活性因子刺激,提取组织总RNA,应用Northern杂交和逆转录聚合酶连扩增反应(RT2PCR)等方法,观察基因表达的变化
2、。结果 内皮细胞无缺氧和缺氧3h均未见flt21表达,缺氧6h可见flt21摸板核糖核酸(mRNA)的表达。内皮细胞缺氧6h,内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、LNNA对flt21表达有影响。ET促进flt21mRNA的表达,NO抑制其表达,而LNNA部分恢复其表达。在无缺氧和缺氧3,6hKDR基因均有表达。内皮细胞缺氧6h,ET、NO、LNNA对KDR无影响。LNNA阻断了内源性NO后,明显促进KDRmRNA的表达,其他无作用。结论 在缺氧条件下血管内皮细胞生长因子的受体flt21表达明显增加并受血管活性因子调节
3、,KDR有表达且部分受血管活性因子调节。【关键词】 内皮生长因子; 细胞,低氧; 基因表达3EffectsofvascularendothelialgrowthfactorreceptorsonendothelialcellsinhypoxiaZHANGMan,3SHENLe,ZHOUAiru.CenterofClinicalDiagnosisofBeijingRailwayGeneralHospital,Beijing100038,China【Abstract】ObjectiveInordertostudythe
4、importantroleoftwospecificVEGFreceptors(Flt21andKDR)inangiogenesis,wedesigntheexperimenttodetectthegeneexpressionofFlt21andKDRinhumanumbilicalveinendothelialcellsculturedinhypoxium.MethodsWeculturedthehumanumbilicalveinendothelialcellsfordifferenttimeandtreate
5、ditwithvascularactivatefactor,suchasendothelin(ET),Nitricoxide(NO),LNNA(inhibitorofNO).TheexpressivelevelwasanalyzedbyNorthernblotorRT2PCR.ResultsHypoxiaincreasesflt21mRNAinendothelialcellsat6hours.AdministrationofETstimulatedanincreaseinflt21mRNA.NOinhibitede
6、xpressionofflt21mRNA.LNNAincreaseditsexpression.HypoxiapartlyaffectedtheexpressionofKDR.LNNAenhancedtheVEGFtranscripts.ConclusionHypoxiaup2regulatedflt21geneexpression,partlyKDR.ETenhancedandNOinhibitedflt21geneexpression.【Keywords】Endothelialgrowthfactor;Cell
7、hypoxia;Geneexpressi[1,2] 血管内皮生长因子(VEGF)的生物学作用是通的表达增高,也有VEGF受体表达的相应增加。过VEGF的两种特异受体Flt21和KDR介导的。在缺血模型中应用VEGF系统处理只有缺血部位选VEGF通过与其特异受体Flt21和KDR结合,活化了择性的血管再生而正常部位则无新生血管形[3,4]受体自身的酪氨酸激酶引起受体胞内区酪氨酸的自成。从这种局部生物学效应推测缺血部分可能身磷酸化,发生受体结构变化。含有100个氨基酸伴有VEGF受体表达的增高和局部因子的释放。缺稳定
8、序列的关键信号蛋白即SH2(Srchomologyregion血区新血管增生可能不仅与VEGF直接相关,而且2)区从胞浆转位到膜,与受体上酪氨酸2磷酸化的残也与VEGF受体和其他活性因子有关。但未见基特异识别并高度亲合,活化细胞内信号传导系统,VEGF、VEGF受体和血管活性物质之间关系的报道。引起核内VEGF基因活化,表达mRNA,翻译蛋白,材料和方法发挥
