siRNA体内递送

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1、siRNA的体内递送*师明磊，赵志虎，王洋，陈惠鹏军事医学科学院生物工程研究所，北京100071摘要：RNA干扰是一种由小干扰RNA介导的转录后基因沉默。自利用RNAi沉默目的基因获得成功以来，体内应用RNAi的研究受到高度重视。由于siRNA本身的不稳定性以及体内的复杂环境，siRNA递送的安全性与有效性成为目前关注的重点。文章就目前报道的siRNA体内的递送方式进行了综述。关键词：RNAi;siRNA;siRNA递送InvivodeliveryofsiRNASHIMing-Lei,ZHAOZhi-Hu,WANGYang,CHENHui-PengBeijingInstituteofBiot

2、echnology,Beijing100071,ChinaAbstract:RNAinterference(RNAi)isamechanismofposttranscriptionalgenesilencingmediatedbysmallinterferingRNA(siRNA).TheabilityofsyntheticsiRNAtosilencegenesinvivohasmadeitwellsuitedastherapeuticdrug,buttheinstabilityandpolarityofsiRNAandthecomplexityofinvivocircumstancesre

3、tardedrapiddevelopmentofRNAi-basedtherapies.Inthisreview,asummaryoftheadvancesininvivosiRNAdeliveryispresentedanddiscussed.Keywords:RNAi;siRNA;siRNAdeliveryRNA干扰（RNAinterference,RNAi），是一种能够有效抑制基因表达的靶向性转录后基因沉默机制[1][2]。自Fire等在1998年发现并应用这种技术以来，它迅速成长为确认药物靶标和研究基因功能的有力[3]工具。现在，运用RNAi治疗遗传相关疾病也进入临床实验，有望成为新

4、的治疗药物。早期RNAi研究着重预测siRNA（SmallinterferingRNA）的活性。目前，由于可以免费获得高精度预测siRNA的方法，[4]人们意识到应用RNAi面临的主要问题是如何将其递送到生物体内。siRNA递送面临的主要困难是：1）siRNA极不稳定：在血浆中，由于核酸酶的存在，siRNA的半[5]衰期不到15min；2）siRNA进入作用靶位要经受重重挑战：由于siRNA的极性，它很难穿过脂质双分子层构成的细胞膜，siRNA在体内面临着不能迅速穿过血管内皮，滞留于肝脾等储血器官，被肾脏[6]排泄，在胞内不能被释放，以及被胞内核酸酶降解等不利因素；3）全身性给药要求siRN

5、A必须具有[7]靶向性：过去几年的实验证明，体细胞对siRNA会产生强烈的炎症反应，非靶向的细胞会摄取大量siRNA，在大量消耗siRNA的同时，还增强了炎症反应的程度。针对这些困难，人们探索、改进了多种不同的siRNA递送手段。1病毒载体递送1.1腺病毒载体与腺相关病毒载体腺病毒载体曾被广泛应用于基因治疗。由于其较强的细胞毒性和肝毒性，多用于局部注射。2002[8]年Li等首次报道了局部定向注射shRNA腺病毒表达载体对中枢神经系统进行RNAi治疗。运用局部定[9~12]向注射shRNA腺病毒表达载体治疗肿瘤也取得较好结果，但是局部注射不能适用于所有类型的肿瘤。与腺病毒载体相比，腺相关病毒

6、载体只有很低的细胞毒性，且具有感染分裂和非分裂细胞的能力，能特异性整合到人类宿主细胞的19号染色体，整合位点本身也不编码任何重要基因，避免了对宿主基[13]因组的干扰。腺相关病毒载体也都采用局部定向注射递送。1.2逆转录病毒载体与慢病毒载体逆转录病毒载体是RNA病毒。早期的逆转录病毒载体不具有感染非分裂细胞的能力，曾在临床实收稿日期：2008－10－30；修回日期：2008－12－09作者简介：师明磊（1979-），男，助理研究员，博士，研究方向：表观遗传学。Tel：66948775；E-mail：shiml1@yahoo.com.cn通讯作者：赵志虎（1969-），男，研究员，博士，研究方

7、向：表观遗传学。Tel：66948775；E-mail：zhaozh@nic.bmi.ac.cn[14]验中引起严重的X染色体相关严重免疫缺陷综合症（X-SCID）。以HIV为基础发展起来的慢病毒（逆转录病毒的一个亚类）载体系统改进了这些不足。慢病毒载体能够感染分裂和非分裂细胞，且转染效[15][16]率也明显增加。其感染非分裂细胞的能力尤其适用于神经细胞，因此，慢病毒载体主要用于中枢[17]神经系统局部注射