反相色谱法测定尼泊金甲酯

《反相色谱法测定尼泊金甲酯》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、反相色谱法测定尼泊金甲酯一、实验目的1、了解反相色谱法测定试样中尼泊金甲酯的含量的实验原理和方法；2、了解高效液相色谱仪工作原理和使用方法；3、掌握外标法进行色谱定性分析的方法和原理。二、实验原理1、尼泊金甲酯的物理、化学性质又称对羟基苯甲酸甲酯（结构式如右图），又叫尼泊金甲酯，白色结晶粉末或无色结晶，易溶于醇，醚和丙酮，极微溶于水，沸点270-280℃。主要用作有机合成、食品、化妆品、医药的杀菌防腐剂，也用作于饲料防腐剂。2、液相色谱工作原理在经典色谱分离方法上，色谱柱是以特殊的方法用小颗粒填充物填充而成。并给

2、流动相施加高压，以提高色谱分离效果。3、外标法原理先测量一系列尼泊金甲酯标准溶液的色谱峰，得到峰面积。然后用峰面积对溶度作图，得一标准曲线。然后在相同实验条件下测定样品中尼泊金甲酯的峰面积，由标准曲线上找出该峰面积下所对应的溶度，从而算出试样中尼泊金甲酯的含量。三、仪器及药品高效液相色谱仪、色谱柱（长75mm，柱径4.6mm）、紫外检测器（254nm）、微量注射器（25ug）、移液枪；10mg/mL尼泊金甲酯标准溶液、流动相：甲醇：水=70：30混合试剂，流速为1mL/min、未知溶液、蒸馏水。四、实验过程1、以

3、流动相为溶剂，配制0.02mg/mL、0.04mg/mL、0.06mg/mL、0.08mg/mL、0.10mg/mL的尼泊金甲酯标准溶液。2、设置好仪器的各参数，测定标准溶液（每次进样为20uL），得色谱峰并记录峰面积和出峰时间（死时间tR）。3、进20uL未知溶液，得色谱峰，记录峰面积和出峰时间（死时间tR）。五、数据记录和处理1、实验数据记录如下表数据试剂tR/min峰面积标准溶液11.170227188021.167492355231.168767819941.160967183151.1721070117

4、0未知溶液61.1696715260根据实验数据做标准曲线如下图拟合的标准曲线：y=108034000*C+567268.7Adj.R-Square=0.96482、根据标准曲线，得到未知样浓度为0.057mg/mL六、结果反思实验过程中进样是要快速；溶液的配制要精准；每次要润洗次数要足够多；为得到的数据线性关系更佳，可多测量几次。附未知溶液的色谱峰图及相关数据