最新日本食品微生物检测方法

《最新日本食品微生物检测方法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、日本食品微生物检测方法1、细菌总数检查方法⑴操作步骤:平板计数琼脂混释法，适用于①②③类产品。调制样液25g样品+225ml灭菌生理盐水,均质混匀↓样液接种10、100倍稀释液分别向两个空培皿中注入1ml↓混释分别向两平皿中注入12-15ml平板计数琼脂，混释后，将培养基表面干燥↓培养将培皿反倒过来，35±1℃培养48hr↓计数⑵判定①特别是稀释度低的平皿，微生物的菌落和食品的碎渣很难区分，一般以食品产生的碎渣没光泽，不够光滑等来识别。②产生30-300个菌落，每个稀释度的培养皿中的全部菌落数用以计数，取

2、两个的平均值来表示③以最低稀释度，菌落发育不到30个以上的时候也同样要将菌落数计算出来，取其平均值作为结果④以最高稀释度，菌落数可以数到300个以上的时候将平皿划分成1/2～1/8（等份），数出其中1个格子里的菌落数再乘以倍数（即分数）就可以算出来。2、大肠菌群检验方法⑴去氧胆酸盐琼脂培养基混释培养法，适用于①类产品。①推定检验操作顺序调制样液25g样品+225ml灭菌生理盐水,均质混匀↓样液接种100倍稀释液分别向两个空培皿中注入1ml↓混释分别向两平皿中注入去氧胆酸盐琼脂，混释后，将培养基表面干燥，重

3、层↓培养将培皿反倒过来，35±1℃培养48hr↓推定断定发育出直径0.5mm以上的亮红色菌落的时候，推定为阳性。熟练的话，到该步即可作出判断，必要时进行以下确认②确认检验步骤菌线涂抹用接种针挑取可疑地菌落，在EMB培养基上画线涂抹↓培养35±1℃培养24小时↓菌移植EMB培养基上的定型菌落的一半接种于乳糖肉汤，剩余一半涂抹在平板计数琼脂上↓培养35±1℃培养48小时↓革兰氏鉴别菌行芽孢判定在乳糖肉汤中产气的菌株是用平板计数琼脂的菌↓确认判定在EMB培养基上呈金属光泽暗紫红色的菌落作为定型菌落，在乳糖肉汤中

4、产气且革兰氏染色呈阴性就判为阳性⑵双倍量BGLG培养基检验，适用于③类产品①推定检验操作顺序调制样液25g样品+225ml灭菌生理盐水,均质混匀↓样液接种取10ml的10倍稀释液接种于盛10mlBGLB中，分别接种3只管↓培养35±1℃培养48小时↓断定浑浊产气则判为阳性确认检验步骤同⑴中②3、大肠杆菌的检验，EC检验，适用于②类产品推定检验操作顺序调制样液25g样品+225ml灭菌生理盐水,均质混匀↓样液接种取1ml的10倍稀释液接种于盛EC管中，分别接种5只管↓培养44.5±0.2℃培养24小时↓断定

5、浑浊产气则判为阳性确认检验步骤同大肠菌群的确认4、金黄色葡萄球菌检验方法①甘露醇琼脂（MS）培养基平板涂抹法，适用于①②③类产品样液调制25g样品+225ml灭菌生理盐水,均质混匀↓样液接种取10倍稀释液0.1ml接种于干燥的MS培养基上↓平板涂抹用L型玻璃棒涂抹↓培养43±1℃培养24小时（公定方法35±1℃培养48小时）↓推定判定定型菌落，金黄色葡萄球菌在MS板上显示出卵黄反应：首先将培养皿倒过来寻找产生浑浊带的菌落，其次拿掉培养皿的盖子，从培养皿的表面将平板向着阳光倾斜看到菌落的时候，它的周围确认有

6、象月晕一样的圆形油膜的时后就判定是阳性。或者没有圆形的油膜的时候、只要菌落的周围有白色的浑浊带也判定为阳性。熟练的话，到该步即可作出判断，必要时进行以下确认①确定检查步骤菌移植将卵黄琼脂平板上的定性菌落接种于牛心浸汤↓前培养35±1℃培养18-24小时↓菌移植实验兔血浆（干燥）按通常的方法溶解、每个小试管中分别注入0.5ml↓静置35±1℃、4小时静置↓推定判断血浆的凝固或着进行纤维蛋白的析出血浆的凝固（将试管倒置看）或着进行纤维蛋白的析出，每隔30分钟的观察进行4小时，没有观到凝固的时候、就要在第6、2

7、4小时的时候观察，凝固酶实验的结果，如果血浆的凝固或纤维蛋白析出就判定实验呈阳性。MS培养基平板上显示出卵黄反应的典型菌落，大多数的时候凝固酶实验也呈阳性。