血型鉴定方法及报告错误原因分析方案

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1、血型鉴定方法及报告错误原因分析十堰市妇幼保健院检验科杨业伟主要内容一.血型系统概述二.ABO血型及Rh血型鉴定方法三.血型鉴定注意事项四.血型报告错误原因分析1.ABO血型系统概述血型是指一个人红细胞上带有或者缺乏一些特异性的物质。这些特异性的物质称为抗原。ABO血型分类原则：红细胞上有A抗原、血清中有抗B者称为A型；红细胞上有B抗原、血清中有抗A者称为B型；红细胞上有A和B抗原、血清中无抗A和抗B者称为AB型;红细胞上无A和B抗原、血清中有抗A和抗B者称为O型。2.Rh血型系统概述Rh血型系统内有45种不同的抗原，主要以D、E、C、c、e为主要，其中D抗原最重要，根据红细胞上D抗原的有

2、无，可分类红细胞为Rh阳性或Rh阴性。鉴定原理：常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗体，依据抗原抗体存在的情况判定血型。常规的方法有：①正向定型：用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。②反向定型：用已知血型的标准红细胞检查血清中未知的抗体。结果判定：凡红细胞出现凝集者为阳性，呈散在游离状态为阴性3.ABO血型鉴定方法生理盐水凝集法：①玻片法：操作简单，适于大量标本检查，但反应时间长；被检查者如血清抗体效价低，则不易引起红细胞凝集，因此，不适于反向定型。②试管法：由于离心作用可加速凝集反应，故反应时间短，而且，借助于离心力可以使红细胞接触紧密，促进凝集作用

3、，适于急诊检查。红细胞亚型抗原性弱，如抗A抗B标准血清效价低时，易造成漏检或误定。如加用O型（抗A、B）血清和反向定型，可避免此类错误。ABO血型鉴定凝胶微柱法是红细胞抗原与相应抗体在凝胶微柱介质中发生凝集反应的免疫学方法。血型抗体为单克隆抗体，加入试剂、标本，用专用离心机离心后可直接用肉眼观察结果或用血型仪分析。此法操作标准化，定量加样，确保结果准确性ABO血型鉴定4.Rh血型鉴定Rh血型血清不含天然抗体，Rh血型的抗体是通过免疫产生的免疫抗体，根据免疫抗体的特性，在鉴定Rh血型时，要用检测免疫抗体的方法进行测定，用酶法、聚凝胺法等，如有单克隆的IgM型的抗D，才可用盐水法。Rh血型鉴

4、定方法一、酶介质法二、盐水法三、聚凝胺法四、抗人球蛋白法Rh血型鉴定一、酶介质法Rh血型抗体因其分子量小，在结合了具有相应抗原的红细胞后，并不能将相邻的红细胞彼此连接起来，使红细胞发生凝集。酶（木瓜酶、菠萝酶等）可破坏红细胞表面带负电荷的唾液酸，降低红细胞表面负电荷，使红细胞之间排斥力减小，红细胞间距缩小，在不完全抗体的作用下发生凝集。二、盐水法又称为人源盐水介质抗D试验，是采用二硫苏糖醇等物质作为免疫球蛋白化学变性剂，处理采自人源的IgG抗D血清，使小分子的IgG抗体“转变”成类似大分子的“IgM”抗体的作用。这种IgM型抗D血清可用于Rh血型系统D血型的快速检测。Rh血型鉴定Rh血型

5、鉴定三、聚凝胺法聚凝胺是一种高价阳离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多阳离子，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞间距缩小，发生可逆性的非特异性凝集；低离子强度溶液可降低红细胞的Zate电位，可进一步增强抗原抗体间的引力。Rh血型鉴定四、抗人球蛋白法不完全IgG类抗D抗体结合了含有相应抗原的红细胞后，因其分子量小，在盐水介质中只能与红细胞结合，使红细胞致敏，即在D红细胞包被一层IgG抗体，而不能使其连接起来发生凝集。加入经一定稀释的抗人球蛋白血清后，抗人球蛋白可与红细胞上结合的不完全抗体结合，将致敏红细胞连接，发生肉眼可见的凝集。血型鉴定注意事项1.①所用器材必须干燥清洁、防止溶血，凝集，

6、避免交叉污染，标准血清从冰箱取出后，应待其平衡至室温后再用，用毕后应尽快放回冰箱保存。②加试剂顺序：一般先加血清，然后再加红细胞悬液，以便核实是否漏加血清。③虽然，IgM抗A和抗B与相应红细胞的反应温度以4℃最强，但为了防止冷凝集现象干扰，一般在室温20℃～24℃内进行试验，而37℃条件，可使反应减弱。血型鉴定注意事项1.④幼儿红细胞抗原未发育完全、老年体弱者抗原性较弱，最好采用试管法鉴定血型。⑤玻片法反应时间不能少于10min，否则较弱凝集不能出现，造成假阴性。⑥正、反定型结果一致才可发报告。⑦反定型法：先天性免疫球蛋白缺陷，长期大量应用免疫抑制，血型抗体可减弱或消失；血清中存在自身免

7、疫性抗体、冷凝集素效价增高、多发性骨髓瘤、免疫球蛋白异常均可造成反定型困难；新生儿体内可存在母亲输送的血型抗体，且自身血型抗体效价又低，因而出生6个月以内的婴儿不宜做反定型。老年人血清中抗体水平大幅度下降或被检者血清中缺乏抗A及（或）抗B抗体，可引起假阴性或血型鉴定错误。5.临床血型报错常见原因分析操作错误用试管法检测血型时，红细胞浓度与抗原抗体比例不适，如红细胞悬液过浓，标准血清中抗体全部被吸收，呈后带现象不明显凝集或者凝集；红细