化学发光免疫分析方法与应用进展[1]

《化学发光免疫分析方法与应用进展[1]》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第40卷分析化学(FENXIHUAXUE)特约来稿第1期2012年1月ChineseJournalofAnalyticalChemistry3～10殝檵檵檵檵檵檵檵殝檵DOI:10．3724/SP．J．1096．2012．10765檵特约来稿檵檵殝檵檵檵檵檵檵檵殝化学发光免疫分析方法与应用进展*汪晨吴洁宗晨徐洁鞠熀先(南京大学生命分析化学国家重点实验室，南京210093)摘要化学发光免疫分析方法具有选择性好、灵敏度高、分析速度快、设备简单等特点，在环境、临床、食品、药物检测等领域得到了广泛应用。在实际应用中，常常需要对大量

2、复杂样品或低丰度分析物样品进行测定。而经典商品化的免疫分析方法所需时间长、样品消耗多、成本高，不能满足上述要求。因而建立快速、高通量、高灵敏和低成本的免疫检测方法已成为化学发光免疫分析方法的研究热点和发展趋势。本文简要总结近5年来化学发光免疫分析方法的研究进展及其应用，并展望其发展方向。关键词化学发光免疫分析;免疫传感;快速检测;多通道检测;评述1引言近年来，化学发光免疫分析方法由于其具有灵敏度高、特异性强、适用面广、所需设备简单、线性范［1～5］围较宽等优点，日益受到人们的青睐，在生命科学、临床医学以及环境、食品、药物等

3、领域得到广泛［6，7］应用。免疫分析过程所涉及的免疫反应主要是抗原与抗体间的识别。这些生物分子的体积大、扩散速率小，且由于对识别位点的空间阻碍作用，受传质速率和反应动力学控制的免疫反应速率一般比较低。因而传统的免疫分析方法需要较长的温育时间，常常需要数小时才能完成整个分析过程，大大限制了样品通量和应用范围。为缩短免疫分析的时间，研究工作者已设计了不同的方法，通过提高传质速率和反应动力学来实现快速免疫检测，从而扩展化学发光免疫分析的应用范围。在实际应用中，经常涉及到复杂体系多组分的测定。如在临床肿瘤诊断中，由于肿瘤标志物的特

4、异［8，9］性不足，常选择几种肿瘤标志物组成标志物组，通过联合检测提高临床诊断的特异性;又如在环境监控中，经常需要同时监测天然水体中多种杀虫剂与除草剂的浓度指标，以综合评价环境污染状［10，11］况。测定混合体系中多组分的含量通常只能采用多次单组分分析法，这种方法所需时间长、试剂消耗多、工作量过大。多组分同时或顺序检测具有分析通量高、所需时间短、样品消耗少、分析成本低等突出优点，已成为近年来的研究热点。已报道的新型化学发光多组分免疫分析方法中，有的通过设计芯［12～17］片，结合流动注射、电感耦合元件(CCD)技术达到多组

5、分测定;有的利用固相载体的特性，通过温［18］度分辨模式，达到同时检测的目的。另一方面，在实际应用中，常常需要检测低丰度分析物样品，发展高灵敏的化学发光免疫分析方法，是近年来免疫分析方法发展的主要方向。降低噪音和增强信号是提高免疫分析灵敏性的主要途径。降低噪音主要用小蛋白对生物功能界面进行封闭，以防止干扰物的非特异性吸附。免疫分析信号增强技术主要集中在功能界面的构建与信号探针放大两个方面。随着纳米技术的发展，纳米材料，如金纳米粒子、碳纳米管、碳纳米角、SiO2纳米粒子、量子点以及它们的复合纳米结构，已用于超灵敏免疫传感器的

6、［19，20］构建，纳米粒子在生物标记分析中的广泛应用取得了突破性的进展。一些纳米粒子不仅可以作为［21～24］［25～31］模拟酶直接催化化学发光反应，还可以用来负载大量的酶，通过酶催化反应实现信号放大，使纳米技术在高灵敏化学发光免疫分析中得到广泛应用，也促进了化学发光免疫分析的快速发展。本文简要介绍了化学发光免疫分析方法的原理，总结了近几年来化学发光免疫分析方法的研究进2011-07-02收稿;2011-09-10接受本文系国家重大基础研究发展计划项目(No．2010CB732400)、国家自然科学基金(Nos．208

7、75044，20821063，21075055)和江苏省自然科学基金(No．BK2008014)资助*E-mail:hxju@nju．edu．cn4分析化学第40卷展，并就化学发光免疫分析方法的前景进行了展望。2化学发光免疫分析法化学发光分析是根据化学反应产生的辐射光的强度来确定物质含量的分析方法。化学发光免疫分析是将化学发光系统与免疫反应相结合，用化学发光相关的物质标记抗体或抗原，与待测的抗原或抗体反应后，经过分离游离态的化学发光标记物，加入化学发光系统的其它相关物产生化学发光，进行抗原或抗体的定量或定性检测。化学发光免

8、疫分析中使用最多的4类标记物为鲁米诺、异鲁米诺及其衍生物，吖啶酯衍生物，过氧化物酶和碱性磷酸酶。以酶为标记物的化学发光仍然是化学发光免疫分析的主流，辣根过氧化物酶(HRP)与碱性磷酸酶(ALP)是两种常见的标记酶，均有其相应的化学发光底物，在临床检验中有广泛应用，开发催化活性更高、稳定性更好、发光动力学