毕业论文--冷胁迫条件下不同玉米自交系miR398基因靶基因表达研究

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1、目录中文摘要IAbstractII第一章文献综述1第一节低温冷害的类型及其影响1第二节miRNA研究价值22.1研究现状2第三节miR398简介33.1miR398的发现33.2miR398的靶基因33.3miR398与逆境胁迫3第四节qRT-PCR简介44.1技术方法简介44.2应用5第五节本研究的目的和意义5第二章冷胁迫条件下RNA提取检测7第一节材料与方法71.1试验材料71.2试剂配制71.3试验方法8第二节实验结果10第三章冷处理差异表达miR398及其靶基因的验证分析11第一节材料与方法111.1miR398的qRT-PCR111.2靶基因的qRT-PCR12第二节实验结

2、果14第三节结论15全文结论16致谢17参考文献18中文摘要玉米,禾本科玉米属植物,为世界最主要的粮食作物和饲料作物，同时也是全世界总产量最高的农作物。我国玉米的主产区位于东北地区，同时玉米也是东北种植面积最大的作物。基于地理位置等因素，影响东北玉米产量最大的非生物胁迫是冷胁迫。所以，进行关于玉米冷响应机理的分析和研究非常必要。MicroRNA(miRNA)是由21~24个核苷酸组成，由内源基因编码的非编码单链小分子RNA。miRNA对靶基因mRNA的作用方式主要有：一、切断靶基因的mRNA分子；二、抑制靶基因的翻译；三、结合抑制——结合以上两种形式。通过以上的方式对靶基因的表达水平

3、负调控，参与到转录后基因的表达中去，借此对植物的生长发育进行调控,同时当受到外界胁迫时，会通过改变表达进而调节植物体内的多种逆境胁迫应答。本研究通过对两个玉米自交系中miR398及其靶基因的表达情况进行比较分析，从而对miR398在植物受到冷胁迫下的表达调控进行研究分析。为阐释苗期玉米miR398调控的抗冷分子机理打下良好的基础。关键词：玉米；非生物胁迫；miR398；基因表达调控；胁迫应答；冷响应机制20AbstractMaize,oneoftheworld'sthreemajorfoodcrops,itsproductionontheworld'sfoodsupplyhasani

4、mportantimpact.NortheastChinaisthemainproducingareaofmaizeinChina,anditisoneofthelargestabalonecrops.ColdstressisoneofthemainabioticstressestolimitmaizeyieldinNortheastChina.Therefore,itisveryimportanttostudythemechanismofcoldresponsetomaize.MicroRNA(miRNA)isarecentlydiscoveredsmallmoleculeRNAw

5、ithalengthof21to24nucleotidesofnon-codingproteins.ItactsasanovelregulatorygenefortheexpressionofsmallRNAs,whichareinvolvedintheregulationofplantgrowthanddevelopmentbycontrollingtheexpressionofthetargetgeneatthepost-transcriptionallevelbytranscriptionortranslationofthetargetmRNA.Inducedexpressio

6、nchangesintheplantavarietyofstressresponsetotheprocessofplayanimportantregulatoryrole.ThemiR398geneexpressionincoldmaizewasstudiedbycomparingthemiR398geneintwomaizeinbredlines,whichlaidagoodfoundationforelucidatingthemolecularmechanismofmiR398regulationinmaize.Keyword:Maize;Abioticstress;miR398

7、;geneexpressionregulation;stressresponse;coldresponsemechanism20第一章文献综述低温、干旱、盐碱、矿物质缺乏等是日常生产作业中对植物生长发育以及作物产量造成影响最大的非生物胁迫。日常生活中的众多重要的作物，好比玉米、水稻、大豆和甘蔗等，大多抗冷性差，易受冷胁迫危害。在它们长期的进化过程中,产生了多种抗胁迫机制,涉及到许多代谢过程以及生理和分子水平的表达调控,其中胁迫应答基因在转录水平与转录后水平