果蝇的性别鉴定

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1、果蝇的性别鉴定、性状观察及饲养方法摘要：进行果蝇的性别鉴定、性状观察及了解饲养方法，掌握麻醉果蝇的方法，雌雄蝇的识别，几种突变性状的观察，处女蝇的收集方法，果蝇培养基的配制。记录果蝇的突变性状，主要集中在眼睛的颜色、形状，翅的形状、翅脉的形态，刚毛刚毛（果蝇体表粗、硬、长的毛）的颜色，形态，体色，平衡棒的大小、形态。1.引言：（1）果蝇作为实验材料的优势：果蝇是遗传学研究中最经典的模式动物。果蝇体型小，体长不到半厘米；饲养管理容易，既可喂以腐烂的水果，又可配培养基饲料；一个牛奶瓶里可以养上成百只。果蝇繁殖系数高，孵化快，只要1天时间其卵即可孵化成幼虫，2-3天后变成蛹，再

2、过5天就羽化为成虫。从卵到成虫只要10天左右，一年就可以繁殖30代。果蝇的染色体数目少，仅3对常染色体和1对性染色体，便于分析。作遗传分析时，研究者只需用放大镜或显微镜一个个地观察、计数就行了，从而使得劳动量大为减轻。（2）果蝇的麻醉用采用乙醚来麻醉的方法。（3）果蝇的雌雄的辨别主要是根据果蝇的大小、形态、条纹、性梳来进行辨别。（4）果蝇的突变性状主要集中在眼睛的颜色、形状，翅的形状/翅脉的形态，刚毛（果蝇体表粗、硬、长的毛）的颜色，形态，体色，平衡棒的大小、形态这些方面。2.实验材料2.1试验材料解剖镜(Olympus)、蓝色塑料板、小毛笔、解剖针、麻醉瓶、培养皿、野生

3、型果蝇、三隐型果蝇、黑檀型果蝇、残翅型果蝇。2.2试验方法2.2.1试验设计（一）果蝇麻醉及观察选择亲蝇进行杂交或观察果蝇的性状，都要先将果蝇麻醉，使之处于不活动状态。麻醉果蝇的操作步骤如下：（1）轻拍培养瓶壁，让果蝇震落到培养瓶上。如瓶塞上附着果蝇，则轻轻晃动瓶塞，让他们落到培养基上。（2）拔去麻醉瓶与培养瓶塞，迅速将培养瓶口倒扣在麻醉瓶口上。轻拍培养瓶让果蝇了麻醉瓶中。（3）把麻醉瓶中的果蝇拍落瓶底，拔出瓶塞，在塞子上滴几滴麻醉剂，重新塞入麻醉瓶。果蝇失去附壁能力，纷纷落入瓶底，麻醉即告完成。（4）将麻醉的果蝇置于解剖镜下用小毛笔或解剖针轻轻地拨动观察。如果蝇在观察时

4、苏醒，可用培养皿罩住，再在滤字条上滴几滴麻醉剂，伸入培养皿中再次麻醉。当果蝇翅膀上翘45°时，表示已经死亡。仔细进行观察，并做好实验的记录。（如果观察后果蝇不再需要，则将它们倒入尸体盛留器中。）（二）果蝇的生活周期果蝇属完全变态昆虫，一个完整生活周期可分为卵、幼虫、蛹和成虫4个明显的时期。25℃时成蝇一般在交配一两天即开始产卵.受精卵24小时内就可孵化成幼虫,幼虫经两次蜕皮成为三龄幼虫.幼虫生活4天左右来使成蛹.从蛹壳中羽化出来的果蝇8~12小时后即可交配(处女蝇就是指为交配的果蝇)。下图为果蝇生活周期示意图：（三）雌雄果蝇的辨别黑腹果蝇的一个优势是雌雄蝇的一些表型特征差

5、别很明显，即存在“雌雄二型”现象，很便于雌雄之分别：（1）大小雌雄通常比雄体大。（2）形态雌体腹部销尖，较宽厚呈卵圆形；雄体腹部钝圆，相对窄小呈柱状。（3）条纹雌体腹部背面有宽窄相近的5条黑色条纹；雄体腹背只有3条，上部2条窄，最后1条宽且延伸至腹部腹面，呈一明显黑斑。（4）性梳果蝇胸足跗节共有5亚节。雄蝇第一对胸足跗节的第一亚节基部有一梳状黑色鬃毛结构，即为“性梳”。放大100倍左右可看清这一结构。雌蝇没有性梳。性梳是鉴别雌雄蝇的可靠标志。观察腹部腹面末端外生殖器结构也是分辨雄雌蝇的简单的、可靠的方法。雄蝇外生殖器色深，雌蝇色浅。用下面的表格来表示雌雄间的主要差别：雌果

6、蝇雄果蝇体型腹部第一对足大末端尖背面：环纹５节、无黑斑腹面：腹片７节跗节基部无性能小末端钝背面：环纹７节、延续到末端呈黑斑腹面：腹片５节跗节基部有黑色鬃毛状性梳观察果蝇的雌雄，学习分辨雌雄的方法。并做好实验记录。（四）突变性状的观察果蝇自发的或诱发的突变数量巨大，从表型上说，果蝇的突变性状主要集中在眼睛的颜色、形状，翅的形状/翅脉的形态，刚毛（果蝇体表粗、硬、长的毛）的颜色，形态，体色，平衡棒的大小、形态这些方面。果蝇常见突变性状如下表：突变性状性状特征棒眼复眼呈狭窄垂直棒形，小眼数少褐眼眼呈褐色卷曲翅翅膀向上卷曲，纯合致死白眼复眼白色黑檀体身体呈乌木色，黑亮残翅翅明显退

7、化，部分残留，不能飞猩红眼复眼呈明亮猩红色（五）收集处女蝇的方法选择生长良好、含有较多即将羽化的蛹的培养瓶，清除瓶中所有成蝇。8~12小时内（8小时内更可靠）从瓶中收集幼蝇，麻醉，收集的雌蝇即为处女蝇。果蝇刚孵化性征没有发育完全的，可根据外生殖器结构分辨雌雄。处女蝇单独存放在一新的营养瓶内。反复收集，直到足够为止。一个杂交实验通常收集5~10只处女蝇即可。最好在距杂交实验前一星期左右开始收集处女蝇。这样能将收集到的处女蝇存放几天已检查“处女性”。如培养3~5天后瓶中出现幼虫则说明收集失败，需重新收集。（六）培养基的配制1.计算