血细胞形态学分析中国专家共识 (2013)

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1、血细胞形态学分析中国专家共识(2013年版)中华医学会血液学分会实验诊断血液学学组张水生1234血细胞形态学分析是血液病诊断分型的基本实验室检查,现今,国内不同单位在血细胞分析的操作、形态学描述术语和报告等方面极不统一[1]。为了规范血细胞形态学分析,中华医学会血液学分会实验诊断血液学学组组织国内有关专家在系统复习文献的基础上结合我国实际情况,经过反复讨论,形成了本共识。5一、名词与定义1.髓系原始细胞:髓系原始细胞包括原粒细胞、原单核细胞和原巨核细胞。原粒细胞分为两类:一类是无嗜天青颗粒的原粒细胞(亦称原粒细胞I型),另一类是有嗜天青颗粒的原粒细胞(亦称原粒细胞Ⅱ型)。原粒细

2、胞与早幼粒细胞的鉴别点是早幼粒细胞有清晰可辨的高尔基区(油镜下表现为核旁空晕区)。6幼单核细胞、急性早幼粒细胞白血病的粗颗粒和细颗粒早幼粒细胞、M的异常2b中幼粒细胞为原始细胞等同细胞(应归入原始细胞计数中)。原红细胞只有在诊断纯红系白血病时视为原始细胞等同细胞归入原始细胞计数中。不成熟单核细胞以及小的发育异常巨核细胞和微巨核细胞不是原始细胞等同细胞,不应计入原始细胞计数中。72.不成熟单核细胞:单核细胞包括原单核细胞、幼单核细胞、不成熟单核细胞和单核细胞。不成熟单核细胞胞体比单核细胞小,胞质嗜碱性比幼单核细胞弱但比单核细胞强,胞核转曲/有切迹,核染色质比幼单核细胞更浓集,极少

3、可见核仁。从形态上区分幼单核细胞、不成熟单核细胞和单核细胞有利于急性髓系白血病(AML)M5b与慢性粒-单核细胞白血病的鉴别诊断。89101112131415163.发育异常:发育异常(dysplasia)[4]是指形态学上异常发育,并不是与骨髓增生异常综合征(MDS)同义。这一名词只能用于3个髓系系别,其他系别细胞表现相似而形态学上异常发育者,如淋巴细胞和浆细胞,应依惯例冠以“不典型(atypical)”,“不典型”也适用于肥大细胞。造血发育异常可产生细胞学异常的红细胞[如异形红细胞或二形性(dimor-phic)红细胞组群]或血小板(如巨型、少颗粒或有异常颗粒),然而,“发

4、育异常”这一名词应限用于有核细胞。17正在接受集落刺激因子治疗的患者不能进行发育异常评估。此外,中性粒细胞颗粒增多、增粗常常是感染所致,这种细胞在诊断MDS或确认AML多系发育异常时不应计入发育异常细胞中。184.原始细胞非红系细胞计数:原始细胞非红系细胞计数(NEC)是1985年FAB协作组AML修订诊断标准中为了鉴别AML与MDS而提出的。为了鉴别AML-M和MDS,在骨髓有核细胞分6类计数时,当红系有核细胞占骨髓有核细胞比例≥0.50时,原始细胞比例应按NEC(除去红系有核细胞以及淋巴细胞和浆细胞等非造血细胞)计算,19如果原始细胞比例≥0.20则应诊断M,6否则诊断MD

5、S。当确定患者是诊断AML或MDS后,在进一步进行分型诊断时,AML是按原始细胞占NEC的比例,而MDS则是按原始细胞占有核细胞的比例。20二、血细胞形态学分析步骤1.标本收集与涂片制备:取髂骨(一般取自髂后上嵴,如果患者只能平卧或根据病情需要,必要时取自髂前上嵴或胸骨,儿童还可以选择胫骨)骨髓液涂于载玻片上,涂片上血膜应位于涂片中央位置,呈“舌头状”,分为头、体、尾三部分,一般涂片10张[5-6]。21每张骨髓涂片应用铅笔清晰注明患者姓名、标本来源、取材日期,并附有唯一的条形码标识。血膜过厚、涂片过于弥漫分布、出现凝块,均属于不合格标本。2.涂片染色:选取2张合格骨髓涂片进行

6、染色,染液选取瑞氏-姬姆萨复合染液[7],通常情况下,室温染色15-30分钟,流水冲去染液,待干燥后贴上纸质标签,注明患者姓名、标本来源、取材日期及唯一的条形码标识。22注意事项:①未干透的血膜不能染色,否则染色时血膜易脱落;②注意染色时间与染液浓度、染色时温度成反比,而与细胞数量成正比;③冲洗时不能先倒掉染液,应用流水冲去,以防染料沉淀在血膜上;④染色过淡时,可以复染;23⑤染色偏酸或偏碱时,均应更换缓冲液重染。对于细胞中各种蛋白质而言,如环境pH

7、偏蓝。因此,应使用清洁、中性的载玻片,稀释染液必须用pH6.8缓冲液,冲洗玻片必须用流水。243.光学显微镜下细胞形态学分析[6](1)低倍镜分析:①判断取材、涂片、染色是否满意:涂片太厚,细胞聚集不能展开,细胞形态不好辨认;涂片太薄,细胞全被推散,分布不匀,分类困难。染色太深,其结构不清,染色太浅,也不易形态辨认。良好的涂片应该是细胞恰好分开又不太分离、细胞染色后红蓝分明。25②判断增生程度:根据骨髓中有核细胞与成熟红细胞的大致比例将骨髓细胞增生程度分为5级:极度活跃(有核细胞:成熟红细胞

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