发酵工程基本操作

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1、2008-09-2722:49:34本资料由药智网收集整理http://www.yaozh.com发酵工程基本操作•第一节严格消毒灭菌•第二节氧的供给•第三节空气除菌微生物http://bbs.yaozh.com共53页第1页2008-09-2722:49:34本资料由药智网收集整理http://www.yaozh.com第一节严格消毒灭菌•控制有害微生物主要有以下几种措施微生物http://bbs.yaozh.com共53页第2页2008-09-2722:49:35本资料由药智网收集整理htt

2、p://www.yaozh.com除菌的方法•培养基的加热灭菌（包括常压或蒸汽高压加热法）•空气的过滤除菌•紫外线或电离辐射•化学药物灭菌微生物http://bbs.yaozh.com共53页第3页2008-09-2722:49:35本资料由药智网收集整理http://www.yaozh.com培养基的灭菌微生物http://bbs.yaozh.com共53页第4页2008-09-2722:49:40本资料由药智网收集整理http://www.yaozh.com一、影响培养基灭菌的因素•1、pH

3、值的影响•pH值对微生物的耐热性影响很大，pH为6.0-8.0时微生物最不易死亡，pH<6.0时氢离子易渗入微生物的细胞内。微生物http://bbs.yaozh.com共53页第5页2008-09-2722:49:41本资料由药智网收集整理http://www.yaozh.com•2、培养基成分•培养基的成分中，油脂、糖类、蛋白质都是传热的不良介质，会增加微生物的耐热性，使灭菌困难。•浓度较高的培养基相对需要较高温度和较长时间灭菌。•高浓度的盐类，色素则削弱其耐热性，故较易灭菌。微生物http

4、://bbs.yaozh.com共53页第6页2008-09-2722:49:42本资料由药智网收集整理http://www.yaozh.com•3、培养基中的颗粒物质•培养基中的颗粒物质大，灭菌困难，反之，灭菌容易。一般说来，含有颗粒对培养基灭菌影响不大，但在培养基混有较大颗粒，特别是存在凝结成团的胶体时，会影响灭菌效果，必须过滤除去。微生物http://bbs.yaozh.com共53页第7页2008-09-2722:49:43本资料由药智网收集整理http://www.yaozh.com二

5、、灭菌的实际操作•（一）空罐灭菌•空罐灭菌也称空消。无论是种子罐、发酵罐、还是尿素（或液氨）罐、消泡罐，当培养基（或物料）尚未进罐前对罐进行预先灭菌，为空罐灭菌。•为了杀死所有微生物特别是耐热的的芽孢，空罐灭菌要求温度较高，灭菌时间较长，只有这样才能杀死设备中各死角残存的杂菌或芽孢。微生物http://bbs.yaozh.com共53页第8页2008-09-2722:49:44本资料由药智网收集整理http://www.yaozh.com•（二）实罐灭菌•将培养基置于发酵罐中用蒸汽加热，达到预定

6、灭菌温度后，维持一定时间，再冷却到发酵温度，然后接种发酵，这叫做实罐灭菌，又称分批灭菌。•操作要点：•三路进汽：直接蒸汽从通风、取样和出料口进入罐内直接加热，直到所规定的温度，并维持一定的时间。这就是所谓的“三路进气”。微生物http://bbs.yaozh.com共53页第9页2008-09-2722:49:45培养基连消工艺流程图本资料由药智网收集整理http://www.yaozh.com微生物http://bbs.yaozh.com共53页第10页2008-09-2722:49:46本资

7、料由药智网收集整理http://www.yaozh.com微生物http://bbs.yaozh.com共53页第11页2008-09-2722:49:46本资料由药智网收集整理http://www.yaozh.com•（2）过滤除菌法•是将液体或气体用微孔薄膜过滤，使大于孔径的细菌等微生物颗粒阻留，从而达到除菌目的。在体外培养时，过滤除菌大多用于遇热容易变性而失效的试剂或培养液。微生物http://bbs.yaozh.com共53页第12页2008-09-2722:49:46本资料由药智网收集

8、整理http://www.yaozh.com•（3）其他方法•在配制培养基时，为避免发生沉淀，一般应按配方逐一加入各种成分。•另外，加入0.01％EDTA或0.01％NTA（氮川三乙酸）等螯合剂到培养基中，可防止金属离子发生沉淀。•最后，还可以用气体灭菌剂如氧化乙烯等对个别成分进行灭菌处理。微生物http://bbs.yaozh.com共53页第13页2008-09-2722:49:47本资料由药智网收集整理http://www.yaozh.com三、化学杀菌剂或制菌剂微生物http://bbs