褚实子活性成分提取计划书

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1、褚实子活性成分提取计划书通过大量文献调查,笔者发现褚实子中含量较多的成分为褚实子油及氨基酸成分,为了有效集中的研究褚实子中的活性成分,本实验主要选择提取褚实子油及褚实子中氨基酸两类物质,其提取计划如下:一、褚实子油的提取工艺本实验中提取褚实子油采用索氏提取法,以石油醚为主要溶剂,影响褚实子出油率的主要因素为:提取温度、提取时间、提取次数和料液比,因此,实验可以分别以提取温(每10℃为一个梯度)、提取时间(每1小时为一个梯度)、提取次数(每一次为一个梯度)、料液比等来设置梯度,测定最终产率,确定最佳实验条件,以便进行以后的实验。(1)提取温度的影响提取温度(℃)提取时间(h)提取次数(次

2、)料液比(g/ml)40411:450411:460411:470411:480411:41.称取等质量的干燥褚实子五份,碾碎过筛,用纸包好,编号①、②、③、④、⑤,按料液比1:4加入溶剂,用索氏提取器分别在温度为40℃、50℃、60℃、70℃、80℃的水浴中进行提取,连续提取4小时,趁热抽滤,收集滤液.减压蒸馏,回收石油醚。105℃干燥一段时间后,称量,分别计算出油率,作出温度—出油率曲线,比较得出适宜温度。(2)提取时间的影响提取温度(℃)提取时间(h)提取次数(次)料液比(g/ml)60411:460511:460611:460711:460811:42.称取等质量的干燥褚实子五

3、份,碾细过筛,用滤纸包好,编号①、②、③、④、⑤,按料液比1:4加入溶剂,在恒温水浴60℃下用索氏提取器分别提取4h、5h、6h、7h、8h,趁热抽滤,收集滤液,减压蒸馏,回收石油醚。105℃干燥适宜时间,取出分别称重,计算出油率,作出提取时间—出油率曲线,比较得出适宜提取时间。(3)料液比的影响提取温度(℃)提取时间(h)提取次数(次)料液比(g/ml)60411:260411:460411:660411:860411:103.称取等质量的干燥褚实子五份,碾细过筛,用滤纸包好,编号①、②、③、④、⑤,在60℃℃恒温水浴下,置于索氏提取器中,分别以料液比1:2、1:4、1:6、1:8、

4、1:10,连续提取4h,趁热抽滤,滤液置于旋转蒸发仪上减压蒸馏,回收石油醚,然后将粗品置于105℃烘箱中干燥,一段时间后取出,称量,计算出油率,作出料液比—出油率曲线,分析料液比影响,得出适宜料液比。(4)提取次数的影响提取温度(℃)提取时间(h)提取次数(次)料液比(g/ml)60411:460421:460431:44.称取等量干燥褚实子五份,碾细过筛,用滤纸包好,编号①、②、③、④、⑤,在60℃恒温水浴下,置于索氏提取器中,分别提取1、2、3次,每次提取4h。分别将所得混合物趁热抽滤,收集滤液,减压回收石油醚。然后将粗品置于105℃下干燥一段时间,取出称重,计算出油率,作出提取次

5、数—出油率曲线,综合分析,比较得出最佳提取次数。综合以上各项试验的结果,用spss软件系统处理实验数据,得出最佳提取参数,以便进行其后的工作。在得出的提取参数条件下提取褚实子油,滤过,收集滤液,减压回收石油醚后,干燥,得褚实子油粗品。一、楮实子氨基酸成分的提取本实验中采用溶剂提取法提取楮实子中的氨基酸,此方法中影响提取率的因素主要有:料液比、提取溶剂浓度、提取次数、提取时间和提取温度。1.测定波长的选择(1)配制0.1mg/mL的标准L—酪氨酸溶液。(2)样品的制备。称取褚实子10g,用70%乙醇,按料液比1:10,于70℃回流2h,提取1次,将溶剂蒸干后用蒸馏水定容于50mL容量瓶中

6、备用。分别取标准液和样品液各1mL,加入2%茚三酮溶液1mL和磷酸盐缓冲液2mL,摇匀后均于水浴中加热15分钟,取出,冷却,用蒸馏水定容至50mL。再取1mL样品溶液稀释至8mL,在紫外—可见分光光度计中进行波长扫描,每种液体平行做三次,取平均值,两相比较,确定最大吸收波长。2.氨基酸提取实验(1)提取溶剂浓度的影响提取溶剂浓度(%)料液比(mg/mL)提取时间(h)提取温度(℃)提取次数(次)501;102701601:102701701:102701801:102701951:102701a)称取等量褚实子干燥品五份,分别用浓度为50%、60%、70%、80%、95%的乙醇按料液比

7、1:10在70℃下回流提取2h,提取一次,减压蒸馏,蒸干溶剂,按上述步骤1中所示制备分析液,于最大吸收波长处测定吸光度,计算总氨基酸的提取率,比较得出最佳提取溶剂浓度。(2)料液比的影响提取溶剂浓度(%)料液比(mg/mL)提取时间(h)提取温度(℃)提取次数(次)701:52701701:102701701:152701701:202701701:252701a)称取等量干燥褚实子五份,编号,用70%乙醇分别以料液比1:5、1:10、1:15

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