环境微生物_第七章

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1、7、环境微生物EnvironmentalMicrobiology遗传基础与致突变中国科学院研究生院地址：北京市玉泉路19号甲（邮编100049）http://cre.gucas.ac.cn7、环境微生物EnvironmentalMicrobiology遗传基础与致突变内容提要:相关的遗传基础(DNA,Tm,16srRNA)致突变剂及其检验技术Ames试验与环境工作有关的质粒要求：掌握营养缺陷型、Tm概念；16srRNA用于分类被接受的原因；Ames实验了解基因工程基本原理中国科学院研究生院地址：北京市玉泉路19号甲（邮编100049）http://cre.g

2、ucas.ac.cnGriffithr’stransformation1928年经典试验：动物转化试验证实甚麽是遗传物质？•致病型：S（smooth)型肺炎球菌•非致病型：R(rough)型肺炎球菌中国科学院研究生院地址：北京市玉泉路19号甲（邮编100049）http://cre.gucas.ac.cn虽加热但遗传物质转化成功R无毒S有毒KS+R—有毒S加热无毒中国科学院研究生院地址：北京市玉泉路19号甲（邮编100049）http://cre.gucas.ac.cn实验结果：R无毒S有毒水解毒细胞蛋白水解毒细胞RNA中国科学院研究生院地址：北京市玉泉路1

3、9号甲（邮编100049）http://cre.gucas.ac.cnDAN结构阐明20年代P.A.levene研究化学组成1948年ErwinChangaff采用纸层析分出DNA,T=AG=C1952Mauricewinkins实验室的RosalindFranklinX-晶体衍射获得DANX-晶体图谱1953JamesWatson生物学家和FrancisCrick物理学家阐明了DAN结构1962年颁发诺贝尔奖上述3人,其中Franklin37英年早逝!中国科学院研究生院地址：北京市玉泉路19号甲（邮编100049）http://cre.gucas.ac.c

4、n核酸结构中国科学院研究生院地址：北京市玉泉路19号甲（邮编100049）http://cre.gucas.ac.cn实体模型双螺旋图解中国科学院研究生院地址：北京市玉泉路19号甲（邮编100049）http://cre.gucas.ac.cn主要特征通过碱基形成的氢键互补，形成有规则的双链结构。每圈3.4nmAT配对,GC配对AT两对氢键，GC三对氢键。两条核酸链方向相反。中国科学院研究生院地址：北京市玉泉路19号甲（邮编100049）http://cre.gucas.ac.cnA=T和GC中国科学院研究生院地址：北京市玉泉路19号甲（邮编100049）h

5、ttp://cre.gucas.ac.cn超螺旋大多数原核生物DNA都是封闭环状的中国科学院研究生院地址：北京市玉泉路19号甲（邮编100049）http://cre.gucas.ac.cnDNA分子的尺寸微生物碱基对Kb外廓长度μmλ噬菌体48.617大肠杆菌40001360酵母135004600中国科学院研究生院地址：北京市玉泉路19号甲（邮编100049）http://cre.gucas.ac.cnJamesWatsonFrancisCrick第一篇论文:结构第二篇关于复制机制半保留复制1、解链2、互补碱基3、酶合成中国科学院研究生院地址：北京市玉泉路

6、19号甲（邮编100049）http://cre.gucas.ac.cn双螺旋能进行可逆解链•DAN配对碱基氢键被打断时，既可以分开；加热、酸碱可使碱基电离•Tm：解链温度：当温度达到某一数值时，解链突然发生，使一半螺旋结构解体所需的温度定义为解链温度。•增色效应：碱基对重叠失去吸光度增加（260nm)•Tm是吸光度最大值一半时的温度Tm与GC含量呈线性关系，GC比AT稳定(50%GCE.coliTm69C)(68%GC绿脓杆菌76C)中国科学院研究生院地址：北京市玉泉路19号甲（邮编100049）http://cre.gucas.ac.cnDNA合成过程中

7、国科学院研究生院地址：北京市玉泉路19号甲（邮编100049）http://cre.gucas.ac.cnDNA聚合酶•DNA聚合酶自100公斤E.coli获得500mg纯酶分子量109000DNA聚合酶I需下列成分合成DAN链1、dATP,dGTP,dTTP,dCTP都存在，简写dNTP，需Mg2+2、自3‘-羟基端开始（游离的3’-羟基引物是必要的）DNA链延长5‘--3’端3、DNA模版必不可少，DNA糖磷酸骨架在一处或几处断开时，双链DNA才是有效的模版。中国科学院研究生院地址：北京市玉泉路19号甲（邮编100049）http://cre.gucas

8、.ac.cnRNAtRNA转运氨基酸mRNA信使转录