色谱分析-浙江大学化学系

《色谱分析-浙江大学化学系》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、色谱分析ChromatographicAnalysis浙江大学化学系色谱分析方法10/5/20212色谱分析-1色谱分离方法：10/5/20213色谱分析-1色谱法是一种分离方法，它利用被分离的诸物质在互不相溶的两相中分配系数的微小差异进行分离。当两相作相对移动时，使被测物质在两相之间进行反复多次分配，使原来微小的差异累加产生了很大的效果，形成差速迁移，使各组分在柱内移动的同时逐渐分离，以达到分离、分析及测定一些物理化学常数的目的。10/5/20214色谱分析-1色谱分析技术有广泛的应用领域色谱分离是目前应用最广泛的分离方法。已广泛地用于石油化工、有机合成、

2、生理生化、医药卫生、环境监测、刑事侦查、生产在线控制，乃至空间探索等许多领域，以解决各种分离分析课题。10/5/20215色谱分析-1石油化工石油产品质量监控油田开发（吸附丝技术）10/5/20216色谱分析-1环保污水检测大气检测(室内和环境中空气质量监测、汽车内空气质量监测)10/5/20217色谱分析-1医药卫生提纯净化—如手性色谱分离有效成分药物中间体的处理食品卫生监测（瘦肉精、农残、抗生素）10/5/20218色谱分析-1化学研究样品提纯—如合成产品的检验等物质性质与其配比的相关性——色谱法和化学计量学方法结合10/5/20219色谱分析-1生命科

3、学研究DNA测序—用CE、HPLC技术、生物工程下游技术—细胞的培养、分离、纯化和分析检测参见刘国诠主编《生物工程下游技术》化学工业出版社，1993年10/5/202110色谱分析-1一、方法的发展1952年，Martin和Synge首次用气体为流动相，配合微量酸碱滴定，发明了气相色谱法。1953年，Adams和Holmes合成了离子交换剂，并将其用于色谱分离，从而形成了离子交换色谱法。1958年，Golay提出了分离效能极高的毛细管柱气相色谱法10/5/202111色谱分析-1一、方法的发展1938年，Izmailov等将糊状氧化铝铺展在玻璃板上，形成2m

4、m厚的薄层，用于分离药用植物的萃取物，开始了薄层色谱法。1944年，Consden、Cordon和Martin创立了纸色谱法。他们利用滤纸的毛细作用，让溶剂由下至上地渗透，结合混合物中各组分在两相中的溶解度的差异，使各组分以不同速率在滤纸上迁移而得到分离10/5/202112色谱分析-1一、方法的发展1959年，Porath和Flodin提出了大小排阻色谱法，其原理是利用柱内多孔填料对不同尺寸的分子具有选择渗透作用。80年代发展起来的毛细管电泳，解决了DNA及其片段、单克隆抗体、蛋白质及多肽等一般色谱技术难于解决的分离分析问题。现在已经派生出毛细管胶束电动色

5、谱、毛细管等电聚焦、毛细管电泳离子分析法、微填充毛细管电泳法等多个新分支。10/5/202113色谱分析-1二、仪器的发展五十年代第一台色谱仪问世10/5/202114色谱分析-1二、仪器的发展六十年代就有数台5公斤重的色谱仪随阿波罗飞船同登月球，自动取样分析，1970年更有一台100克重的色谱仪飞上了火星。10/5/202115色谱分析-1二、仪器的发展1967年时全世界共有色谱仪7万台1972年就发展到20万台现在我国的仪器就有数十万台过去庞大的体积，到现在的越来越小巧过去只有进口的，现在国产的也很好10/5/202116色谱分析-1二、色谱法的特点1．

6、分离效率高：可在很短的时间内分离多达二、三百个组分的复杂物质，柱效能可达106的理论板。2．检测能力强：可以检测出10-11~10-15克级的痕量组分，能满足环境检测、农药残留等大量日常检测分析的需要。3．样品用量少：样品用量一般为微升级，少的可达纳克级。4．适用范围广：几乎所有与化学有关的领域都有其用武之地。10/5/202117色谱分析-1多模式及联用技术复杂样品靠单一分离方法或技术是不够的，需多模式及多项新技术的联用。极性溶剂提取物可考虑用HPLC有挥发性的化合物优先用GC毛细管电泳是HPLC的补充和发展联用技术是今后的趋势GC-MSLC-MSGC-M

7、S-MSGC-FTIR10/5/202118色谱分析-1色谱基本理论10/5/202119色谱分析-1三、色谱基本理论10/5/202120色谱分析-1色谱分离原理10/5/202121色谱分析-1基本关系式保留时间保留体积容量因子k10/5/202122色谱分析-1基本关系式相对保留值相对保留值是衡量分离情况的重要参数，大多数手册上可查到。因其只与色谱柱种类及柱温有关，故也是重要的定性指标。10/5/202123色谱分析-1基本关系式分离因子塔板数塔板高度N和H都有理论值和有效值两类,其差别在于用保留时间和校正保留时间10/5/202124色谱分析-1基本

8、关系式（死时间测定）死时间的测定很难：无合适样品（完