生物化学常用检验项目及质量控制

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1、1生物化学常用检验项目及质量控制昌大一附院检验科郑晓丰2主要内容：一、常用生化检验项目的原理及临床意义二、生化检验的质量控制3一、常用生化检验项目及其临床意义4常用项目肝功能类丙氨酸氨基转移酶总胆红素总蛋白白蛋白5肾功能类肌酐尿素氮心肌酶类肌酸激酶6血脂类总胆固醇甘油三酯其它葡萄糖淀粉酶7各项目检验方法8丙氨酸氨基转移酶ALT底物L-丙氨酸与a-酮戊二酸在ALT作用下生成丙酮酸，生成的丙酮酸在乳酸脱氢酶作用下转化成L-乳酸，同时伴随着NADH的氧化，引起在波长340nm处吸光度下降，下降速率与血清中ALT活力成正比9总胆红素TBil改良J-G法（仪器和手工）重氮反应，6

2、00nm比色。钒酸盐氧化法（仪器）总胆红素在表面活性剂TritonX-100存在下，被钒酸盐氧化，生成胆绿素，测定450nm处吸光度的减少与总胆红素的浓度成正比。10总蛋白TP双缩脲法（仪器和手工）蛋白质分子中有许多肽健(-CONH-)，在碱性条件下，蛋白质多肽链中的肽键与铜离子作用形成紫红色络合物，在540nm波长有特定吸收峰，所产生的颜色强度与蛋白质含量成正比。与经过同样处理的总蛋白校准品进行比较，即可计算出样品中总蛋白含量。11白蛋白ALB溴甲酚绿法（仪器和手工）在pH4.2的缓冲液中，白蛋白作为一种阳离子，结合阴离子染料溴甲酚绿(BCG)形成蓝绿色复合物，在波长6

3、30nm处有吸收峰。其吸光度与白蛋白浓度成正比例，与同样处理的白蛋白校准液比较，即可计算出样品中白蛋白含量。12肌酐Cr碱性苦味酸法（仪器）Jaffe反应尿、血清中的肌酐在碱性条件下与苦味酸盐作用，生成黄红色的苦味酸肌酐复合物，颜色深浅与肌酐浓度成正比。13尿素氮BUN酶偶联速率法（仪器）尿素在尿素酶催化下，水解生成氨和二氧化碳，氨在α-酮戊二酸和还原型辅酶I存在下，经谷氨酸脱氢酶(GLDH)催化生成谷氨酸。同时，还原型辅酶I被氧化成氧化型辅酶I。还原型辅酶I在340nm波长处有吸收峰，其吸光度下降的速率与待测样品中尿素的含量成正比。14总胆固醇TC酶法（仪器和手工）血清

4、中的胆固醇酯被胆固醇酯酶(CE)水解成游离胆固醇，后者被胆固醇氧化酶(COD)氧化成4-胆甾-3-烯酮并产生过氧化氢，再经过氧化物酶(POD)催化4—氨基安替比林(4-AAP)与酚(三者合称PAP),生成红色醌亚胺(Trinder’s反应)。在505nm比色测定，其吸光度与样品中总胆固醇(TC)含量成正比。与经过同样处理的校准品进行比较，即可计算出样品中总胆固醇含量。15甘油三酯TG酶法（仪器和手工）脂蛋白脂肪酶中性脂肪+H2O甘油+脂肪酸甘油激酶脂肪酸+ATP甘油-3-磷酸+ADP甘油-3-磷酸氧化酶甘油-3-磷酸+O2二羟丙酮磷酸+H2O2过氧化物酶2H2O2+4-A

5、A+EMSE+H3+O红紫色苯醌色素+5H2O16肌酸激酶CKCK催化磷酸肌酸与二磷酸腺苷(ADP)反应产生三磷酸腺苷(ATP)与肌酸；偶联己糖激酶(HK)及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)的催化反应。HK催化葡萄糖与ATP反应，形成葡萄糖-6-磷酸，G6PDH催化葡萄糖-6-磷酸氧化，形成6-磷酸葡萄糖内酯及NADPH。NADPH生成的速率代表CK活力。17葡萄糖GLU葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生过氧化氢，在色原性氧受体4-氨基安替比林偶联酚的存在下．过氧化物酶催化过氧化氢，氧化色素原，生成红色醌类化台物。其颜色深浅与葡萄糖浓度成正比

6、。与经过同样处理的葡萄糖校准品进行比较，即可计算出样品中葡萄糖含量。18淀粉酶α-淀粉酶将底物4,6-亚乙基-α-D-麦芽七糖-（EPS-G7）水解为多种片段。这些片段又被试剂中α-葡萄糖苷酶进一步水解，生成葡萄糖和对硝基酚。吸光度的上升速率与α-淀粉酶活力成正比。19各项目临床意义20丙氨酸氨基转移酶ALT正常参考值0-40U/L临床意义增高：常见于急慢性肝炎，药物性、酒精肝损伤，脂肪肝，肝硬化，胆道疾病等。21总胆红素TBIL正常参考值4.00-17.39umol/L临床意义增高：原发生胆汁性肝硬化、急性黄疸型肝炎，慢性活动期肝炎，病毒性肝炎。肝硬化，溶血性黄疸，新生

7、儿黄疸，胆石症等。22总蛋白TP正常参考值55.00-85.00g/L临床意义增高：常见于高度脱水症（如腹泻、沤吐，休克，高热）及多发性骨髓瘤。降低：常见于恶性肿瘤，重症结核，营养及吸收障碍，肝硬化，肾病综合症，烧伤，失血。白蛋白ALB正常参考值35.00-55.00g/L临床意义：增高：常见于严重失水而导致血浆浓缩，使白蛋白浓度上升。降低：基本与总蛋白相同，特别是肝脏，肾脏疾病更为明显，见于慢性肝炎、肝硬化、肝癌、肾炎等。如白蛋白30g/L,则预后较差。2324肌酸激酶CK正常参考值30-170U/L临床意义增高：心梗4-6