资源描述:
《单克隆抗体与基因工程抗体》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、生物秀实验频道——生命科学实验中心www.bbioo.com/bio101单克隆抗体与基因工程抗体单克隆抗体与基因工程抗体中山医科大学中山医科大学免免疫学教研室疫学教研室张春艳张春艳生物秀—专心做生物!www.bbioo.com易生物-领先的生物医药商务平台www.ebioe.com生物秀论坛-学术交流,资源共享,互助社区www.bbioo.com/bbs/生物秀论坛——学术交流、资源共享、互助社区www.bbioo.com/bbs生物秀实验频道——生命科学实验中心www.bbioo.com/bio101多克隆抗体多克隆抗体((PPoolly
2、ycclloonnaallaannttiibbooddy)y)一一..概念概念给给动动物物接接种抗种抗原原所所获得获得的免疫的免疫血清血清或或抗抗血清血清是多是多种种抗抗体的体的混合物混合物,,它是它是由由多多种抗种抗原决原决定定簇簇刺激刺激多株多株BB细细胞增胞增殖殖分分化所化所产生的产生的,,称称为多为多克隆抗克隆抗体体..生物秀论坛——学术交流、资源共享、互助社区www.bbioo.com/bbs生物秀实验频道——生命科学实验中心www.bbioo.com/bio101二二..多多克克隆隆抗体抗体的应用的应用n免免疫疫学学检测检测n被被
3、动动免免疫治疫治疗和疗和紧紧急急预防预防三三..存存在在问题问题n特特异异性差性差,,用于用于免免疫疫学检学检测容易测容易出现出现交交叉叉反应反应生物秀论坛——学术交流、资源共享、互助社区www.bbioo.com/bbs生物秀实验频道——生命科学实验中心www.bbioo.com/bio101单克隆抗体单克隆抗体((MMoonnoocclloonnaallaannttiibbooddyy,,MMccAbAb))一一..概念概念::通过通过BB细细胞杂胞杂交瘤交瘤技术技术,,获得获得特异性特异性针对某针对某一一种抗种抗原决原决定定簇簇的细的细
4、胞克胞克隆隆,,产生产生均均一一性的性的抗体抗体..二二..BB细细胞胞杂交杂交瘤的瘤的类型类型小鼠-小鼠大大鼠鼠--大大鼠鼠小鼠小鼠--人人人人--人人生物秀论坛——学术交流、资源共享、互助社区www.bbioo.com/bbs生物秀实验频道——生命科学实验中心www.bbioo.com/bio101三三....杂杂交瘤交瘤技术技术的原的原理理1.1.亲本亲本细细胞的胞的选择选择小小鼠鼠骨髓骨髓瘤瘤细胞细胞次次黄黄嘌嘌呤鸟呤鸟嘌呤嘌呤磷磷酸酸核苷核苷转移酶转移酶((HGPHGPRRT)T)缺缺陷型陷型免疫免疫脾脾细胞细胞经经抗抗原免原免疫的
5、疫的BBAALBLB/c/c小鼠小鼠的的脾脏脾脏生物秀论坛——学术交流、资源共享、互助社区www.bbioo.com/bbs生物秀实验频道——生命科学实验中心www.bbioo.com/bio1012.细胞融合骨髓瘤细胞PEG杂交杂交瘤瘤细胞细胞脾细胞融合后细胞的类型:未融合的脾细胞杂交瘤细胞未融合的瘤细胞生物秀论坛——学术交流、资源共享、互助社区www.bbioo.com/bbs生物秀实验频道——生命科学实验中心www.bbioo.com/bio1013杂交瘤细胞的选择性培养DNA合成的途径:糖+氨基酸氨基喋呤(Aminopterin,A)
6、TK核苷酸DNA胸腺嘧啶核苷TMP(Thymidine,T)核苷酸前体次黄嘌呤HGPRTIMP(Hypoxanthine,H)生物秀论坛——学术交流、资源共享、互助社区www.bbioo.com/bbs生物秀实验频道——生命科学实验中心www.bbioo.com/bio101融融合合后后细细胞在胞在HHATAT培养培养基基中存中存活情况活情况脾脾细胞细胞((HGHGPPRTRT+,,TKTK+,,不不能能长期长期生生长)长)骨髓骨髓瘤瘤细胞细胞((HGPHGPRTRT-,,TKTK-,,不能不能生生长长))杂交杂交瘤瘤细胞细胞((HGPHGP
7、RTRT+,,TKTK+,能够,能够生生长)长)生物秀论坛——学术交流、资源共享、互助社区www.bbioo.com/bbs生物秀实验频道——生命科学实验中心www.bbioo.com/bio10144..杂杂交交瘤瘤细胞的细胞的筛选筛选和和克隆化克隆化筛筛选:选:免疫免疫荧光荧光ELELISAISA等等克克隆化隆化::有有限稀限稀释法释法单单个个细胞细胞显显微微操操作法作法软软琼脂琼脂培养法培养法生物秀论坛——学术交流、资源共享、互助社区www.bbioo.com/bbs生物秀实验频道——生命科学实验中心www.bbioo.com/bio1
8、0155..单单克克隆隆抗抗体体的生产的生产体体内:内:BBAALBLB/c/c小鼠小鼠体体内诱发内诱发含有含有单抗的单抗的腹水腹水体体外:无外:无血清血清培养培养