蛋白质光谱分析

《蛋白质光谱分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、光谱分析技术周宏敏itisme@ustc.edu.cn概述
在仪器分析方法中，，依据物质发射，依据物质发射、、吸收电磁辐射以及物、吸收电磁辐射以及物质与电磁辐射的相互自由泳而建立起来的一类分析方法，，广，广义上成为光学分析法。。它可分为。它可分为光谱法（（或波谱法（或波谱法））和）和非光谱法两大类。
光谱法是以辐射能与物质组成和结构之间的内在联系及表现形式－－光谱的测量为基础－光谱的测量为基础。
非光谱法包含物质内能的变化，，即，即不涉及能级跃迁，，而是，而是基于物质所引起的辐射方向和物理性质的改变。（如折射、、反射、反射、色散、、干涉、干涉、、衍射及偏振等现

2、象、衍射及偏振等现象）复合光经过色散系统（（如棱镜或者光栅（如棱镜或者光栅））分光后）分光后，，按照波长，按照波长（（或频率（或频率））的大）的大小以次排列的图案称为光谱。。光谱的产生是由于物质的分子。光谱的产生是由于物质的分子、、原子或者离子、原子或者离子受到外部能量的作用后，，其内部的运动状态会发生变化，其内部的运动状态会发生变化，，即能级变化，即能级变化。。变化。变化的能量以电磁辐射的形式释放或吸收。。因此。因此，，光谱可以分为发射光谱和吸收，光谱可以分为发射光谱和吸收光谱两大类。吸收光谱当辐射通过气态、液态或透明的固态物质时，物质的原子、离子或分子将

3、吸收与其内能变化相对应的频率辐射，，由低能态或者基态跃迁到较高的能，由低能态或者基态跃迁到较高的能态态。态。。这种由于物质对辐射的选择性吸收而得到的光谱。这种由于物质对辐射的选择性吸收而得到的光谱，，称为吸收光谱，称为吸收光谱。发射光谱处于高能级的原子或分子在向较低能级跃迁时产生辐射，，将多余的能量，将多余的能量发射出去形成的光谱．当原子受到外界因素的激发时电子吸收一定的能量而跃入其他能量较高的可能轨道上去，，这时电子不稳定，这时电子不稳定．．它能自发地跳跃到较低能级的可能轨道．它能自发地跳跃到较低能级的可能轨道上并发出一个光子，，从不同的能量较高的可能轨

4、道上跳跃到同一能量较低，从不同的能量较高的可能轨道上跳跃到同一能量较低的可能轨道上来时所发出的谱线却属于同一线系。大量处于激发态的原子会发出各不相同的谱线组成了氢原子光谱的全部谱线线，线，，由于产生的情况不同，由于产生的情况不同，，发射光谱又可分为连续光谱和明线光谱，发射光谱又可分为连续光谱和明线光谱．（111）稀薄气体发光是由不连续的亮线组成，这种发射光谱又叫做明线光谱,,,原子产生的明线光谱也叫做原子光谱。（（2（222））固体或液体及高压气体的发射光谱，，是由连续分布的，是由连续分布的波长的光组成的，这种光谱做连续光谱。例如电灯丝发出的光、、炽热

5、的钢水发出的光都形成连续光谱、炽热的钢水发出的光都形成连续光谱．特征性质仪器方法光辐射的发射原子发射光谱法、、原子荧光光谱法、原子荧光光谱法、、X、XXX射线荧光光谱法射线荧光光谱法、、分子、分子谱荧光光谱法、、分子磷光光谱法、分子磷光光谱法、、化学发光法、化学发光法、、电子能谱法、电子能谱法法辐射的吸收原子吸收光谱法、、紫外、紫外－－可见分光光度法－可见分光光度法、、红外光谱法、红外光谱法、、X、XXX射射线吸收光谱法、、核磁共振波谱法、核磁共振波谱法辐射的散射拉曼光谱法非辐射的散射比浊法、、散射浊度法、散射浊度法光辐射的折射折射法、、干涉法、干涉法谱辐射的

6、衍射XXX射线衍射法X射线衍射法、、电子衍射法、电子衍射法法辐射的转动旋光色散法、、偏振法、偏振法、、圆二色法、圆二色法光谱分析一一、一、、紫外、紫外－－可见光谱－可见光谱二二、二、、原子吸收光谱、原子吸收光谱三、原子发射光谱四四、四、、红外光谱、红外光谱紫外－－可见光谱法－可见光谱法周宏敏常用光谱分析法分类电磁波与分子能级变化A:转动能级跃迁（（远红外区（远红外区）B:转动/振动能级跃迁（（近红外区（近红外区）C:转动/振动/电子能级跃迁区（（可见（可见、、紫外区、紫外区）一般原子对电磁辐射的吸收只涉及原子核外电子能量的变化，，是一些分离的特征锐线，是一些

7、分离的特征锐线，，而分子的吸收光谱，而分子的吸收光谱是由成千上万条彼此靠得很紧的谱线组成，，看起来是，看起来是一条连续的吸收带。紫外---可见吸收光谱法概述-可见吸收光谱法概述分子的紫外---可见吸收光谱法是基于-可见吸收光谱法是基于分子内电子跃迁产生的吸收光谱进行分析的一种常用的光谱分析法。。分子在紫外。分子在紫外---可见区的吸收与其电子结-可见区的吸收与其电子结构紧密相关。生色团对分子紫外吸收的影响胆甾酮（a）与异亚丙基丙酮（b）分子结构差异很大，，但两者具有相似的紫外吸收，但两者具有相似的紫外吸收峰峰。峰。。两分子中相同的。两分子中相同的O=C-C=

8、C共轭结构是产生紫外吸收的关键基团。部