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《四氢生物蝶呤对大鼠纹状体中单胺类神经递质影响的液相色谱-电化学检测研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中国科学B辑化学2005,35(2):151~158151四氢生物蝶呤对大鼠纹状体中单胺类神经递质*影响的液相色谱-电化学检测研究**张文朱伟徐海红万芳利顾静韩金根金利通(华东师范大学化学系,上海200062)摘要四氢生物蝶呤(BH4)是生物体内单胺类神经递质合成过程中所需要的一种重要辅酶.文中以Pt-Pd纳米修饰电极作为液相色谱电化学检测器,采用高效液相色谱-电化学检测和微渗析活体取样技术,研究了外源性的四氢生物蝶呤对大鼠纹状体中单胺类神经递质的影响.研究表明外源性的BH4能提高大鼠纹状体中单胺类神经递质多巴胺(DA)5-羟色胺(
2、5-HT)及其代谢产物5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)和高香草酸(HVA)的含量,并进行了药物动力学分析,探讨了BH4和单胺类神经递质浓度与时间的变化,为一些神经疾病的病理学药理学研究提供了新的分析手段.关键词BH4单胺类神经递质Pt-Pd纳米修饰电极液相色谱-电化学检测微渗析取样BH4是酪氨酸羟化酶和色氨酸羟化酶的辅酶,而仍未有定论,但BH4在帕金森氏症高苯丙氨酸血症[7][8]这两种羟化酶又是合成单胺类神经递质多巴胺和5-(Hyperphenylalaninemia,HPA)抑郁症和阿耳茨[1,2][9]羟色胺的限速酶,BH4在生
3、物体内的缺乏会影响单海默氏症(Alzheimerdisease)等疾病的治疗方面,正胺类神经递质的合成,从而引起一系列神经退化性被认为是一种有效的药理学试剂.疾病,如:帕金森氏症(Dopa-responsivedystonia,近年来,很多研究报道了合金修饰电极的制备DRD)抑郁症(depression)孤独症(autism)等,BH4及其应用,其中Pt-Pd合金电极由于对某些小分子的与单胺类神经递质之间的关系如图1所示.同时,电催化表现出明显的协同作用,且具有导电性好,化[3]BH4也是一氧化氮合酶(NOS)的变异性辅助因子,学稳
4、定性高等特性,因此受到了人们的普遍关注.如:[10]它对中枢神经系统中NO的合成也起着重要的作用,采用电镀的方法使Pt-Pd粒子沉积在聚吡咯膜上;[4,5]而NO又是生理过程中重要的信使分子,因此,采用加热的方法使Pt-Pd粒子沉积在g-Al2O3基体[11]BH4浓度的改变会在生理学和病理学上对生物体造上;在水和油的乳浊液中通过还原的方法得到[2,6][12]成重大的影响.虽然BH4在生物体内的作用机理Pt-Pd粒子.本文采用循环伏安法在玻碳电极上沉2004-07-15收稿,2005-01-24收修改稿*国家自然科学基金(批准号:
5、20175006)和高等学校博士点基金(批准号:20030269014)资助项目**联系人,E-mail:wzhang@chem.ecnu.edu.cn万方数据SCIENCEINCHINASer.BChemistry152中国科学B辑化学第35卷图1BH4在单胺类神经递质合成中的作用(a)DA的合成;(b)5-HT的合成积Pt-Pd粒子,得到Pt-Pd纳米修饰电极,由于合金粒氯亚钯酸铵((NH4)2PdCl4)和氯铂酸钾子的协同作用和纳米材料的小尺寸效应和表面效应,(K2PtCl6)(上海化学试剂有限公司);BH4,DA,5-HT,
6、使其成功地同时检测了大鼠纹状体中的BH4,单胺类5-HIAA和HVA(Sigma公司,美国);所有配制缓冲溶神经递质及其代谢产物.我们将该修饰电极作为高液试剂均为分析纯;所用水为二次蒸馏水.效液相色谱-电化学检测器,同时与微渗析活体取样1.2Pt-Pd纳米修饰电极的制备技术联用,检测了BH4及在其影响下大鼠纹状体中单先用0.05mm的氧化铝粉末将玻碳电极抛光,用胺类神经递质浓度随时间的变化过程,初步探讨了二次蒸馏水冲洗电极,接着依次在丙酮NaOH溶液BH4对单胺类神经递质及其代谢产物的作用机理,为(50%,W/W)硝酸(11,V/V
7、)和二次蒸馏水中超声清帕金森氏症等神经疾病的病理学药理学研究提供了洗.然后以玻碳电极为工作电极,饱和甘汞电极(SCE)可靠的依据和有效的实验手段.为参比电极,金电极为辅助电极,采用CHI832型电1实验部分化学系统对电极进行修饰,修饰液为含0.1mmol/L(NH4)2PdCl4和0.1mmol/LK2PtCl6的0.11.1仪器与试剂mol/LKCl溶液.用循环伏安法在-0.4~0.3V的电压范CHI832电化学系统(CHI公司,美国);玻碳电极围内,以0.1V/s的扫速,扫描16圈.最后取出电极(直径:4mm,日本东海公司);5
8、10型液相色谱泵和用二次蒸馏水冲洗,即得到Pt-Pd纳米修饰电极,将U6K进样装置(Waters公司,美国),进样体积20mL;制得的修饰电极保存于磷酸缓冲溶液中待用.Luna5mC18(4.6mm25cm)色谱柱(Phenomene