饲料中粗脂肪的测定

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1、4.4饲料中粗脂肪的测定——索氏提取法江西农业大学动物科技学院8/4/2021前言脂类(lipid)亦译为脂质,是一类不溶于水而能溶于非极性溶剂的生物有机分子。其化学本质是脂肪酸和醇所形成的酯类及其衍生物。脂类的元素组成主要是CHO,有些尚含NSP。8/4/2021前言按化学组成分类:◆单纯脂类—脂肪(fat):甘油三酯(三酰甘油)—蜡(是长链脂肪酸和长链一元醇或固醇形成的酯)◆复合脂类—磷脂(含磷酸和含氮碱)—糖脂(含糖)—硫脂(含硫酸)◆衍生脂类(类脂):由单纯脂类或复合脂类衍生而来或与它们关系密切。—萜类:

2、天然色素、香精油、天然橡胶—固醇类:固醇(甾醇、性激素、肾上腺皮质激素)—其他类脂:维生素A、D、E、K等。8/4/2021前言粗脂肪(Crudefat或etherextract,EE)饲料中可以溶于脂溶性溶剂(乙醚、石油醚、氯仿等)的物质总称,除包括脂肪外,还包括可溶于乙醚的其它有机物质,如游离脂肪酸、有机酸、腊质、固醇类、脂溶性维生素、色素等,故称为粗脂肪或乙醚提取物。同时,样品中结合状态的脂类(主要是脂蛋白)不能直接提取出来,所以该法又称为游离脂类定量测定法。测定方法:油重法、残余法、水解法。8/4/202

3、1一、油重法测粗脂肪含量1.适用范围适用于多种单一饲料、混合饲料、浓缩饲料和配合饲料的分析。2.原理索氏(Soxhlet)脂肪提取器中用乙醚反复浸提饲料样品,使其中脂类物质溶于乙醚,并收集于盛醚瓶中,然后将所有的浸提溶剂加以蒸发回收,直接称量盛醚瓶中的脂类物质重,即可计算出饲料样品中的粗脂肪含量。8/4/2021一、油重法测粗脂肪含量2.原理它是利用溶剂的回流和虹吸原理,对固体混合物中所需成分进行连续提取。当抽提管中回流下的溶剂的液面超过索氏提取器的虹吸管时,抽提管中的溶剂流回圆底烧瓶内,即发生虹吸。随温度升高,

4、再次回流开始,每次虹吸前,固体物质都能被纯的热溶剂所萃取,溶剂反复利用,缩短了提取时间,所以萃取效率较高。8/4/2021一、油重法测粗脂肪含量3.试剂无水乙醚或石油醚(分析纯)4.仪器设备8/4/2021一、油重法测粗脂肪含量4.测定步骤(1)索氏提取器应干燥无水。抽提瓶(内有沸石数粒)在105±2℃烘箱(4.5)中烘干60min,干燥器中冷却30min,称重。再烘干30min,同样冷却称重,两次重量之差小于0.0008g为恒重。(2)称取试样1~5g(准确至0.0002g),于滤纸筒中,或用滤纸包好并标号,放

5、入105℃烘箱中,烘干120min(或称测水分后的干试样,折算成风干样重),滤纸筒应高于提取器虹吸管的高度(?),滤纸包长度应以可全部浸泡于乙醚中为准。8/4/2021一、油重法测粗脂肪含量4.测定步骤(3)用长镊子将滤纸筒或包放入抽提管,在抽提瓶中加无水乙醚60~100mL(抽提瓶容积的2/3),在60~75℃的水浴(用蒸馏水)上加热,使乙醚回流,控制乙醚回流次数为每小时约10次,共回流约50次(含油高的试样约70次)或用滤纸点滴检查抽提管流出的乙醚挥发后不留下油迹为抽提终点。(4)取出试样,仍用原提取器回收乙

6、醚直至抽提瓶全部收完,取下抽提瓶,在水浴上蒸去残余乙醚。擦净瓶外壁。将抽提瓶放入105±2℃烘箱中烘干120min,干燥器中冷却30min称重,再烘干30min,同样冷却称重,两次重量之差小于0.001g为恒重。抽提瓶增加的重量即为粗脂肪重量。8/4/2021一、油重法测粗脂肪含量5.测定结果的计算计算见下式:粗脂肪(%)=〔(m2-m1)/m〕×100式中:m——风干试样重量,g;m1——已恒重的抽提瓶重量,g;m2——已恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量,g。6.重复性每个试样取两平行样进行测定,以其算术平均值为结果

7、。粗脂肪含量在10%以上(含10%)允许相对偏差为3%。粗脂肪含量在10%以下时,允许相对偏差为5%。8/4/2021一、油重法测粗脂肪含量操作中应注意的问题:①测定用样品、抽提器、抽提用有机溶剂都需要进行脱水处理。(为什么,大家想想!)这是因为:第一,抽提体系中有水,会使样品中的水溶性物质溶出,导致测定结果偏高;第二,抽提体系中有水,则抽提溶剂易被水饱和(尤其是乙醚,可饱和约2%的水),从而影响抽提效率;第三,样品中有水,抽提溶剂不易渗入细胞组织内部,结果不易将脂肪抽提干净。脱水处理!②试样粗细度要适宜。试样粉

8、末过粗,脂肪不易抽提干净;试样粉末过细,则有可能透过滤纸孔隙随回流溶剂流失,影响测定结果。适宜的样品粉碎粒度!8/4/2021一、油重法测粗脂肪含量操作中应注意的问题:③将称好的样品转移到定性滤纸上打包,并用脱脂棉线扎紧。扎包-④在包好样品的定性滤纸外面,用铅笔标记样品号。记号不要用油笔或钢笔等标记,以免被乙醚冲洗掉。⑤滤纸包放入抽提管中时,不能超过虹吸管上端。⑥抽出的油

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