微生物高效生产γ聚谷氨酸和β聚苹果酸的研究

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1、⑦论文作者签名：指导教师签名：论文评阅人1：奎寅3巫究旦)主型院邀生塑班窒生压评阅人2：庄墓垡3教援3厦[]太堂评阅人3：壬蕴羞3麴援3垡直堡工太堂-i,平NA．4：菹岱搓3熬援)酉三匕太堂-i,平NA．5：庄墓莲3教援3垡丕理王太堂评阅人6：答辩委员会主席：扬童苤3数援3逝江太堂委员1：奎泣霾3麴援3浙江太堂委员2：俭壶直3熬拯3逝江太堂委员3：挞建垩3数援3浙江太堂委员4：鲑里澧3熬援3逝江工些太堂答辩日期：2Q12：Q3=!鱼Author’Ssignature：一●‘Supervnsor’Ssignature

2、：ExternalReviewers：YinLi＼Researcher＼IMCASYi坠g鱼旦垒L坠里￡Q鱼墨墨Q巡堕DaidiFan＼Professo洲UExaminingCommitteeChairperson：Li坠Q塾g№坠93￡坠Q鱼墨曼Q塑!烈ExaminingCommitteeMembers：PeilinCenProfesso此JU』i型虫垫gL也￡!Q鱼墨墨Q丝巡翌瞳ihQ坠gZhQ塾g￡墅Q鱼墨墨Q苎Z』堕IDateoforaldefence：03．16．2012浙江大学研究生学位论文独创性声明本

3、人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得迸婆盘堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。日学位论文作者签名：寻签字日期：≯／纱年弓月，‘学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解迸婆态鲎有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权逝、江态堂可以将学位论文的全部或部分内

4、容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：签字日期恻砂年)月c1)日签字日期：必／2年乡月／石日浙江大学博士学位论文致谢本论文是在导师徐志南教授的悉心指导下完成的。在攻读博士学位期间，徐老师在学术和生活上给予了无微不至的关心和帮助。在课题遇到困难时，他的鼓励和启发，使我有了坚持下去的信心和毅力。他追求创新的精神，执着忘我的工作态度深深的感染和影响着每一个学生。徐老师深厚的学识和对于科研方向的洞察和把握，也使我受益匪浅

5、。在此，学生希望能向徐老师表达最衷心的感谢和敬意!本论文的完成还得到了蔡瑾老师和黄磊老师帮助和指导，在此表示感谢!同时感谢岑沛霖教授和林建平教授和对我的帮助和指导!本论文的完成还得到了黄金博士和朱湘成博士的大力帮助，谢谢你们!06级本科生马晓琛，07级本科生张安逸、洪溢智以及华南理工大学的07级本科生董佳奇也参与了本论文的部分工作，在此特别表示感谢!本论文的工作得到了国家科技部863计划目标导向类项目(No．2006AA022239)资助，特此致谢。感谢本课题组的陈杰、朱凡、杜银明、吕忠良、符爽、宋宵在实验中的帮助

6、；感谢王金在实验数据处理方面给予的帮助。感谢实验室与我朝夕相处的各位同学们，他们是杨冬、江凌、施周铭、祝琳琪、盛嘉园、章芸、郑强、张绪、唐云平、吴丹、舒成亮、徐晓琴、梁涛、项宜娟、吴雪云、陈旭、张丹萍、连佳长、周洁雯、张宁宁、吴明、李晓燕、赵伟军、唐云平，刘云平、潘剑锋、于怡、郑书香、罗兰萍。感谢我的父母、家人对我的支持，你们永远是我前进的动力!张慧莉二零一二年-eq于西子湖畔求是园浙江大学博士学位论文致谢Ⅱ浙江大学博士学位论文摘要摘要丫-聚谷氨酸(Poly-丫-glutamaticacid,?-PGA)和B-聚苹

7、果酸[poly(p-L—malicacid)，PMLA]是两种受到人们关注的生物可降解水溶性聚合物材料，由于其优良的特性在医药和其他广泛领域有极大应用潜力。本文对于两种生物聚合物的微生物合成进行了系统研究。首先，开展了对微生物合成7-PGA的研究。以直接利用葡萄糖合成7-PGA为目的，筛选获得一株谷氨酸非依赖型y-PGA生产菌株，经过VITEK系统鉴定和16srDNA序列分析鉴定，命名为BacillussubtilisC10。对C10的发酵生产7-PGA的培养条件进行了优化，发现柠檬酸能够作为C10菌株合成?-PG

8、A前体；在此基础上，以柠檬酸为底物在发酵罐上进行了间歇发酵和流加发酵培养，通过在发酵中后期流加柠檬酸和氯化铵溶液，7-PGA产量达到38．29／L。为了寻找有效提高7-PGA产量的因素，研究了多种有机酸对于y-PGA合成的影响，发现草酸能够在低浓度范围内显著促进菌体生长和7-PGA合成。对关键节点酶活性的影响与代谢途径进行分析，结果表明草酸不进入7-PGA的