定稿紫红素-18

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1、紫红素-18的分离提纯陈真林（药学院2008级3班学号：200807010331邮编：646000）指导教师：李东红（第三军医大学附属医院—大坪医院邮编400012）【摘要】目的：1确立以糊状叶绿素为原料制备紫红素-18的方法，探究在酸解时不同PH值对紫红素-18产率的影响，为紫红素-18的进一步化学修饰提供足够的原料。2探究不同展开剂对紫红素-18的分离效果的差别。方法：用Hynninen选择性酸法水解对糊状叶绿素进行粗提，调节粗提取溶液的PH值得到三组蚕沙粗提物（脱镁叶绿酸a），再经过氧化反应得到紫红素-18粗品，经硅胶柱层析分离纯化

2、得到紫红素-18。结果:紫红素-18初分产品对蚕沙的收率为1.43%细分紫红素的纯度达到98%。结论：紫红素-18的分离提纯的方法简单，操作性强，得到产物的纯度高，对于它们进一步结构修饰有重要意义。关键字：蚕沙、脱镁叶绿酸、紫红素-18、分离提纯ABSTRACT：OBJECTIVE:Tosearchforsatisfactorypreparationandpurificationconditionsofpurpurin18fromsilkwormexcrement,andtoofferenoughreactantsforthefurthe

3、rmodificationofpurpurin18.METHODS:Atfirst,PheophorbideawasextractedfromthepastyChlorophyllabythemethodofHynninenacidhydrolization,andthecrudepropheophorideawasgottenbystirringpheophorbideainconcentratedhydrochloricacid.Andthenthecrudepurpurin18wasobtainedbyoxidationofpheo

4、phorbidea.Thecrudeproductswerepurifiedbysilicagelcolumnchromatographytoofferpurepropheophorideaandpurpurin18.RESULTS：Theyieldofpururin18is1.43%anditspuritywas98%.CONCLUSION：Itisasuccessfulmethodbywhichpururin18fromsilkwormexcrementispurified.Themethodissimple,flexibleando

5、perable.FurthermodificationofPyropheophorbidea’sstructureseemstobeofimportanceaswell.KEYWORD：肿瘤光动力疗法（photodynamictherapy,PDT）是利用光敏剂和光的光动力学反应治疗肿瘤的一种无创或微创疗法。PDT作为一种冷化学反应，作用效果与所用光敏剂类型、照射条件、组织氧代谢状态，细胞类型有关。其治疗基础为先给予对肿瘤组织有选择性摄入作用的光敏剂，然后用一定波长的光辐照瘤区，诱发光敏剂产生光动力反应，导致肿瘤组织坏死而达到治疗目的。P

6、DT因能相对选择性地杀伤肿瘤细胞，对健康组织损伤小，并发症及毒副作用少从而成为一项非常有效治疗肿瘤的的方法。迄今，肿瘤光动力疗法（PDT）现在已经发展成为肿瘤的法定疗法之一。光敏剂的性质直接决定了肿瘤光动力疗法的治疗效果。现在国内外临床应用的光敏剂如血卟啉衍生物（HPD）、癌光啉（PSD-007）等均为复杂的多组分卟啉混合物【1】，且作用光谱不理想【2】。且在吸收波长为600—800um的治疗窗内吸收系数小而影响到组织的有效光动力反应深度，此外，他们的化学组成不定，有效成分尚未完全阐明而影响其深入的光生物学机理研究和难以发展成为单体法定新

7、药，因此我们不断尝试研究新型的光敏剂。叶绿素降解产物（如脱镁叶绿酸【3】及紫红素-18【4】）及其衍生物，由于其较高的肿瘤选择性摄入及较强的光敏化氧化特性，（根据文献报道：叶绿素降解产物及其衍生物在红光区的吸收系数较现在广泛应用于肿瘤光动力疗法的混合卟啉制剂约高一个数量级），从而极大地增高了光动力损伤深度，成为光动力治疗癌症新药发展中颇受关注的研究对象，现在已经被用于肿瘤的荧光定位和光敏治疗【5】。蚕沙（家蚕粪）是蚕业的主要副产物之一，其中，叶绿素含量占蚕粪干物的1%左右，是一种丰富廉价的叶绿素资源，而蚕沙中占叶绿素总量75%以上是叶绿素

8、a。本实验以家蚕粪叶绿素粗提物（蚕沙粗品叶绿素）为原料，经酸降解反应得到叶绿素a的降解产物脱镁叶绿酸a，.对脱镁叶绿酸a进一步氧化碱降解得到紫红素-18粗品。脱镁叶绿酸a紫红素-181材料与仪