次实验普通光学显微镜的使用和细菌三型的观察

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1、实验报告的写作规范一、目的要求二、实验原理三、仪器与材料四、操作步骤五、实验结果六、思考题注：姓名、学号、按学号顺序整理后交上来。微生物学实验的学习材料http://nhjy.hzau.edu.cn/kech/wswx/cn/syzd/wmv/3_3.htmhttp://nhjy.hzau.edu.cn/kech/wswx/cn/syzd/wmv/1_1.htmhttp://www.bio.whu.edu.cn/swxsyzx/ReadNews.asp?NewsID=341实验二普通光学显微镜的使用和细菌三

2、型的观察一、目的要求1、学习并掌握油镜的原理和使用方法。2、复习普通台式显微镜的结构、各部分的功能和使用方法。二、实验原理D=λ/2NANA=n·sinα基础知识显微镜概述：显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同，可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光（紫外线显微镜以紫外光）为光源，后者则以电子束为光源。1.光学显微镜普通生物显微镜由3部分构成：①照明系统：包括光源和聚光器。②光学放大系统：由物镜和目镜组成，是显微镜的主体。③机械装置：用于固定材料和观察方便，包括镜台(载物台)、调节器和、物镜转

3、换器(旋转器)等。尼康E-600显微镜实验二普通光学显微镜的使用和细菌三型的观察五、实验结果分别绘出你在低倍镜、高倍镜和油镜下观察到的细菌的三种形态，包括在三种情况下视野中的变化，同时注明物镜放大倍数和总放大率。实验二普通光学显微镜的使用和细菌三型的观察六、思考题(1)用油镜观察时应注意哪些问题?在载玻片和镜头之间加滴什么油?起什么作用?(2)试列表比较低倍镜、高倍镜及油镜各方面的差异。为什么在使用高倍镜及油镜时应特别注意避免粗调节器的误操作?(3)什么是物镜的同焦现象?它在显微镜观察中有什么意义?(4)影

4、响显微镜分辨率的因素有哪些?(5)根据你的实验体会，谈谈应如何根据所观察微生物的大小，选择不同的物镜进行有效的观察。实验十六牛肉膏蛋白胨培养基的制备一、目的要求1、明确培养基的配制原理。2、通过对基础培养基的配制，掌握配制培养基的一般方法和步骤。实验十六牛肉膏蛋白胨培养基的制备二、实验原理牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下:牛肉膏3.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g水1000mlpH7.4~7.6四、操作步骤1、称量2、溶化3、调pH4、过滤5、分装6、加塞7、包扎8、灭菌9、搁置斜面10、无菌检查实验十六牛

5、肉膏蛋白胨培养基的制备5、分装(1)液体分装分装高度以试管高度的I／4左右为宜。分装三角瓶的虽则根据需要而定，一般以不超过三角瓶容积的一半为宜，(2)固体分装分装试管，其装量不超过管高的1／5，灭菌后制成斜面。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。(3)半固体分装试管一般以试管高度的1／3为宜，灭菌后垂直待凝。8、灭菌将上述培养基以0.103MPa，l21℃，20mln高压蒸气灭菌。实验十六牛肉膏蛋白胨培养基的制备棉塞制作方法：五、思考题(1)培养基配好后，为什么必须立即灭菌?如何检查灭菌后的培养

6、基是无菌的?(2)在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题?为什么?实验十六牛肉膏蛋白胨培养基的制备消毒与灭菌加热法干热法湿热法火焰烧灼热空气灭菌压力蒸汽灭菌间歇灭菌煮沸灭菌巴斯德消毒实验原理干热灭菌电烤箱压力蒸汽灭菌过滤除菌——许多材料，如血清、糖溶液等，用一般加热消毒灭菌方法，均会被热破坏，应采用过滤除菌。应用最广的过滤器有蔡氏(Seitz)过滤器和膜过滤器。实验原理(continued)蔡氏过滤器分上、下两节，过滤时，用螺旋把石棉板紧紧地夹在上、下两节滤器之间，然后将溶液置于滤器中抽滤，每次过滤必须用

7、一张新滤板。实验原理(continued)滤膜过滤器的结构与蔡氏过滤器相似，只是滤膜是一种多孔纤维素，孔径一般为0.45um，过滤时，液体和小分子物质通过，细菌被截流在滤膜上。实验原理紫外线灭菌紫外线波长在200-300nm,具有杀菌作用，其中以265-266nm杀菌力最强。无菌室或无菌接种箱空气可用紫外线灯照射灭菌。实验原理(continued)干热灭菌1、装入待灭菌物品2、升温接通电源，加热升温至160-170℃。3、恒温保持160-170℃2小时。4、降温切断电源，自然降温。5、开箱取物待烤箱温度降到

8、70℃以下以后，方可打开箱门，取出物品。箱内温度高于70℃，切勿自行打开箱门，以免玻璃器皿炸裂。实验内容及实验步骤(continued)压力蒸汽灭菌1、检查水位，放入物品。2、加盖、拧紧对称用力3、加热升温4、排冷空气等压力升至0.5kg/cm2时，打开排气阀，排净冷空气。5、升温、保压等锅内压力升至所需数值（通常为1.03kg/cm2），保持压力20-30分钟。6、降压、取物实验内容及实验步骤(continue