滇重楼内生真菌多样性及不同组织的解剖结构研究

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1、云南大学2013届硕士学位论文M．S．Dissertation滇重楼内生真菌多样性及不同组织的解剖结构研究AnalysisofEndophyticFungiDiversityinParispolyphyllavar．yunnanensisanditsanatomicalfeaturesofdiffe!renttissues王茜WANGQian导师：王跃华教授申仕康博士Supervisor：Prof．WangYue—huaDr．ShenShi-kang云南大学生命科学学院植物研究所Instituteo

2、fBotany，SchoolofLifeSciencesYunnanUniversityKunmina，Yunnan，P．R．ChinaKunmm2YUnuan，●．2013年5月中国昆明May，2013KunmingChina独创性声明翼Y删2378540本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人或集体已经发表或撰写过的研究成果，对本文的研究做出贡献的集体和个人均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：圣

3、。趁日期：翌多圭兰璺三7防论文使用和授权说明本人完全了解云南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文和论文电子版；允许论文被查阅或借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。(保密的论文在解密后应遵循此规定)研究生签名：至整导师签名：本人及导师同意将学位论文提交至清华大学“中国学术期刊(光盘版)电子杂志社”进行电子和网络出版，并编入CHIC[系列数据库，传播本学位论文的全部或部分内容，同意按《中国优秀博硕士学位论文全文

4、数据库出版章程》规定享受相关权益。研究生签名：——导师签名：云南大学硕士学位论文摘要滇重楼(Parispolyphyllavar．yunnanensis(Franch．)Hand．一Mazz)是延龄草科(Tdlliaceae)重楼属(Paris)多年生草本植物。滇重楼作为一种重要的药用植物，是云南白药、四川白药、宫血宁、夺命丹等重要中成药的主要原料之一。近年来，从滇重楼组织中分离内生真菌并从其发酵液中提取甾体皂甙的研究已取得一定成果，但对滇重楼组织中内生真菌的组成及其多样性的研究尚未见报道。本研究分

5、离鉴定云南不同地理种群滇重楼根、根茎和叶三个不同部位的内生真菌，分析其多样性及差异性，探讨内生真菌分布与各组织及样地的相关性，并通过石蜡切片观察组织解剖结构及其与真菌侵染关系，得出的结论如下：1、从分布于云南省嵩明县、鹤庆县、保山市的野生滇重楼的根、根茎、叶分离出内生真菌749株，经形态学及分子生物学方法鉴定为41属，其中457株鉴定到种，占总菌株数的61％。分离到的内生真菌中以Fusarium和Colletotrichum为优势种群，分别占总菌株数的l1．62％和8．95％。2、试验分离出Fusa

6、rium，Penicillium，Trichoderma，Aspergillus，Alternaria等9属是已报道的从滇重楼根茎部位分离出的内生真菌，尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum)及Gliomastix和Aspergillus内生真菌是已报道能产甾体皂甙的活性菌株。本研究获得的Phoma，Colletotrichum，Neocosmospora等32属是首次从滇重楼组织分离出的内生真菌，其中有18属为首次从根茎部位分离得到，从而丰富了滇重楼内生真菌资源。3、不同样地滇重楼植株中分

7、离到的内生真菌的数目不同，以嵩明样地分离到的菌株数最多，保山样地最少；不同样地多样性指数不同，鹤庆样地最高，嵩明样地最低。各样地间内生真菌组成不相似。在本研究中，各样地菌株数与海拔表现出相同的变化趋势，但内生真菌的种类、多样性以及丰富度与样地的海拔、经纬度没有明显的相关性。4、滇重楼不同部位分离出的内生真菌数目不同，根茎部位分离到的菌株数约为根部的3倍，且根茎部位内生真菌的多样性指数最高，说明根茎部位的结构及成分更适合真菌的侵染与定殖。各组织内生真菌组成不相似，内生真菌在各组织的定殖具有专一性和差异

8、性。5、滇重楼的根由表皮层、皮层、内皮层和维管束组成，滇重楼根具有云南大学硕士学位论文五原型初生木质部，与已报道的南重楼六元型初生木质部不同，提示重楼属初生木质部类型对种级分类有一定的意义。滇重楼的根茎的基本组织为木栓层、薄壁组织及其中的维管组织，薄壁组织存在针晶束及蔟晶。滇重楼根及根茎存在菌丝及菌丝结，与滇重楼分离出丰富的内生真菌的研究结果一致。菌丝主要侵染定殖在根的皮层及根茎的薄壁组织。本研究探明了不同地理种群滇重楼不同部位的内生真菌种类及多样性，丰富了滇重楼内生