牙胚成纤维细胞生长因子18基因克隆、表达及其功能研究

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1、第四军医大学博士学位论文牙胚成纤维细胞生长因子18基因克隆、表达及其功能研究姓名：杨帆申请学位级别：博士专业：口腔临床医学指导教师：肖明振;赵守亮2003.4.1秉承学校严谨的学风与优良的科学道德，本^声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作硬取得的研究成果，尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方，}，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果．不包含本人或他八已申请学位或其他用途使用遥的成果、与我一同工作的lal志对本研究所傲的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢。申请学位论

2、文与资料若有不实之处，本八承担一切胡关责任。论文lie者簦笛：妇7i日期本八完全了解第四军医大学肓关保护知识产权的规定，即：硼究生在校攻读学位期阐论文T作的知识产权单位属第四军医大学。本^保证毕业离较后，发表论文或使用论文工作成果时署各单位仍然为第四军医大学。学较有权保留送交论文的夏印件，允许论文被直阅和Ill阋；学校可以公布论文的全部或部分肉容(保密内容除，})，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。论文作者整各：盎匀生R——导师签名日期：兰!!：』第四苹医大学博士学位论文ALpAmpBMPbpC

3、DNADA转D￡PCDM以DMEMDMSODPPDSpDSPPFGFHDPChkbkDIPTGL8FCSalkalinephOSphataseAmpicillinbonemorphogenetieproteinbasepaircomplementaryDNAdiaminobenzidineDiethytpyrocarbonateDentinmatrixproteinl幽妇∞如madⅡbd嘣出眦血mDimehtylsulfoxideDentinphosphoproteinDentinsialoprotei

4、nDentinsiakIphosphoproteinfibroblastgrowthfactorHumandentalpapillacellhourkilobasepairkilodaltonlsopropylthio-B-D·galactosideturi8-bertanimediumFetalcatalserllm碱性磷酸酶氨苄毒霉素骨形成骚自碱基对互{bDNA二氨基联苯胺焦碳酸二乙翡牙本质基质燕自lDIvIEM培养基二甲基驻砜牙本质磷蛋白琴本蒺涎蛋白牙本质涎磷蛋白成纤维细胞生长因子人牙乳头细胞小辫

5、子溅基辩分子量午单位【道尔顿)具镬浚茹≈f弋BD爿雩埔曾杼LB培葬基麓牛盘渍第四军医大学博士学位论文英文缩写英文全称中文名称FGFRFibroblastgrowthfactorreceptor成纤维细胞生长嗣子受体mapkMitogemactivatedproteinkinase丝裂原活化的蛋白激酶minminute分钟MTTMethabenzthiazuron噻唑蓝NCSnewborncalfserum薪生小串盘瀵ODopt{caldensity光密度PAGEpolyacrylamidegelelec

6、trophresis聚丙烯酰胺凝胶电泳PBSphosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲渡RT-PCRreversetranscription-PCR反转录一浆会瓣链戏爱皮SDSsodiumdodecylsulfatet-=烷莲硫酸钠STAT鳓酣艄砌燃ad删啪∞懈阳磷m信母转蹲与转录激活因子SeCsecond秒SnRSnail-related锌指样转录因子TGF-§transforminggrowthfactor-§转化生长因子·§Wweek周X-gel孓b姐吣如№心酗幽酚D耐a嘶d她钳籍磷

7、酗埘B辖Bn'擘膀苷2第四军医大学博士学使论文牙题成纤维缨胞生长因子18约基因克隆、表达及其功能硪究博士研究生扬帆稻导老磐商嘴振教授斌导老燧赵寄亮副教授第嚼军医大学口腔医学院西安中文摘要FGFl8楚一个新近克隆的FGF家族成员，1998年蓠次应用PCR方法驭鼠胚(E14．5)中分离出来，与FGF8和FGFl7属予同～甄家族。研究证实FGFl8是一羊中发育组织照要的分泌性信号分子，在骨骼和软骨的发育中发挥着重要豹终用，单纯FGFl8的缺失就会严重影昀成骨和软骨的形成，那么作是图样爨有矿化能力的芽凌，FGF

8、l8是否也参与调控其发育葶丑损伤修复的过程琵?本研究带着这令疑阕对FGFl8奁矛殛发育_移矛爨组织孛豹终嫒进行掇索住研究，为今后的研究奠定瑗论蘩穑鞫实验依据，吴体内容键括：～、小鼠牙胚FGFl8的基因克隆和序列分析采用异硫氰酸胍一步法从新生小鼠牙胚组织中抽提总RNA，用Oli90(dt)作引物逆转录合成牙胚eDNA，然后利用巢式PCR技术，根据已公布的FGFl8序列，设计～对引物从cDNA中扩增出约621bp的特异片段，将扩增的基因片毁撼入