山茱萸组织培养的研究

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1、陕西师范大学硕士学位论文山茱萸组织培养的研究姓名：李焘申请学位级别：硕士专业：植物学指导教师：王喆之2003.5.1山菜楚组织臻养的研究李豢辚要：出荣荚<国删蚪。膨，。锄?括Sieb。EtZuee。)魏出菜焚誊拳豹一耪辫时乔本，在我西已窍200多年的栽培历史，娃l荣荑鬃肉富禽贰类、霄祝酸类、黪类、鬣基酸类、缎生素类筹多耱誊瓤纯学物质帮矿艨元素，矮有较珍贵豹药翅纷麓，开发疵熙翦景十分广阔。本爽验以由莱荧为材料，对萸组缓培游技术避行了系统研巍，建立了檬株群生髂系，势辩缀织培养过程审越度台永态萤鲍发生及蕤

2、形态绣构和控翱条件等进行了研究，间时辩由荣萸愈伤缀缀中有效成份的含量进行了测定。(实验的主要结鬃如下：1．分象蕊舆蒎势墓段、时片、麓筑、花辆为多}{鑫髂。对缝籁麓养获萁植攮箨变逶行了辑究，结莱菇示：(1)出蘩焚羹羧巍1／2懿，黼lBAlmg／L、I嚣鹃．5mg／L豹培养基上缀过5一巷羯豹蘩莽，蔽劳拜始蘸发童长，并琴乡鬃缮簇；程1／2j}ls，辩藤BAO．5mg／L、j醚8．05mg／L载培养藿土缝鼹培养，幼芽生长较捷，劳霉程幼芬基端彰藏不是棼筮，茅豹：噻戆爨羧这5。3发表。戳鼗建立?d,i系筵螫段骧

3、势蠛薅懿徽繁体系，胃堑程瓣羯肉获褥较多懿癌蘩焚试嚣萤。≤2)逶霆由蓉筵砖片爨螺组织诱导戆壤羚基缀合为：l窟臻÷毅2-4戳／L+IBA。．5-1．OllIgA及I／2MS+KT2-4mg／L+2，4-D0．5-i．Omg／L。以由蒺萸幼嫩时片为步}撼俸进{亍筑飒壤莠辑究时，BA／IBA、KT／2，4-D鹣不翔缀合均霹诱导浅愈携组织，当BA酌浓度达到2-哇m∥kIBA的浓度为0，5-l。OffIg,／L对，愈侥缎纵的诱导率可达到90％以上；当融鞠2，4吨豹浓度努嚣滋到文omg／L窥i，0蝣见孵，愈侥缀织

4、魏诱导枣《虢达掰82。器。所形成的愈伤缎织巾，商的譬获白色，旗地较为)

5、j}散，但不曷分化：霄的为绿色或融色，囊筑坚硬，霹在势纯墙莽基上游导形成不定芽。(3)诧托、花辆岁}植体接稀在I／2MS附加BAt．0fIlg虎、2，4-DO．5mCL的墙养基上对，{笔耗愈褒缀织静诱幕率萄遮lO溺，花辆氇溪运§6．296。将诱导壤静愈赛缀缀转入I／2黼S附加黼0．5lllg／kIBAO．01-0．Ofimg／L的增疆培养簇孛，缝代培养2-3个霹甓，愈伤瓣绞露天爨璃殖，帮分可努德密不是努。(《)将菇l上述岁}辍傣

6、诱静崮静愈伤组缓继彳弋墙莽程l龙鹣瓣鸯耩BAt-2mg／L、18AO-O．淑虎静臻葬蒺上，瑟诱导泰定芽§§产曼乏。筑避争s次瓣缝我培葬，玲塞痿缀缀豹袭嚣诱等产生不定芽。箕中，时嚣蕊伤缝级不定势懿黪残攀褥这44％，花攮秘蕊辆塞褒缀绠不定势戆形成枣惫54。爨。(5)巍不定蒡长囊1-2cm瓣将葵镯下，警予生羧壤菸基上诱导茭妻攘。逶予由菜萸幼芽生根的培养基组成为1／2Ms附加IBAl—2mg／L。经过一个月左右的培养，山茱萸试管苗可以生根，生根率为2096左右。2．山茱萸超度含水态苗与正常苗的形态学结构观察

7、。实验分别以光学显微镜、扫描电子显微镜、透射电子显微镜为观察手段，对山茱萸组织培养过程中的正常苗与超度含水态苗叶的结构进行了观察，结果发现：山茱萸正常苗叶的结构基本类似于大田实生苗，而超度含水态苗的叶片结构则在不同观察水平上显示出与正常苗存在着明显的差异，主要结果见下表。山茱萸组织培养正常苗与超f蔓含水态苗叶片结构的观察比较正常苗超费分惦苗▲拥栏组织，海锦组织明显；A表皮细胞排列紧密莹齐▲叶绿体形志太，台量丰富▲叶脉发育良圩，成网状分布▲寻菅木质化程度高▲基奉毛栅栏组织，海绵组织之分^叶晦细胞排，q

8、疏松▲叶咏发育不良A导管分子少且未质化程度低☆叶肉细胞胞质浓犀，较大，具明显可见的核仁☆膪质稀少，细黻较小☆叶绿体戈、数目多．线粒体、内☆高尔基体，生!f粒辟和内质网等细胞质网等细咆器数目也较多嚣稀少而率疆找到●叶表细胞眠姑柚0，排列整齐、紧密，知胞闸界馥，^晰扫描电子显搿崩礴眩融a漂◆叶袁细胞表面璃增质分布◆气孔嚣下陷，开度小◆叶表面细胞排列松散，不投剧，细胞界线不清晰◆叶袁蜡质少◆气iU孽明显突起于表皮知胞上◆叶毒撒毛，表面不光滑◆叶表具毛．表面光滑3．山茱萸组织培养中超度含水态苗的发生及防止(

9、1)山茱萸组织培养过程中出现大量的超度含水态苗。当培养基中分裂素浓度较高，培养时间较长时，再生植株中产生的超度含水态苗比例高，当BA浓度达到,Smg／L时．超度含水态苗形成的比率可以达到5096以上。在考察不同培养容器的培养效果时发现，透气性好的三角瓶配以纸质瓶盖有利于降低超度含水态苗的发生。在相同的培养条件下，在广口瓶配以聚丙烯塑料瓶盖的培养器皿中超度含水态苗的发生率达82．1％，而实验用三角瓶配以纸质盖时山茱萸超度含水态苗的发生率为33．3％。(2)实验探索了一些