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1、陕西林业科技!!"#$!"$#)#"'!#"%:-004].QF+1HB:,.14,104/A1,-4FCF5E植物组织培养的常见污染及其防控技术任目瑾!周建峰!陕西省苗木繁育中心"陕西眉县&!!'"%#摘!要%在分析植物组织培养污染分类&污染原因基础上!提出了外殖体选择&采集&预培养&清洗消毒等外植体污染防控措施!熏蒸消毒&紫外灯照射灭菌&设备器械消毒等环境污染防控措施!操作人员卫生&操作规程执行等操作污染防控措施关键词%植物+组织培养+污染+管理中图分类号%N6#'?#文献标识码%2文章编号%#""#@!##&"!"#$#"$@"#"'@"',1;34=>;43>
2、1;,1;3?15=64@8?6@>;C54;3+>@@86,8538?6Z38JD@`.4!XTOa.04@I145"<.''+G)<%%#3)+2C%4&"#/-)"+B%+-%&!?%)B"/+-$!<.''+G)&!!'"%##E@3?473)7F4B0G.40B.F4H.4B-1W+F,1HHFIWC04BB.HHD1,DCBD+1V1+1,C0HH.I.1/U0H1/F4HFD+,1H04/+10HF4H?3]WC04BHH1C1,B.F4!,FCC1,B.F404/HB1+.C.<0B.F40HV1CC0H,F4B0G.40B.F4,F4B+FCG10H
3、D+1HC.^1HB10G.45!DCB+0L.FC1BC0GW04/1;D.WG14BHB1+.C.<0B.F4V1+1-.5-C.5-B1/?Z1C1L04B+15DC0B.F4HIF+VF+^1+H04/FW1+0B.F4W+F,1/D+1HBFW+1L14B,F4B0G.40B.F4V1+1040CE<1/.4C.5-BFIB-1,F4B0G.40B.F4BEW1H04/+10HF4H?F6:G1?9@)=C04B+B.HHD1,DCBD+1+,F4B0G.40B.F4+,F4B+FC!!植物组织培养是利用细胞的全能性通过无菌类分为细菌污染&真菌污染和病毒污染
4、操作把植物体的外植体接种于人工配制的培养基细菌是所有微生物中数量最多的一类!无孔上!在人工控制的环境条件下进行离体培养的一不入!泥土里&水里&空气里都散布着细菌!或者与套技术和方法随着科技的发展!这项技术已越其他生物共生!形状各异!大小不一细菌污染的来越多地应用于植物快繁&种质保存和遗传改良特点是在培养基表面或材料表面出现黏液状物植物组织培养是在无菌条件下进行的!尽管各个体&菌落或者是浑浊的水迹状!有时甚至出现泡沫环节的操作有严格的要求!但是污染还是经常发发酵状!一般在接种#!!/即能发现!菌落小!表生!甚至影响到实验的成败和规模化生产污染面呈乳脂状光泽!一般有臭味细
5、菌污染主要来,#-的出现增加了成本!浪费了资源!延误了时间!影源于接种材料及工具细菌污染占%!?#'h!,!-响了工作效率因此!分析植物组织培养中的污通常有球菌和芽孢杆菌等染种类!提出相应防控措施!对这项技术的推广利真菌喜欢温暖潮湿的环境真菌污染的特点用具有重要意义是菌斑呈绒毛状&絮状!界限不明显!伴有不同颜色的孢子!一般在接种'!#"/后才能发现!菌落#!污染分类大!颜色多样!表面呈毛绒状!一般有霉味真菌污染是指在培养过程中由于外界真菌&细菌的污染主要来源于环境真菌中通常有青霉菌&,!-或培养材料的内生菌所侵染!而使培养基和培养芽枝霉菌&黑曲菌和酵母菌等材料滋生杂菌
6、!导致培养失败的现象按污染种病毒颗粒特别微小!所以病毒污染的概率比!收稿日期%!"#$@"&@#%!作者简介%任目瑾"#)$)9#!女!本科!工程师!主要从事植物组织培养和温室花卉栽培.#"(.陕!西!林!业!科!技较小病毒肉眼看不到!污染难于发现!用电子显放在无菌条件下!进行暗培养!待抽出徒长的黄化微镜才能观察到由于病毒一般潜伏在细胞内!枝条时取材!可减少污染对整个细胞培养不会致死多数病毒来源于外植'?#?'!外植体的清洗消毒!外植体表面消毒既体本身要求将外植体表面的微生物彻底杀死!又要求尽可能少伤害外植体组织和表层细胞外植体采回!!污染原因来后!先用自来水冲掉表面
7、的灰尘和杂物!剪掉不组织培养中的污染原因很多!主要有外植体要的枝&叶等组织!放入烧杯中用洗洁精水浸泡'污染!外植体消毒不过关!组织培养中的设备&仪G.4!再用水冲洗干净!流水下再冲洗'"G.4然器&工具消毒灭菌不彻底!接种环境和培养环境不后带进无菌操作台!用&%h的酒精浸泡'"H!无,'-清洁!操作人员卫生习惯不良!不能对原瓶苗污菌水冲洗一遍!再用次氯酸钠&次氯酸钙或"?#h染情况仔细辨认!培养材料携带内生菌+不能严格的升汞浸泡#"!'"G.4"视植株品种&幼嫩程度地执行消毒流程等等而定#!无菌水再冲洗%遍升汞的消毒效果是最好的但应当记住!消毒剂是对
