肝细胞生长因子的抗鼠心肌细胞凋亡作用与抑制钙敏感受体有关

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1、万方数据史堡：坠鱼篮疲苤盍垫!Q生!!旦星垫益筮!!期，￡!地』￡!旦i!!，№堡婴坠塑垫!Q：Y吐!§堕璺!!肝细胞生长因子的抗鼠心肌细胞凋亡作用与抑制钙敏感受体有关严凌朱铁兵王连生陶正贤潘世阳杨志健曹克将【摘要】目的探讨肝细胞生长因子(HGF)在缺血再灌注损伤中的抗细胞凋亡作用与钙敏感性受体(CaSR)mRNA表达下调的关系。方法分离的新生鼠心肌细胞，随机分为对照组、模拟心肌缺血再灌注组(I／R组)、特异性CaSR激活剂Gdcl3组(GdCl3组)、GdCl3+Na+／Ca“交换抑制剂NiCl2+L-犁钙通道阻滞剂CdCl2组(GdCl3+NiCl2+CdCl2

2、组)、GdCl3+选择性P13K阻断剂LY294002组(GdCl3+LY294002组)、GdCl3+肝细胞生长因子HGF组(GdCl3+HGF组)、GdCl3+HGF+LY294002组。新生鼠心肌细胞经缺氧处理后在缺血缓冲液中培养2h，然后在标准培养液中培养24h，建立模拟心肌缺血再灌注(I／R)模型。TUNEI。法检测各组心肌细胞凋亡情况。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定各组CaSRmRNA表达。Westernblot测定促凋亡蛋白Caspase-3，抗凋亡蛋白Bcl-2和磷脂酰肌醇．3激酶(P13K)。结果模拟的1／R增强了CaSRmRNA的表达(I

3、／R组：2．62±0．41，对照组：1．00±0．31，P<0．01)及心肌细胞的凋亡[VR组：(15．32±2．54)％，对照组：(2．90±1．45)％，P<0．01]。GdCl3进一步增强了CaSRmRNA的表达(GdCl籀l：4．46±0．62，I／R组：2．624-0．41，P<0．01)及心肌细胞的凋亡[GdCl3组：(25．364-2．60)％，I／R组：(15．32±2．54)％，P<0．01]，同时卜调了Caspase-3(GdCl3组：1．934-0．28，I／R组：1．50±0．21，P<0．01)，下调了Bcl-2的表达(GdCI，组：0．8

4、2士0．18，I／R组：1．71±0．30，P<0．01)，抑制rP13K的磷酸化(I／R组：0．87s0．08，GdCl3组：0．61士0．07，P<0．01)。GdCl3+LY294002组心肌细胞凋亡率显著高于Gdcl3组[(32．60±3．42)％比(25．36±2．60)％，P<0．01]，但两组问CaSRmRNA的表达差异无统计学意义。HGF通过抑制Caspase一3(GdCl3+HGF组：1．12s0．23，GdCl3组：1．93s0．28，P<0．05；GdCl3+HGF+LY294002组：1．87±0．31，GdCl3+LY294002组：3．8

5、6±0．47，P<0．05)和促进Bcl-2的表达(GdCll+HGF组：2．56±0．54，GdCl3组：0．82±0．18，P<0．05；GdCl3+HGF+LY294002组：1．68±0．28，GdCI，+LY29d002组：0．68士o-13，P<0．05)减少了I／R和GdCl3诱导的心肌细胞凋亡[GdCl3+HGF组：(11．8±1．89)％，GdCl3组：(25．36±2．60)％，P<0．05]，同时促进rP13K的磷酸化(GdCl3+HGF组：2．87±0．21，GdCi，组：0．61士0．07，P<0．05；GdCl3+HGF+LY294002

6、组：2．Ol±0．14，GdCl，+LY294002组：0．44±0．10，P

7、dcardiomyocyteapoptosisviadownregulatingcalciumsensingreceptorexpressionYANh。lg．zHUT诡一bing．WANGLian·sheng，TAOZheng—xian．PANshi—yang，YANGZhi-jian，CAOKe-jiang．DepartmentofCardiology，FirstAf筇liatedHospitalofNanjingMedicalUniversity，Nanjing210029，ChinaCorrespondingauthor：ZHUTie—bing。Emai