AOB血型鉴定操作规程

《AOB血型鉴定操作规程》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、ABO血型鉴定操作规程1.0.0  原理 根据红细胞上和血清（或血浆）中有无A抗原和（或）B抗原及其抗体，将血型分为A型、B型、AB型及O型。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型鉴定ABO血型。正定型正定型是指用已知抗-A、抗-B血清来检测受检红细胞上有无相应的A抗原和（或）B抗原；反定型反定型反定型是指用已知A1型、B型红细胞来检测受检血清（或血浆）中有无相应的抗-A和（或）抗-B。 2.0.0  原始样品要求  5 mL静脉全血。 3.0.0  样品容器和添加剂  真空试管，EDTA.K2抗凝/普通试管，不抗凝。 

2、4.0.0  检测环境要求  温度：18℃～27℃，湿度：30%～70%。 5.0.0  所需材料和设备 5.1 设备  普通离心机、免疫血液学离心机、显微镜、恒温水箱、定时器。 5.2 材料  抗-A、抗-B血清、ABO标准抗原红细胞试剂、移液器、加样吸头、生理盐水（NS）、干净空试管。 6.0.0  检测操作过程 6.1 将受检标本以1000g离心5min，使标本血浆/血清与红细胞分离，吸取红细胞，用NS洗涤三次后，配成3%～5%红细胞悬液。 6.2 取6支小试管，分别标记“-A”、“-B”、 “自身”、 “Ac”

3、、“Bc”、 “Oc”。  6.3 在“-A”、“-B”管中分别加入抗-A和抗-B血清各50µL ，其余管加入受检血浆/血清各100µL 。 6.4 在“-A”、“-B”、 “自身”管中加入受检者3%～5%红细胞悬液各50µL ，摇匀。 6.5 在“Ac”、“Bc”、 “Oc”管中分别加入A1、B、O红细胞试剂各50µL ，摇匀。 6.6 1000g离心15sec，轻轻悬浮红细胞，观察结果并记录。 6.7 根据实验需要，除室温下观察结果外，另可增加在4℃、37℃下观察结果。 7.0.0  结果判断 7.1 凝集强度判断

4、标准见表1。表1 凝集强度判断标准凝集强度判断标准表表7.2   7.3 正反定型不一致、ABO抗原减弱、抗-A或抗-B减弱、O细胞凝集时，排除人为操作错误后，执行《疑难血型鉴定操作规程》进行最终确认。 7.4 根据上述判断标准，作出结论并记录在《免疫血液学检查实验记录》。 8.0.0  结果报告   根据实验结果，打印《免疫血液学实验报告》。报告的形式为：A型/B型/O型/AB型。 9.0.0  实验结果解释 实验结果为A型、B型、AB型，O型，说明受检者ABO血型分别属于A型、B型、AB型，O型。红细胞上分别有A抗

5、原、B抗原、皆有A抗原和B抗原、皆无A抗原和B抗原；血浆中分别有抗-B、抗-A、抗-AB、皆无抗-A(B)。 10.0.0  质量控制 当受检标本与正、反定型试剂反应，凝集强度少于2+时，取标准抗-A、抗-B或A、B、O红细胞与正、反定型试剂反应，以验证试剂效能是否下降。 11.0.0  注意事项 11.1 试管必须清洁、干燥，防止溶血。 11.2 加样顺序一般先加血清，再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。 11.3 分型血清效价太低，抗原抗体比例不适当，可使反应不明显误判为阴性反应。 11.4 用立即试管法可能

6、不能测出亚型（如AX），需延长作用时间。 11.5 观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于亚型、类B或cisAB的发现。 11.6 各种原因引起的红细胞溶解，容易误判为不凝集；部分溶血时，可溶性血型物质中和了相应的抗体，也会造成不凝集。 11.7 受检者红细胞上抗原位点过少（如亚型）或抗原性减弱（多见于白血病或恶性肿瘤）以及类B或cisAB等，易被误判为不凝集。 11.8 ABO正反定型不一致常见原因 11.8.1 分型血清效价太低，亲和力不强。 11.8.2 漏加、错加试剂或标本，试剂被污染或失效。 1

7、1.8.3 红细胞悬液过浓或过淡，抗原抗体比例不适当，使反应不明显误判为阴性结果。 11.8.4 受检者红细胞上抗原位点过少（如亚型）或抗原性减弱（多见于白血病或恶性肿瘤）以及类B或cisAB等。 11.8.5 受检者血清蛋白紊乱（高球蛋白血症）或实验温度过高，常引起细胞呈缗钱状排列。 11.8.6 受检者血清中缺乏应有的抗-A或抗-B，如丙种球蛋白缺乏症。 11.8.7 各种原因引起的红细胞溶解，误判为不凝集；部分溶血时，可溶性血型物质中和了相应的抗体。 11.8.8 由细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集往往是正反

8、定型不符的原因。 11.8.9 血清中有意外抗体，如抗-I等，常干扰定型。 11.8.10 患者近期曾输过异型血，使其血液标本成为不同型别的红细胞混合物，定型时显示“混合外观凝集”现象。 11.8.11 嵌合体血型，体内有两群红细胞，定型时显示“混合外观凝集”现象。 11.8.12 获得性类B的影响：由于革兰氏阴性杆菌的作用，红细