动物细胞融合与单克隆1抗体

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1、学校：灵台一中姓名：徐改秀2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体引入新课1970年，有两位科学家做了一个人—鼠细胞融合实验，以证明细胞膜上的蛋白质分子是运动的。那么，如何实现人—鼠细胞的融合，以及动物细胞融合后还有什么用途呢？这就是今天我们这节课学习的内容。灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接细胞融合，形成杂种细胞（细胞膜具有一定的流动性）生物法：灭活的病毒（丧失感染性、保留抗原结构）过程：2、动植物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交或融合过程有什么影响？3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？离心、振动、电激

2、等物理方法；PEG等化学方法动物细胞无细胞壁，动物细胞融合过程中不须去除细胞壁和再生出细胞壁。１、植物体细胞杂交最终得到的是完整的植物个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？讨论不能，只能得到杂交细胞4、动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？能，还可以利用灭活的病毒（生物方法）进行诱导５、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同？讨论相同，都是细胞膜的流动性6、为什么要用灭活的病毒？病毒一般对生物体是有伤害的。7、动物细胞融合有什么意义？突破了有性杂交方法的局限，使远源杂交成为可能。仙台病毒物理或化学方法丧失感染活性保

3、留融合活性意义及用途⑴打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能；⑵广泛应用多个学科领域；⑶重要用途：制备单克隆抗体。6.植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合过程原理细胞融合的过程诱导方法用途细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合物理、化学方法物理、化学、生物方法获得杂种植株制备单克隆抗体细胞融合，植物组织培养细胞融合1抗体是由何种细胞产生的？2抗体是如何产生的？？二、单克隆抗体？3传统的抗体的生产方法及缺陷是什么？产量低、纯度低；而且制备抗体特异性差。4B淋巴细

4、胞与抗体的关系⑴．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生特异性抗体。⑵．动物在免疫反应过程中，体内产生特异性抗体种类可达百万种以上，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。⑶．但每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。⑷.在体外，一个Ｂ淋巴细胞是不可能无限增殖的。（一）、单克隆抗体的概念由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。（二）、单克隆抗体的制备1、设计方案：创始人：米尔斯坦一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖杂种细胞动物细胞培养技术

5、动物细胞融合单克隆抗体既能产生特异性抗体，又能大量繁殖1、设计方案：动物细胞融合技术B、BB、B瘤、瘤瘤、瘤只有杂种细胞才能活动物细胞培养2.单克隆抗体制备过程获得产生相应抗体的B淋巴细胞思考：①对小鼠做何处理？②细胞融合后，培养液中共有几种细胞？有几种融合细胞？③杂交瘤细胞的特点：既能在体外大量，又能产生。④产生抗体的杂交瘤细胞如何筛选出来的？注射特定的抗原蛋白五种（B淋巴细胞、骨髓瘤细胞、B-B、骨－骨、杂交瘤细胞）其中三种融合细胞。繁殖特异性抗体抑制骨髓瘤细胞的DNA复制。与常规抗体相比，单克隆抗体特异性强，灵敏度高，产量高，优越性十

6、分明显。应用：特点：１可用于作为诊断试剂：有准确，高效，快速的优点２可用于疾病治疗３可用于运载药物（作为运载对应疾病的药物的“生物导弹”）“生物导弹”＝抗癌细胞的单克隆抗体+放射性同位素+化学药物或细胞毒素。（单克隆抗体：导向。准确找到癌细胞位置，原位杀死癌细胞。）（三）单克隆抗体的应用两个过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法——灭活病毒一个新细胞——杂交瘤细胞一个优势——单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势小结1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细

7、胞融合的是（）A.经过免疫的B淋巴细胞B.没经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞A巩固练习２、在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（　　）A．结果是相同的B．杂种细胞的形成过程基本相同C．操作过程中酶的作用相同D．诱导融合的手段相同Ｂ3、单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是------（）A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成D4、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细

8、胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（）①淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂