牛冷冻精液稀释液的研究进展

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1、《上海畜牧兽医通讯》２０１４年第６期·１５·牛冷冻精液稀释液的研究进展王丽云刘玉朱子岳张海涛（北京奶牛中心北京１００１９２）DOI:10.14170/j.cnki.cn31-1278/s.2014.06.006精液的冷冻保存技术是随着人工授精（ＡＩ）的活率有所提高的结论。广泛应用而发展起来的，为了长时间地保存精液并１．３抗冻保护剂能够扩大精液的量，在鲜精中加入一定的稀释液，目前常用的甘油、乙二胺四乙酸和二甲基亚砜，目的是为了使精子有一个适于存活的环境，保证细但多数认为甘油的效果更好，因此甘油的应用更为广胞膜的完整不被损害，要求能供给养分、耐低温、抗泛〔９

2、，１１〕。但甘油本身对精子有一定的毒性，近年来开冻、维持渗透压和电解平衡、维持ｐＨ值、抑制细菌始开发可以取代甘油的其它抗冻物质。王锋等〔１２〕报生长。精液冷冻保存始于Ｓｐａｌｌａｎｚａｎｉ用雪冷却精道，向稀释液Ⅰ中添加乙二醇或丙二醇，精子解冻后活〔１〕子的试验，解冻后发现有极少数精子仍然存活。力与存活时间未见显著提高或延长，但精子的顶体完〔２〕Ｌｕｙｅｔ通过蛙精子冷冻试验提出冰冻过程的玻璃整率显著高于对照组。此外，白蛋白、血清也是较好〔３〕化学说。１９４９年英国科学家Ｐｏｌｇｅ等发现甘油的保护剂〔１３〕。张振中等〔１４〕报道：含３％甘油的“天然〔４〕具有

3、冷冻保护的作用。Ｓｔｅｗａｒｔ报道用冷冻精液冻精宝”（含植物抗冻剂）与含５％甘油的乳糖液相授精生了头牛犊。之后，冷冻精液技术开始应用于比，精子受胎率等有显著提高。生产。但是，该项技术在实践中大量应用只是在２０１．４抗生素世纪６０年代中期以后，随着生物化学与细胞生物稀释液中为抑菌而添加青霉素、链霉素较为普学的相互渗透和结合、分子生物学与低温生物学的遍。从１９７０年开始，国外试用数种新的抗生素，多快速发展，人们对精子结构与功能的研究越来越深〔１，９〕数取得了较好的效果。试验表明：新生霉素、土入，为精液的冷冻保存奠定了扎实的理论基础。我霉素、红霉素、泰洛霉素和

4、多粘霉素对精子有负面〔２〕国１９５８年首次成功进行了精液冷冻技术研究，之〔５〕〔１５〕作用。Ｋｏｍｍｉｓｒｕｄ等报道：加青霉素、链霉素〔１〕后在全国广泛研究及推广，以奶牛应用最多。的脱脂乳－卵黄液与加泰乐菌素、庆大霉素、壮观１常规卵黄稀释液的改良霉素和林肯霉素的ＢｉｌａｄｇａｌＲ液相比，６０ｄ不返情１．１缓冲剂率前者显著好于后者。普通抗生素及其混合物对能够起到调整ｐＨ值的作用，常用的有柠檬酸牛冻精中的支原体无明显效果〔１６〕。左福元等〔１７〕研钠、磷酸二氢钠、三羟甲基甲烷（Ｔｒｉｓ）这些对代谢性究表明稀释液中使用庆大霉素，其保存效果有优于〔５～６〕酸中毒

5、和酶活动反应具有良好的缓冲作用。董使用青霉素和链霉素的趋势和表现。〔７〕〔８〕雅娟等和许典新等提出：以Ｔｒｉｓ取代柠檬酸１．５抗氧化剂钠，试验组细管冻精的受胎率等明显高于对照组。〔１８〕张文举报道：谷胱甘肽可以显著提高母牛受１．２非电解质或弱电解质〔１９〕胎率。胡传活等添加不同浓度的丙氨酸、半胱氨常用的是葡萄糖、果糖、乳糖及蔗糖等糖类，使酸和精氨酸，以观察３种氨基酸在牛精液冷冻中应用棉子糖可获得相等或更好的效果，但棉子糖价格用的最佳浓度。再以最佳浓度的３种氨基酸进行〔５，９〕〔１０〕较高，尚缺乏使用价值。Ｗｏｅｌｄｅｒｓ等报道：两两或三重组合，与３种氨基

6、酸单一应用进行效果海藻糖和蔗糖都可使精子免受冷冻的伤害，但蔗糖对比，检测这些氨基酸对牛精液冷冻后质量是否有的效果明显好于海藻糖。周圣贤用红景天多糖、海协同作用。结果表明：无论单一或合并应用丙氨带多糖和低密度脂蛋白（ＬＤＬ）作为冷冻保护剂，测酸、半胱氨酸及精氨酸，均未能显著提高精液的冻定解冻后精子的运动参数、活率、线粒体活性、质膜后质量。Ｆａｂｂｒｏｃｉｎｉ等及Ｂｉｌｏｄｅａｕ研究证明：丙酮完整率和顶体完整率作为评价指标，得出红景天多〔２０〕酸盐可以明显提高地中海水牛精子冻后质量和糖对牛精子冷冻具有一定的保护效果，海带多糖能〔２１〕〔２２〕牛常用稀释液的抗

7、氧化性能。胡传活等在常提高精子的抗低温打击能力，鸽蛋ＬＤＬ中未知微用的果糖－柠檬酸钠－卵黄－甘油液的基础上，添分子对精子冷冻起到了一定的保护作用而使冻后加丙酮酸钾、丙酮酸钠或丙酮酸钙，以观察丙酮酸盐在牛精液冷冻中的应用效果。结果表明：各组精资助项目：北京市科技计划课题：奶牛良种自主繁育体系建立及子的冻后活力、复苏率、畸形率和顶体完整率之间关键技术研究（Ｄ１２１１００００３３１２００１）。北京市科技计划课题：优秀种牛遗传物质工厂化生产创新技术研究（Ｄ１２１１００００３３１２００２）没有显著差异，但试验组的冻后活力、复苏率和对·１６·《上海畜牧兽医通讯》２０

8、１４年第６期〔２３〕〔３〕ＰｏｌｇｅＣ，ＳｍｉｔｈＡＶ，ＰａｒｋｅｓＡＳ．Ｒｅｖ