中国卤虫胚胎发育基因trh基因和APH1基因的表达

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1、中国卤虫胚胎发育基因砌基因和彳丹r-1基因的表达中国卤虫胚胎发育基因trh基因和APH-1基因的表达摘要：中国卤虫(缸temiasinica)属于节肢动物门(肋阳UlIIArthropoda)，甲壳纲(ClassCrustacea)，鳃足亚纲(SubclassBranchiopoda)，无甲目(OrderAnostaca)，卤虫科(Faxi]yArtemiidae)，卤虫属(6enusArtemia)。卤虫广泛分布于盐湖、盐井等高盐水体中，因此其渗透调节功能对维持卤虫的生存意义重大。在卤虫发育的不同阶段，其渗透调节功能分别由不同的组织

2、器官来完成。在无节幼体期卤虫的渗透调节功能主要由盐腺来完成，而在拟成虫期和成虫期则主要由胸部的附肢来完成。另外，卤虫的滞育卵是暂停发育的原肠胚，这与其他生物的胚胎发育显著不同。卤虫胚胎发育基因的鉴别及功能研究对于胚胎暂停及重新启动的基因调控机制研究有重要意义。trh基因和APH-1基因是已知的两个胚胎发育相关基因，各自编码一个bHLH-PAS结构域蛋白和POU结构域蛋白，以转录因子的身份发挥作用。本研究首次采用RACE技术获得了2698bp的卤虫f砌基因的eDNA全序列，经Blast比对和SMART在线分析网站的分析，确定该序列为卤虫

3、trh基因(Genebank：FJ952937)。根据已得到的trh基因序列设计RT-PCR引物，以不同时期卤虫的cDNA为模板进行半定量RT-PCR，发现从无节幼体前期、无节幼体期到无节幼体后期trh的表达量呈上升趋势。经WesternBlot检测不同盐度环境下生活的卤虫中trh的表达量，发现trh表达量随卤虫生活环境盐度的升高而升高，表明卤虫trh基因与渗透调节功能相关。收集各个时期卤虫样品做整体免疫组化，染色结果显示在盐腺存在的情况下，trh在盐腺表达，盐腺消失以后trh基因在胸附肢表达。推测卤虫trh基因对卤虫的渗透调节和盐腺

4、及胸附肢的形态建成有重要作用。用RACE技术获得了1987bp的卤虫APH-1基因的eDNA全序列，经生物信息学分析确定其为APH-1基因(Genebank：FJ952936)。根据已得到的APH-1基因序列设计RT-PCR引物，以不同时期卤虫的总RNA样品反转录而成的eDNA为模板进行半定量RT-PCR，发现从无节幼体前期、无节幼体期到无节幼体后期APH-t的表达量呈先升后降的趋势。经WesternBlot检测不同盐度环境下生活的卤虫中APH-1的表达量，发现其表达量随卤虫生活环境盐度的升高而升高，表明卤虫该基因与渗透调节功能相关。

5、收集各个时期卤虫样品做整体免疫组化，染色结果显示在盐腺存在的情况下，APH-1在盐腺表达，盐腺消失以后该基因也随之消失。推测APH-1基因可能对卤虫的渗透调节和盐腺发育有重要作用。关键词：中国卤虫；trh基因；APH-1基因；胚胎发育基因；渗透调节。中国卤虫胚胎发育基因肭基因和_朋q基因的表达ExpressionsoftrhgeneandAPH-1geneduringearlyembryonicdevelopmentofArtemiasinicaAbstract：ArtemiasinicabelongstoPhylumArthropo

6、da，ClassCrustacea，SubclassBranchiopoda，OrderAnostaca，FamilyArtemiidaeandGenusArtemia．Itlivesinthehigh—saltsaltlakesandsalternsdiffusely．So，osmoregulationplaysallimportantpartinitslife．Inthedifferentstageofdevelopment，osmoregulationisaccomplishedbydifferenttissues．Forexa

7、mple，whenArtemiaishatchedintonauplius，itisaccomplishedbysalt#andandthoracicepipodsshowtheiraffectsinthesub-adultandadultstages．Diapauseeggssuspendingastrulation，whichissignificantdifferencesfromotherembryonicdecvelopment．ItisimprotanttoidentifyArtemiaembryodevel叩mentgen

8、e，andstudythefunctionandmechanismofembryogenessuspensionandrestart．trhgeneandAPH-1geneareknownasembryonicdevel