SMART 技术构建的辣椒疫霉菌与辣椒互作AD-cDNA 文库

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1、2015（11）：51-54中国蔬菜CHINAVEGETABLES研究论文SMART技术构建的辣椒疫霉菌与辣椒互作AD-cDNA文库周志国　明月梅（廊坊师范学院生命科学学院，河北廊坊065000）摘　要：为了分离和克隆辣椒中疫霉菌诱导基因，以接种辣椒疫霉菌的叶片为材料，利用SMART技术构建辣椒疫霉菌与辣6椒互作的双杂交cDNA文库。结果表明：该文库容量为3.6×10cfu，重组率88％左右，插入片段集中在300～2000bp之间，平均长度约为800bp，表明获得的文库质量较高，该文库将为分子育种提供重要的基因

2、资源。关键词：辣椒疫霉菌；SMART技术；双杂交cDNA文库辣椒是我国重要的蔬菜和加工原料作物，产值与致病机理、辣椒的疫病病理、栽培方式、化学防治、居蔬菜之首（谢思惠等，2011）。在辣椒生产过程生物防治等方面进行了相关研究（田林等，1989；中，病害种类多，发生频繁，其中疫病（Phytophthora朱英波和李超，2002；李智军等，2007；刘学敏，blight）是重要的真菌性土传病害，发病快，蔓延迅2007；江厚春等，2011），但抗病育种作为防治辣速，病程期短，防治困难（杜晓华等，2005），常椒疫病的重

3、要方法，其抗病资源相对缺乏（程芳，造成辣椒大面积减产甚至绝收，在我国吉林、辽宁、2007；史云国，2007；徐刘平和郭坚华，2007）。青海、河北、北京、云南、甘肃、陕西、上海、浙cDNA文库是现代研究功能基因组学的最有江、湖南、江苏、江西等地均有发生（周启明等，效手段之一，可直接从cDNA文库中筛选所需目1984；关天舒等，1995；邹学校等，2004）。研究的基因，并用于基因的表达分析（Colinetal.，人员已对辣椒疫霉菌（Phytophthoracapsici）的生理1999；蔡宁波等，2007；朱利军

4、等，2009）。利用SMART技术（SwitchingMechanismAt5′endofRNA周志国，男，讲师，主要从事蔬菜作物遗传育种工作，E-mail：Transcript）构建全长cDNA文库，可从中发现候选zhiguo_zhou@163.com基因，从而在生产上实现转基因技术的广泛应用（张收稿日期：2015-06-19；接受日期：2015-07-30冲等，2013）。为充分开发和利用辣椒抗病基因，基金项目：河北省科技计划项目（12226306），河北省高校食药用菌应用技术研发中心项目（YF201

5、411）本试验以辣椒为材料，利用SMART技术构建辣椒Abstract：Takingtomatovariety‘YingfenNo.8’astestmaterial，thispaperusedpeatandvermiculiteasmixedmatrixtostudyintidalirrigationandunderintelligentgreenhouseconditiontheeffectsofnutrientsupplyingmaintainingtimea

6、ndintervaltimeonqualityoftomatoseedlingsraisedontrayswithcentralcompositerotatabledesignsof2factors．Theresultsshowedwhentomatogrew5leavesand1heart，withtheincreaseofnutrientsupplyingtime，theseedlingdrymatterandstrongseedlingi

7、ndexshowedfirstincreasingthendecliningtrend．Whilealongwiththeintervaltimeextensionofnutrientsupplying，theseedlingdrymatterandstrongseedlingindexshowedadecliningtendency．Theoptimalnutrientsupplyingschemeisin8-18minofmaintainingti

8、meand198-348minofintervaltime．Thustheseedlingqualitycouldachieveanidealsituation．Webelieveundertheexperimentcondition，thissol