实验7感觉器官结构观察血蛋白含量测定血型鉴定

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时间:2019-05-11

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1、人体解剖生理学实验实验课件之七临沂大学生命科学学院王学斌实验七感觉器官结构观察 血红蛋白含量测定ABO血型鉴定一、实验目的:1.掌握比色法测定血红蛋白含量的方法。2.掌握ABO血型鉴定的原理和方法,观察红细胞凝集现象。3.掌握眼和耳的形态;视网膜的组织结构;耳的分部、中耳的构成、内耳迷路的构成和组织结构。二、实验原理:在一定量的血液中,加入少量盐酸,破坏RBC膜,同时使红细胞内亚铁(Fe2+)血红素变成高铁(Fe3+)血红素,呈现较稳定的棕色。用蒸馏水稀释,与血红蛋白计的标准色目测比色,可得每100ml血液中所含的血红蛋白克数或百

2、分率。(一)比色法(酸化法)测定血红蛋白:(二)血型鉴定:血型多指红细胞血型,根据红细胞膜外表面的特异性抗原(凝集原)确定。抗体(凝集素)存在于血清,可与红细胞膜上的相应抗原起反应,产生凝集反应,最后发生RBC溶解。三、实验器材感觉器官标本、模型、血红蛋白计、0.1mol/LHCl、酒精棉球、一次性刺血针、一次性20l定量毛细取血管、滤纸、滴管、蒸馏水。双凹载玻片、标准血清(A型和B型)、酒精棉球、一次性刺血针、消毒牙签。血红蛋白计:①标准比色架,镶有棕色的标准色柱;②血红蛋白稀释管,方形,两侧有刻度,一侧以g为计数单位,对侧以

3、百分率计,是按国人血红蛋白正常值14.5g/100ml为100%进行百分率刻度标记。四、方法与步骤(一)血红蛋白含量的测定:1.用滴管加0.1mol/LHCl于血红蛋白稀释管的刻度10处(用百分率计算的一侧)。2.消毒指尖,用刺血针刺破指尖,采血(血滴宜大些)。用毛细取血管的尖端接触血滴,吸血至刻度20mm3处(0.02ml)。3.用滤纸片或棉球擦净毛细取血管口周围的血液,将毛细取血管插入血红蛋白稀释管的盐酸内,轻轻吹出血液至管底部,反复吸入并吹出稀释管内上层的盐酸,洗涤吸管多次,使毛细取血管内的血液完全洗入稀释管内。摇匀后,放置

4、10min,使盐酸与血红蛋白充分作用。4.把稀释管插入标准比色架两色柱中央的空格中,使无刻度的两侧面位于空格的前后方,便于透光和比色。5.用滴管向稀释管内逐滴加入蒸馏水(每加一滴要搅拌),边滴边观察颜色,直至颜色与标准玻璃色柱相同为止。此时稀释管上液面的刻度读数即为100ml血液血红蛋白的克数。【注意事项】1.吹血液入稀释管及洗净吸管时,不宜用力过猛。2.蒸馏水需逐滴加入,多做几次比色,以免稀释过量。每次比色时,应将搅拌用的玻璃棒取出,以免影响比色。3.由于操作过程过长而造成吸管内血液凝固,堵塞管孔时,按下列溶液的顺序重复冲洗吸管

5、,即用水→95%酒精→乙醚或丙酮。【附录】市售盐酸浓度是36~38%,即10.65~11.24N。以12N计算的话,若要配1NHCl100ml,则100ml×1mol/L=12mol/L×XX=8.3ml(二)血型测定:1.加标准血清:取双凹载玻片一块,A型标准血清(抗B)、B型标准血清(抗A)各一滴分别加入左、右凹陷内。2.采血:消毒,刺破左手无名指指尖一侧,玻片的每侧凹陷各放入1~2滴血。用牙签搅拌,使抗血清和血液充分混和(每边用一牙签,勿混用)。3.反应:静置室温下10~15min,观察有无凝集现象。凝集反应的强度因人而异,

6、有时需借助显微镜才能确定是否出现凝集.仅A侧凝集,为B型;仅B侧凝集,为A型;两侧均凝集,为AB型;两侧均未凝集,为O型。(三)眼和耳的形态结构:1.眼球壁和内容物的组成和功能;视网膜的组织结构。2.耳的分部、中耳的构成、内耳迷路的构成和组织结构。3.皮肤、舌与鼻腔的感受器。1.填写自己的血红蛋白含量(保留小数点后一位)。说明是否正常,为什么?2.填写自己的血型。根据自己的血型,说明你能接受何种血型的血液及输血方式,说明你能输血给何种血型的人及输血方式。3.绘眼球冠状切面示意图。本周值日:3组:王爱帅李敏王彦金赵倩2组:宁守强张倩

7、杨波常馨月1组:高宗宝张春良徐希亮董晓华1.填写自己的血红蛋白含量(保留小数点后一位)。说明是否正常,为什么?2.填写自己的血型。根据自己的血型,说明你能接受何种血型的血液及输血方式,说明你能输血给何种血型的人及输血方式。3.填写收缩压、舒张压的测量表格。实验报告

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