AlphaLISA均相酶联免疫分析技术

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1、AlphaLISA——不需洗涤的ELISA非常灵敏10-17mol/孔线性范围为3-5logs向所有的洗涤步骤说BYEAlphaLISA技术原理AlphaLISA技术主要依赖于Alpha供体微珠和受体微珠的相互作用。当生物反应使供体微珠和受体微珠相互接近时,激光激发级联反应,从而产生极大放大的信号。具体来说,在680nm的激光照射下,供体微珠上的光敏剂将周围环境中的氧气转化为更为活跃的单体氧。单体氧扩散至受体微珠,产生一系列的化学发光反应,最后将能量传递到铕,发射波长为615nm。在生物分子不存在特异的互相作用时,单体氧无法扩散到受体微珠,则不会有信号的产生。长波长的激

2、发光确保生物分子单体氧分子在溶液中可扩散和实验成分的干扰非常少200nm,可检测非常大的生物分子。供体微珠含有高密度的光敏受体微珠上含有二甲噻吩衍剂,每个微珠每秒可产生多达生物,同单体氧反应,产生60000个单体氧分子,极大地一系列化学发光反应,最后扩增了信号,从而使检测灵敏将能量转移到615nm。该反度达到attomole水平应的半衰期为0.3秒,可使用时间分辨的方法检测AlphaLISA技术的优势背景低,抗淬灭能力强——时间分辨荧光的检测模式,可生物大分子和复杂互相作用的检测——供体和受体的距检测血清等复杂样品离可达200nmAlphaLISA长波长激发,短波长发射

3、,不会有来自荧光的Alpha供体微珠和受体微珠在小于200nm的范围内都可背景。其检测模式为时间分辨荧光,进一步降低了背景,被检测到,可以检测完整蛋白质、酶复合体、噬菌体等确保结果的真实性。而且,AlphaLISA发射波长为非常复杂的复合物和相互作用。而其它均相技术,例如615nm,非常尖锐,基本没有来自样品的淬灭干扰,是时间分辨荧光(TR-FRET)、荧光偏振(FP),供体和受进行复杂样品检测的理想选择,如血清和血浆等。体之间的距离为10nm,仅限于小分子的检测。检测方式灵活多样——可进行多种形式的实验灵敏度高操作简单——该技术不需洗涤,灵敏度为10-17Alpha技

4、术非常灵活,可进行多种形式的实验,包括竞争摩尔/孔性实验、结合实验、解聚实验、检测实验等。可以使用直AlphaLISA是目前灵敏度最高的检测技术,可达attomole接检测的方式,也可以选择间接检测的方式。(10-17)水平。而且,该实验无需洗涤,操作非常简便。AlphaLISA与ELISA的比较AlphaLISA技术是无需洗涤的ELISA技术,与传统ELISA相比,具有不可比拟的优势。传统的ELISAAlphaLISA特异性高高灵敏度10-10摩尔/孔10-17摩尔/孔检测性质非均相:需要至少6个步骤洗涤均相:无需洗涤高通量96孔板96/384/1536/3456孔板

5、均可抗体要求需要高亲和力抗体高/低亲和力抗体均可应用样品体积大,25-50µL小,5µL检测范围2个数量级3-5个数量级所需仪器标准微孔板读数议EnVisionAlpha或EnspireAlpha2AlphaLISA的检测:Alpha微孔板和读板仪AlphaLISA作为科学研究的通用平台AlphaLISA可以在PerkinElmer公司的EnSpireAlpha检AlphaLISA是进行科学研究通用平台建设的良好选择。测仪或EnVision多标记检测仪上进行检测,其装备了专利用AlphaLISA,可以方便地实现低亲和力相互作用检用的激光用于激发光,并有适宜的温控体系。H

6、TS模块测、可以灵敏地检测到低丰度的生物标志物、可以在短时间内建立起表观基因组学检测的平台......一般情况下,的设计使检测器直接在样品上读数,进一步提高检测灵我们推荐选择亲和素标记的供体微珠,被检测的成分用敏度。生物素标记即可。受体微珠可以与一抗偶联,也可以利同时,PerkinElmer公司提供多种微孔板进行AlphaLISA用物种特异性的二抗偶联的受体微珠或抗融合蛋白偶联技术的检测,包括OptiPlateTMAlphaPlateTMProxiPlateTM的受体微珠。受体微珠也可以与特定的结合蛋白偶联。1/2AreaPlate或CulturPlateTM微孔板等,

7、可达到最高AlphaLISA整个偶联过程不需亲和柱纯化,只需要离心的灵敏度和可靠性。就可将偶联蛋白和未偶联蛋白分离。Y-亲和素或其它结合蛋白A/B-蛋白、多肽、抗体、寡核苷酸EnVision多标记检测仪EnSpireAlpha/AlphaPLUSX-抗体,结合蛋白微孔板:种类齐全,应用特异AlphaLISA免疫检测试剂盒PerkinElmer提供以下的微孔板,全部经过验证,可进行PerkinElmer提供几十种无需洗涤的AlphaLISA免疫检测Alpha技术的检测:试剂盒,帮您实现复杂的或者丰度很低的Biomarker的检测,为您提供更

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