《色谱分析法引论》PPT课件

《《色谱分析法引论》PPT课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第三章色谱分析法引论内容提要：第一节色谱法概述第二节色谱法基本术语第三节色谱法基本理论第一节色谱法概述一、色谱分析法的基本原理二、色谱分析法的分类三、色谱分离过程四、色谱法的特点一、色谱分析法的基本原理1、色谱法的起源俄国植物学家茨维特在1906年使用的装置：色谱原型装置，如图。植物色素分离实验：在一玻璃管中放入碳酸钙，将含有植物色素（植物叶的提取液）的石油醚倒入管中。此时，玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。然后用纯石油醚冲洗，随着石油醚的加入，谱带不断地向下移动，并逐渐分开成几个不同颜色的谱带，继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素，并可分别进行鉴定。色谱法也由此而得名

2、。其中装填了填料的玻璃管称为色谱柱；柱中的填料物质称为固定相；相对于固定相运动、流经固定相的空隙或表面的冲洗溶剂称为流动相。现在的色谱法早已不局限于色素的分离，其方法也早已得到了极大的发展，但其分离的原理仍然是一样的。我们仍然叫它色谱分析。2、色谱法的原理色谱法也称层析法，是一种将混合物样品的各组分进行分离，然后顺序检测各组分的分离与分析技术。色谱法是一种分离技术：试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配过程。其中的一相固定不动，称为固定相；另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。当流动相中携带的混合物流

3、经固定相时，其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。两相及两相的相对运动构成了色谱法的基础二、色谱分析法的分类（一）按固定相和流动相所处的状态分类1、气相色谱法（GC）以气体为流动相的色谱法称为气相色谱法(GC)。按照固定相的状态又可将气相色谱法分为：气-液色谱法：以气体为流动相，以涂在载体表面的液体为固定相的色谱法。气-固色谱法：以

4、气体为流动相，以固体为固定相的色谱法。气相色谱法中流动相常称为载气。2、液相色谱法（LC）以液体为流动相的色谱法称为液相色谱法。同理，按照固定相的状态又可将液相色谱法分为：液-固色谱法：前者是以液体为流动相，以固体为固定相的色谱法。液-液色谱法：后者是以液体为流动相，以涂在载体表面的液体为固定相的色谱法。（二）按固定相的形式分类1、柱色谱：固定相装在色谱柱中。液体或气体流动相从柱头向柱尾连续不断地冲洗。共分为两大类：填充柱色谱：固定相装在一根玻璃或金属管内；毛细管柱色谱：固定相附着在一根细管内壁上，管中心是空的，也叫开管柱色谱。上述对植物色素的分离即是经典的填充柱色谱法。2

5、、纸色谱：利用滤纸作载体，吸附在纸上的溶剂作固定相。液体流动相从薄层板一端向另一端扩散。3、薄层色谱：将固体吸附剂在玻璃板或塑料板上制成薄层作固定相。液体流动相从薄层板一端向另一端扩散。纸色谱和薄层色谱总称平面色谱，平面色谱是靠滤纸或硅胶层的毛细管作用将流动相从一端吸上来，使样品组分得以分离。（三）按分离原理分类1、吸附色谱法：用吸附剂作固定相，利用吸附剂（一般是固体）表面对不同组分吸附能力的不同，因而吸附平衡常数不同而将组分分离的色谱法，包括气-固吸附色谱法和液-固吸附色谱法。2、分配色谱法：用液体作固定相，利用不同组分在液体固定相和流动相中的溶解度不同，因而分配系数不同

6、而进行分离的色谱法，包括气-液分配色谱法和液-液分配色谱法。3、离子交换色谱法：固定相为离子交换剂，利用离子交换剂与不同离子交换能力的不同，因而选择性系数不同而进行分离的色谱法。只有液相离子交换色谱。4、凝胶色谱法（尺寸排阻色谱法）：利用多孔性物质作固定相，因其对不同大小分子的排阻作用不同，因而渗透系数不同而进行分离的色谱法。只有液相凝胶色谱。5、电色谱法：利用带电物质在电场作用下移动速度不同进行分离的色谱法。三、色谱分离过程以分离A、B两组分的气-固吸附色谱为例：1、当试样由载气携带进入色谱柱与固定相接触时，被固定相吸附；色谱分离过程2、随着流动相的不断流入，被吸附的组分

7、又从固定相中脱附；3、脱附的组分随着载气向前移动时又再次被固定相吸附。4、随着载气的流动，吸附、脱附的过程反复地进行。在这个过程中，各组分与固定相间的吸附作用不同，因而吸附与脱附的速度和次序不同而产生微小的分离，随着载气的流动，吸附与脱附的过程反复进行，微小的分离被多次累加，最终达到分离。四、色谱法的特点色谱法是以其优越的分离能力为特点，它的分离效率远远高于其他分离技术如蒸馏、萃取、离心等方法。（1）分离效率高：复杂混合物，有机同系物、异构体、手性异构体。（2）灵敏度高：可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng