09-1绪论 (2)

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1、组织学与胚胎学(histologyandembryology)授课教师：邢文英E-mail：zupei@zzu.edu.cnxwy@zzu.edu.cn课时安排：理论：34学时(1～17周)实验：48学时(2～17周)（临床1、2小班：星期四上午7:40～9:50）（临床3、4小班：星期四上午9:50～12:00）考试方式：理论：70％实验：30％(平时10％＋标本考试20％）实验课准备：红蓝铅笔、黑铅笔、削笔刀直尺/三角尺、橡皮白大衣教材实习指导、作业本组织学绪论(histologyIntroduction)了解组织学的研究内容和意义熟悉组织学常用技术

2、的基本原理及应用目的与要求重点难点重点：1.HE染色方法、原理。2.电镜技术（2种）、组织化学术（3种）的基本原理及应用。难点：免疫组织化学术、原位杂交术的原理。一、组织学的研究内容和意义组织学（histology）：研究机体微细结构及其相关功能的科学。研究内容：细胞、组织、器官和系统组织（tissue）：细胞群+细胞外基质基本组织：上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织为什么学习组织学？哪个是不正常的？二、组织学技术简介（一）光镜技术（二）电镜技术（三）组织化学术（四）放射自显影术（五）图象分析术（六）细胞培养术和组织工程1.石蜡切片术:取材固定脱水透明

3、包埋切片染色封片2.冰冻切片、涂片、铺片、磨片等(一)光镜技术3.组织切片染色法HE染色：苏木精（hematoxylin）伊红（eosin）染色碱性染液将嗜碱性物质（本身酸性）染成蓝紫色细胞核中的染色质、细胞质中的核糖体酸性染液将嗜酸性物质（本身碱性）染成红色细胞质、细胞外基质成分（线粒体、溶酶体、胶原纤维等）嗜碱性:对于碱性染料亲和力强的性质嗜酸性:对于酸性染料亲和力强的性质中性:对于两种染料亲和力都不强的性质组织结构的嗜色性HE染色，垂体远侧部特殊染色法甲苯胺蓝染色示肥大细胞台盼蓝活体染色示巨噬细胞血涂片Wright染色（二）电镜技术分辨率：电镜(0

4、.2nm)、光镜(0.2μm)1.透射电镜术（TEM）（transmissionelectronmicroscopy）观察细胞内部结构戊二醛、锇酸双重固定→树脂包埋→超薄切片（50－80nm厚）→电子染色（醋酸铀、柠檬酸铅）根据电子束在不同结构上被散射程度的差异表现为电子密度高（黑或深灰色）和电子密度低（浅灰色）电子密度高电子密度低透射电镜结构图2.描电镜术(SEM)（scanningelectronmicroscopy)观察组织或细胞表面的立体结构，具有真实的立体感，无需制备切片。血细胞扫描电镜图(E红细胞G粒细胞L淋巴细胞M单核细胞P血小板)(三)组

5、织化学术(histochemistry)1.一般组织化学术原理：化学或物理反应原理应用：对组织或细胞内某种化学成分进行定性、定位、定量及相关功能的研究。PAS反应：过碘酸-Schiff反应(periodicacidSchiffreaction,PAS反应）：多糖/糖蛋白多糖醛紫红色沉淀氧化Schiff试剂HIO4PAS反应--肝糖原PAS反应--小肠上皮杯状细胞的黏原颗粒2.免疫组织化学术(immunohistochemistry)原理：抗原和抗体特异性结合应用：检测细胞、组织中的肽、蛋白质免疫组织化学原理模式图直接法间接法免疫组织化学（辣根过氧

6、化物酶标记）示胰岛B细胞呈胰岛素阳性3.原位杂交术(insitehybridization)核酸分子杂交组织化学术原理：用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针，与细胞内待测的核酸结合（杂交），然后通过对标记物的显示和检测，获知待测核酸的有无及相对量。应用：检测基因的有无（DNA片断）基因的活性（mRNA）原位杂交－－主动脉平滑肌细胞呈弹性蛋白mRNA阳性（四）放射自显影术（autoradigraphy）通过活细胞对放射性物质的特异性摄入以显示该细胞的功能状态或该物质在组织细胞内的代谢过程。放射自显影（3H标记的胸腺嘧啶核苷）↑幽门部胃小凹底的干细胞

7、（五）图像分析术（imageanalysis）应用数学和统计学原理对组织切片提供的平面图像进行分析，从而获得立体的组织和细胞内各种有形成分的数量、体积、表面积等参数。（六）细胞培养术和组织工程1.细胞培养术（cellculture）把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件下进行培养的技术。应用：研究细胞、组织的代谢、增殖、分化、形态和功能变化，各种理化因子对活细胞的影响。培养条件：适宜的营养、生长因子、pH值、渗透压、O2和CO2浓度、温度等，严防微生物污染。HeLa细胞相差显微镜图用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术，为器官缺损患者提供移植替代

8、物。正在构建组织器官的有皮肤、软骨、骨、肌腱、骨骼肌、血管、角膜等。2.组织工程