《环境微生物检测》PPT课件

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1、第11章环境微生物检测11.1空气中微生物的检测与控制11.1.1空气中微生物的检测方法(1)撞击法撞击法是采用撞击式空气微生物采样器，通过抽气动力作用，使空气通过狭缝或小孔而产生高速气流，使悬浮在空气中的带菌轮子撞击到转动的营养琼脂培养基平皿上。经37℃、48h培养，计算出每立方米空气中所含的细菌菌落数。(2)自然沉降法自然沉降法是靠重力的作用将空气中携带微生物的悬浮颗粒沉陷到直径9cm的营养琼脂培养基平皿上，经37℃，48h培养后计生长的细菌菌落数。由于沉降法是被动采样，会造成很大的误差。通过前苏联奥梅梁斯基公式换算出。通常设置5个采样点，即室内墙角对角线交

2、点为1个采样点，该交点与四墙角连续的中点为另外4个采样点。采样高度为1.2～1.5m。采样点心远离墙壁1m以上，并避开空调、门窗等空气流通处。检测点数越多越准确，以20～30个测点数为宜，最少测点数为5～6。(3)过滤法过滤法是在负压下抽滤空气，使空气通过经灭菌的微孔滤膜，空气中细菌被截留在膜上，然后将膜转移到培养基上，使滤膜与培养基完全贴紧，倒置于37℃恒温箱培养24h。通过计平板上的菌落数，测定空气中细菌的数量。空气中微生物总数目前用CFU／m3，计量。即每立方米空气落下的细菌数，一般以室内空气中细菌总数500－1000CFU／m3以作为空气污染指标。11.

3、1.2空气微生物污染的控制控制空气微生物污染，必须减少空气中微生物的来源，特别是微生物污染严重的医院，肉类加工等行业废水废物的处理消毒工作；搞好室内外环境卫生。减少微生物滋生；绿化造林也是净化市气、除尘、杀菌和吸收有害气体的重要途径；另外空气消毒和空气净化器对净化空气也起一定的作用。日本建议的评价空气清洁程度的标淮见表11.2水的微生物检测及控制11.2.1水质的细菌学检测我国《生活饮用水卫生标准》GB5749-85关于饮用水中的细菌标准与大肠菌群数量标准为1．细菌总数≤100个/ml2．大肠菌群≤3个/L一、伤寒杆菌病症：伤寒或副伤寒。表现：持续发烧，牵涉到淋

4、巴组织，脾脏肿大，躯干上出现红斑，胃肠壁溃疡产生腹泻。伤寒沙门氏菌二、痢疾杆菌痢疾杆菌可引起细菌性痢疾(与阿米巴痢疾不同)，症状为急性腹泻，通常大便中有血及粘液，某些病例中有发烧。三、霍乱弧菌病症：霍乱症状：轻型病例中，只造成腹泻。在较严重或较典型的病例中，除腹泻外，症状还包括呕吐、“米汤样”大便、腹疼和昏迷等。病程短，严重的常常在症状出现后12h内死亡。电镜照片使用的是结晶紫单染色，若革兰氏染色则为阴性红色四、寄生虫真菌一般通过接触传染，不通过水传播，引起疾病的原生动物和小型后生动物也由水传播，通常称为寄生虫。在目前发现的几千种原生动物中只有20种能引起人类疾

5、病传播方式：除了饮水不卫生外，更多的是通过食物以及昆虫血液传播如疟疾是蚊子传播，食用生肉感染肉类寄生虫等11.2.2水质指示微生物——大肠菌群大肠菌群是人肠道中正常的寄生菌，是一群需氧和兼性厌氧的，能在37℃，24h内使乳糖发酵产酸产气的革兰阴性无芽孢杆菌，又称总大肠菌群。大肠菌群作为水体被粪便污染的指标，也是饮水、食品等的细菌学常规检验指标之一，通常用“大肠菌群指数”和“大肠菌群值”表示。这些寄生菌通常与人体构成互利共生关系，当人体免疫力下降时，他们则有可能成为引起肠炎的致病菌，他们中的个别变种还会变为极具毒性的病菌。如大肠埃希氏菌可引起幼儿腹泻，引起美国和日

6、本传染病流行的O-157也是大肠埃希氏菌的变种菌株。中国水质标准中规定的大肠菌群数(个／L)饮用水≤3游泳池水≤100地表水第一级≤500第二级≤10000第三级≤5000011.2.2.1大肠菌群检测的目的和原理(一)生理习性与肠道病原菌类似，即在外界的生存时间基本一致；（代表性）(二)在粪便中的数量较多；（比病原菌多，不会漏检）(三)检验技术较简单;（操作方便）11.2.2.2大肠菌群的检测方法常用的大肠菌群的检测方法有多管发酵法与膜滤法。1．多管发酵法（即最大可能数法，MPN）发酵法是大肠菌群测定的国家标准方法。分为三步。A．初发酵目的：水中大肠菌群存在与

7、否的初步判断。A.初发酵方法为将水样置于糖类液体培养基中，在一定温度下，经一定时间培养后，观察有无酸和气体产生，即有无发酵，而初步确定有无大肠菌群存在。如采用含有葡萄糖或甘露醇的培养基，则包括副大肠杆菌；如不考虑副大肠杆菌，则用乳糖培养基。由于水中除大肠菌群外，还可能存在其它发酵糖类物质的细菌，所以培养后如发现气体和酸并不一定能肯定水中含有大肠菌群，还需根据这类细菌的其它特性进行下两阶段的检验。试验中的培养基中加入了酸碱指示剂紫色的溴甲酚紫，产酸时指示剂变黄，同时培养基中口朝下放置了装满同样培养基的小试管，产气时小试管中会封闭一段气体，被作为培养中是否产气的依据

8、。目的：鉴定产酸产气菌的