UPLC测定普洱茶饮料中咖啡因的含量

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1、检测与分析UPLC测料中咖啡因，孙玉侠，曹凤兰(天津天士力制药股份有限公司质检中心，天津300410)摘要：目的：使用UPLC快速测定普洱茶饮料中咖啡因的含量。方法：色谱柱为ACQUITYUPLCHSST3(50x2．1mm，1．8m)；流动相为甲醇一水(20：80)；流速为0．4ml／min；紫外检测波长为271rim。结果：该方法操作简便，测定准确，浓度的线性关系良好(r=-O．9999)，加样回收率为99．36％～100．06％(RSD=O．25％)。结论：该方法简单、快速、准确，结果令人满意。关键词：咖啡因；普洱茶饮料；UPLC；含量中图分类号：0657文

2、献标识码：Bdoi：10．3969／j．issn．1007—7871．2012．O1．010目前，在茶饮料市场中占主流地位的品种均醚、氯仿、二氯甲烷，能溶于乙醇、丙酮、醋酸为以红茶、绿茶、乌龙茶为原料，而以普洱茶为乙酯，难溶于乙醚和苯，熔点为235～237~C，白色原料生产的茶饮料则成为该行业中的全新领域。结晶粉末，无臭，味苦，有风化性。咖啡因结构普洱茶不但滋味醇厚回甘，具有独特的陈香味，中虽含有4个N原子，但受邻位羰基吸电子的影而且具有暖胃、减肥、降脂、降血压、抗衰老等响，呈弱碱性，其结构式如图1所示。功效，素有“减肥美容茶”之声誉。普洱茶中生物碱类成分主要包括

3、咖啡因、可可碱和茶碱，其中咖啡因占绝大部分llJ。咖啡因在生理上能刺激人体中枢神经系统引起兴奋，促进新陈代谢，加强肌肉收缩[21，可使人的头脑清醒，H有助于思维，并可促进血液循环，利于尿液排出，解除肌体疲劳，提高劳动效率。Jlt：~'b，咖啡因能增强心脏和胃肠道功能、调节脂肪代谢，同时还图1咖啡因的分子结构式可起到解毒的功效闭。。2仪器与试药2茶饮料是-g-见的饮品，不同品牌不同原料的茶饮料中咖啡因的含量也不同，口感上也不同，2．1仪器所以对茶饮料中含有的咖啡因进行测定是非常必UPLC超高效液相色谱仪：美国沃特世公司；要1~[41。Empower2色谱工作站；Mi

4、lli—Q超纯水器；AS3120A超声波清洗器：天津奥特赛恩斯仪器有限1叻II啡因的性质、结构公司。咖啡因亦称咖啡碱，是一种甲基黄嘌呤，属2．2试剂生物碱类物质，化学名称为1，3，7一三甲基一甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯；咖啡3，7～二氢一1H一嘌呤一2，6一二酮水合物，化学式因对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号：cHoN0，相对分-T-质量为194．2，易溶于水、乙171215-200608)[收稿日期】2011-05—19【作者简介】张毅(1980一)，男，汉族，天津人，硕士，现任天津天士力制药股份有限公司质检中心保健品岗主管，主要从事药品及保健品贡

5、量控制及标准研究工作。[通讯作者】曹凤兰(1956一)，女，汉族，天津人，主任药师，现任天津天士力制药股份有限公司质检中心总监，主要从事药品质量控制及管里工作。表明方法精密度良好。4讨论3．4．4重复性试验取同一批样品6份，按照“供试品溶液的制备”4．1色谱条件的优化项下操作，结果咖啡因含量为58．45mg／听，RSD=本方法的主要目的是建立普洱茶饮料中咖啡0．59％，表明该方法重复性良好。因含量的快速检测方法，故采用了美国沃特世3．4．5稳定性试验(Waters)公司的超高效液相色谱仪(UPLC)开发该分别取同一对照品溶液和供试品溶液，按照方法，试验表明该方法仅

6、需12min即可完成分析，上述条件分别于0、1、2、4、6、12、24h各进样且方便、准确。2l，记录色谱图，结果咖啡因峰面积RSD分别为通过选择比较不同的流动相系统，发现甲醇一0．78％、1．13％，表明对照品溶液和供试品溶液在水系统能够很好的分离咖啡因，且经过不同的流24h内稳定性良好。动相配比选择，本方法最终选择了甲醇一水(20：80)3．4．6准确度试验作为流动相。取“重复性试验”项下样品6份，分别添加一4．2结果讨论定量的咖啡因对照品，按“供试品溶液制备”项下操本文对市售普洱型茶饮料和其它较常见的茶作，按上述色谱条件进样，结果见表1。饮料中咖啡因的含量进

7、行了测定，发现普洱茶饮表1准确度试验结果(n=6)料中叻U啡因含量略高于其他常见市售茶饮料。同时也发现以乌龙茶为原料乌龙茶饮料中咖啡因含量与以普洱茶为原料的普洱纯茶饮料较为接近，这可能是由于原料不同，造成不同茶饮料中咖啡因含量各异。参考文献⋯1向胜沅，李觅路，龚志华，等．茶叶保健机理及其产物开发展望『J1．茶叶通讯，2001(4)：20～23．f2]陈莹，魏尔清．中枢兴奋药咖啡因的再评价【J】．国外医学：生理3．5咖啡因含量测定结果病理科学与临床分册，1997，17(4)：375～378．按“供试品溶液制备”项下操作，制成供试品【3】赵卫星，姜红波，冯国栋．茶叶中

8、咖啡因的提