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时间:2019-05-10
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1、哺乳动物的克隆Fromtheskincells第八章动物细胞工程实践之Ⅴ本章主要内容8.1动物克隆技术发展简史与意义克隆“多莉”羊的具体操作过程“多莉”羊独特点及成功的根本原因克隆人胚胎引发争议克隆技术未来的发展8.3体细胞克隆动物胚胎分割法细胞核移植技术的原理与方法8.2产生遗传相同个体(克隆)的原理与方法简史、克隆动物研究意义克隆定义克隆(clone)的音译,原意指用于扦插的枝条,也即无性繁殖。1963年Haldane最先使用“clone”,至世纪70~80年代,克隆一词开始广泛使用。遗传学定义的“克隆”:指遗传上完全相同的分子、细胞或来自同一祖先的生物个体,通过无性繁
2、殖而形成的群体。在不发生突变的情况下,它们具有相同的遗传结构。“克隆”分为分子克隆、细胞克隆和个体克隆三个层面。在分子层次上,---“分子克隆”。将DNA片段插到一个载体中,在宿主细胞中自我复制。在细胞层次上,---单克隆抗体。指由一个单一的共同祖先细胞所形成的一个细胞“群体”。在个体层次上,克隆是指基因型完全相同的2个或更多个体组成一个“群体”。1997年,世界卫生组织(WHO)解释克隆:克隆为遗传上同一的机体或细胞系(株)的无性繁殖。8.1动物克隆技术发展简史与意义8.1.1简史由“胚胎分割”开始。1978年,建立了卵裂球分离和桑葚胚分离技术。之后对胚胎分割程序简化和提
3、高胚胎分割效率研究;现已发展到不依赖于显微操作,而在实体显微镜下操作的胚胎分割。在胚胎分割基础上,开始“细胞核移植”研究。“细胞核移植”才是技术含量最高的动物克隆。1938年,Spemann提出以核移植生产克隆动物的设想开始,1952年,产生了世界上第一种克隆动物-非洲豹蛙;1963年,我国胚胎学家于克隆出亚洲鲤鱼;1997年Wilmut等利用成体细胞核移植技术获得克隆绵羊“Dolly”,在动物克隆研究领域取得了重大突破。迄今为止,动物克隆在各国如火如荼,成功克隆的动物有20余种,包括鱼、羊(绵、山羊)、老鼠、猫、狗、牛、马、兔子、骡子、猪、狼、猕猴等。动物克隆的里程碑事件
4、:20余种克隆动物大盘点1鲤鱼童第周早在1963年就通过将一只雄性鲤鱼的遗传物质注入雌性鲤鱼的卵中从而成功克隆了一只雌性鲤鱼。2克隆羊1996年7月5日,世界上第一头由成年羊体细胞经过无性繁殖生成的克隆羊多莉诞生3、克隆老鼠Cumulina1997年,夏威夷科学家从成年小老鼠的细胞复制出第一只克隆小老鼠,名叫Cumulina。4、克隆奶牛日本石川县家畜研究中心在世界上率先从体细胞复制牛,首两头克隆牛分别名为“KAGA-号”和“NOTO一号”5、克隆山羊世界上第一批三只克隆山羊已由美国一家生物公司于1998年“制造”出来。克隆山羊Mira和她的姐妹们都来自美国的实验室,它们生
5、产含有人类抗凝血酶-3(antithrombinlll)的羊奶。6、首个克隆猪英国产生克隆绵羊“多莉”的公司,在美国的分部成功地产生了5头克隆猪。图8-5耳上皮细胞克隆羊”阳阳”左和其原型”青青”出自:西北农林科技大学张涌等,2000.6.22图8-6“阳阳”5岁生日及其后代,四世同堂,当上太姥姥证明了第一代克隆羊及其后代都具有正常的生育能力.7、克隆摩弗伦羊摩弗伦羊(又称欧洲盘羊)是一种濒危物种,全世界所存野生盘羊不足一千只,2000年,科学家从两头分别死亡将近18小时和24小时的雌盘羊卵巢内取出DNA,将其注入盘羊的“近亲”――普通白羊的去核卵细胞内,155天后正常的产
6、下一只小盘羊。首次把克隆技术应用于一种濒临灭绝的哺乳类动物身上。8、克隆猕猴2000年1月,一只克隆猕猴在美国俄勒冈地区灵长类动物研究中心呱呱坠地。这是全世界第一次成功地克隆灵长类动物———在基因上与人类最接近的动物。9、克隆野牛2001年1月8日,这只名叫“诺亚”的印度野牛(濒危野生动物)在美国爱荷华州诞生,体重80磅。只活了一天。10、克隆兔2001年,体细胞克隆兔诞生。出自:山东莱阳农学院教授董亚娟,柏学进等,2001.12美科学家进行商业猫克隆售价5万美元的克隆猫小尼基和它的主人Openingthewaytoreplicatingpetsandothervalued
7、animals11、克隆猫CC美国得克萨斯农工大学于2001年培育的第一只克隆猫CC。12、克隆老鼠“拉尔夫”大老鼠难以复制,2002年复制的名为“拉尔夫(Ralph)”的老鼠是第一只。13、克隆骡子2003年5月5日,一头名为“IdahoGem”的骡子在母驴子宫中经过346天的正常妊娠期后降生。克隆骡子:“爱达荷宝石”2003年5月29日,美国科学家宣布克隆了一头骡子,为世界范围内第一次克隆出马科动物,也是克隆杂种动物的首次成功尝试。方法:从骡子胚胎细胞核内提取DNA(脱氧核糖核酸),将其与去核的马卵母细胞细胞结
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