冷冻干燥法保存精子超微结构的研究

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1、青岛大学硕士学位论文冷冻干燥法保存精子超微结构的研究姓名：刘明申请学位级别：硕士专业：外科学（泌尿外科）指导教师：王新生20080531冷冻干燥法保存精子超微结构的研究摘要目的研究冷冻干燥法保存人类精子前后超微结构的变化。方法取健康志愿者合格精液50份，平均分为5组，其中3组分别加入不同的冻干保护剂(ETBS；ETBS+海藻糖；ETBS+海藻糖+蛋黄)后给予冷冻干燥处理，在4℃冰箱中保存3周；第4组经液氮程序降温法冷冻保存4周；第5组作为新鲜精液对照组。冷冻干燥组、液氮组复水后和对照组在扫描电镜下观察超微结构。结果ETBS、ETBS+海藻糖

2、、ETBS+海藻糖+蛋黄组，液氮冷冻组和新鲜对照组中『F常精子比例分别为(46．39±1．46)％、(55．75±1．29)％、(67．20±1．8)％、(63．16±2．63)％、(85．94±1．86)％。对照组精子活动率为70．7i％±7．596，ETBS组为21．74％±3．2％，ETBS+海藻糖为32．15％±5．19％，ETBS+海藻糖+蛋黄组为40．52％±2．86％，液氮冷冻组为35．12％4-4：37％。后四组与对照组差异有显著性P

3、精子经冷冻干燥保存后，超微结构损伤较其他组均轻。关键词：冷冻干燥；人精子；超微结构硕士研究生：刘明导师：王新生教授Thestudyonultrastructureoffreeze—driedspermatozoaAbstractObjectivesToinvestigatetheultrastructuredifferentsofspermbetweenandafterfreeze-drying．MethodsHealthyspermwasdividedintofivegroups．Group1wasacontrolgroup；ETBSwa

4、saddedingroupII；ETBSandtrehalosewasaddedingroupIII；meanwhile，ETBS+trehalose+eggyolkwasaddedingroupIV．GroupVwasfi'eezedwithProcedurefreezingmethod．．Afterfourweeks，allfivegroupswereobservedbyscanningelectronmicroscope．Resultsnormal’spermratioinfivegroupswere(46．39士1．46)％、(55

5、．75．士1．29)％、(67．20士1．8)％、(63．16-士2．63)％、(85．944-1．86)％．andtheactivityratiooffivegroupswere70．71％士7．5％，21．74％+3．2％，32．150／社5．19％，40．520／社2．86％。35．120／硅4．37％。p<0．05ConclusionsAfterfreeze-drying，thespermgroupwithETBS+trehalose+eggyolkhadlittleultrastructuredamage．Postgraduate

6、：LiuMingUrologyDirectedbyProfiWangXinshengKeywords：freeze·drying；humanspermatozoa；ultrastructure学位论文独创性声明本人声明，所呈交的学位论文系本人在导师指导下独立完成的研究成果。文中依法引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。本人如违反上述声明，愿意承担由此引发的一切责任和后果。论文作者签名：易7稠同期：办年歹月y同学位论文知识产权权属声明本人

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8、长期保存精子的常规方法是深低温保存，但深低温保存仍然存在需要长期使用液氮和低温保存设备、而且运输困难等缺点。冷冻干燥保存法由于样品能在室温中长期保存的特点，有助于更多物种在简单条