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1、第2卷第3期广州大学学报(自然科学版)Vol.2No132003年6月JournalofGuangzhouUniversity(NaturalScienceEdition)June2003文章编号:1671-4229(2003)03-0224-04水稻纹枯病菌人工接种方法的研究1323易润华,朱西儒,周而勋(1.中国科学院华南植物研究所,广东广州510650;2.广州大学生物与化学工程学院,广东广州510405;3.华南农业大学资源与环境学院,广东广州510642)摘要:对水稻纹枯病菌(RhizoctoniasolaniAG-1IA)7种人工接种方法进行试验,首次评价了各自优
2、缺点.结果认为“:稻秆离体接种法”是比较理想的人工方法,其特点是快速、简便、发病速度适中、病情调查方便,病原菌容易控制.其次是盆栽苗接种法、叶片离体接种法,菌丝悬浮液较差.关键词:水稻;丝核菌;接种方法;评估中图分类号:S435文献标识码:A[1~3]水稻纹枯病是危害水稻的一种重要病害,3个分蘖后,将带菌的稻壳均匀撒到盆中,每盆控对该病研究越来越多,迄今没有发现抗纹枯病的抗制相同的接种量,保持相对稳定的温湿度.接种20[4,5]源材料,使抗病品种的利用受到了很大限制.d后调查病情.病情严重程度,按病斑大小,占水稻目前,水稻纹枯病抗性鉴定没有一套比较标准茎秆周长的百分数,分为0
3、~9级.即:10%以下为0[2,4]的方法,影响了育种工作的进展.虽然许多学级、10%~20%为1级,依此类推,90%以上为9级者对水稻的抗性、病原菌的致病性进行了研究,所记载.使用的接种方法、病情评价标准均不相同,各有优1.2.2盆栽幼苗接种缺点,但很难比较品种抗性差异,以及菌株致病力将水稻播种在盆中,待苗长到4~5cm高时,强弱.将菌核研磨成粉末状,用无菌水溶解稀释后倒入盆本研究为选出一种快速、操作简单、发病速度中,轻轻震荡,使纹枯病菌在盆中均匀分布.接种适中的方法,用于水稻纹枯病菌菌株的致病性测后,仍然在室温下培养,观察发病情况.7d后调查定,水稻品种抗性的鉴定.试验了
4、7种人工接种方发病情况,评价病情严重程度按1.2.1记录评价.法,首次进行对比和评价.1.2.3牙签嵌入接种在抽穗期将水稻植株从田间移入盆中,将经接1材料与方法菌培养的长2cm左右木制短牙签嵌入植株的叶鞘内侧,然后,将水稻叶片喷湿,在常温下观察病情发1.1材料展.15d后调查发病情况.病情严重程度按1.2.1供试材料:采用4个抗病性差异明显的品种,记录评价.即:Tetep、金刚30、汕优63、IR64.1.2.4瓶内扦插接种供试菌株:从具有典型症状的水稻病株上分将纹枯病菌接种到装有PDA(马铃薯洋菜葡萄[2]离、纯化而得到.糖)培养基的组培瓶中,待菌丝长满培养基表面后,1.2
5、接种方法均匀插入经表面消毒5cm长的稻秆,插入后在室1.2.1盆栽成苗接种温下继续培养,观察发病情况.每个组培瓶插5根将水稻不同品种分别栽到盆中,每盆栽10个稻秆,每个菌株重复3次.7d后调查发病情况,病单株,保持每盆的水肥条件一致.单株水稻长到2~情严重程度按1.2.1评价.收稿日期:2002-09-05;修回日期:2003-02-20基金项目:国家自然科学基金资助项目(39870438)作者简介:易润华(1971-),男,博士,主要从事水稻、板栗等植物病害研究.3通讯作者.第3期易润华等:水稻纹枯病菌人工接种方法的研究2251.2.5叶片离体接种150rpm条件下培养6~
6、7d.取出菌丝,用无菌水漂选取水稻田间剑叶,放在湿纱布上,将相同大洗1~2次,将菌丝磨碎,菌丝段平均长度范围为小经活化的菌丝块,接种到叶片的中部.接种后,上0.2~0.5cm.加无菌水制成菌丝悬浮液,用喷雾器面再盖一层湿纱布,在室温(25℃~28℃)下培养,均匀地喷洒在水稻叶片上.每个处理接种相同量的观察发病情况.每个菌株接种三片叶.3d后调查菌丝,每个菌株重复试验3次.发病情况,病情严重程度按1.2.1记录评价.1.2.6稻秆离体接种2结果与分析将水稻茎秆叶片剪除,放在湿润纱布上,将相同大小经活化的菌丝块,贴在茎秆的表面.然后,在2.17种人工接种方法比较如上所述条件下,调
7、查发病情况,记录病情严重程结果表明:除“菌丝悬浮液喷洒接种法”没有发度,方法同前.每个菌株重复试验3次,按1.2.1记病现象外,其余6种方法都可以使菌株对水稻品种录评价.产生典型的纹枯病症状,菌株间表现出致病力差1.2.7菌丝悬浮液喷洒接种异.接种后,4个品种都感染纹枯病,但是发病程度在抽穗期,将水稻从田间移入盆中.将菌株接不一样.总的来说,Tetep发病比其他3个品种轻种到装有PDA培养基的三角瓶内,在25℃~28℃、(结果见表1).表1不同人工接种方法对水稻品种的致病结果Table1Resultso