电晕放电介导大豆DNA转化羊柴的初步研究

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1、内蒙古人学硕士毕业论文电晕放电介导大豆DNA转化羊柴的初步研究摘要羊柴是我国特有的优良牧草之一，也是防风固沙，改良土壤，改变小气候，改善自然生态环境的优良物种。利用基因工程对羊柴进行遗传改良具有重要的实践意义。目前如何建立一种有效、稳定的组织培养体系和转化系统，已成为羊柴分子生物学研究和基因工程研究的关键技术。本试验依据电晕放电的发生原理设计了阵列式多针对板负电晕发生装置，并详细研究了不同影响因素与电晕放电特性间的关系。针尖间距越大，电晕电流越大，当针尖间距大于20mm时，电晕放电输出功率增长趋缓，在针尖间距为

2、20ram处，电晕放电可稳定输出相对较高功率。针板间距越小，电晕电流越大，在针板间距为25mm结构下，电晕放电具有最大可输出功率。在电晕放电处理羊柴愈伤组织的试验中发现，电晕放电对愈伤组织存活率有一定影响，并对电晕放电处理后的愈伤组织进行了失水率、愈伤组织重量增长率的统计以及细胞存活力的测定，确定了愈伤组织的转化实验条件为：外施电压14kv下120min的电晕放电处理以及15kv下90min的电晕放电处理。通过实际转化实验，经组织化学检测和卡那霉素抗性筛选得到抗性愈伤组织转化体，对转化体的PCR检测结果表明，筛

3、选出的愈伤组织能够扩增出与阳性对照相同的1520bpGy3亚基cDNA基因片段，初步证明大豆基因已经转入羊柴基因组中。关键词：电晕放电，介导转化，植物转基因，羊柴内蒙古大学硕士毕业论文TRANSFO刚MINGSOYBEANGENEINTOMEDIATEDBYNEGATIVECORONADISCHARGEABSTRACTHedysarummongolicumisoneofthepeculiargrazinginChina．Itisoneofgoodmaterialswhichcanbeusedinchecking

4、windsandfixingdriftingsand，especiallyinimprovingthesoil，changingthelocalconditionsandimprovingthenaturalecologicalenvironment．UtilizinggeneticengineeringtoimproveheredityofHedysarummongolicumhasbecomeanimportantpracticemeanings．Establishinganeffective，steady

5、systemoftissuecultureandtransformsystemhavebecomemoreimportantinmolecularbiologicalstudyandakeytechnologyofgeneticengineeringofHedysarummongolicuminrecentyears．Inthispaper,wedesignandmaketheMulti-needletoPlateEquipmentusedforNegativeCoronaDischarge，anddorese

6、archintotherelationbetweendifferentinfluencingfactorsandthecharacteristicsofcoronadischarge．Meanwhile，thedischargecurrentincreasewithincreaseofspacebetweenneedletoneedle，andthespeedofthedischarge—power’augmentationbecometardyaswellasthespacebetweenneedletone

7、edleismorethan20mm．Consideringthestabilityanddeferentpower,20mmspacebetweenneedletoneedleissuggested．Inaddition，thedischargecurrentincreasewithreductionofspacebetweenneedletoplane，andthedeferentpowerofcoronadischargeisuptoitsmaximumwhenthespaceisabout25ram．T

8、heexperimentabouttheeffectsoncallustreatingwithcoronadischargeshowthatcoronadischargehascertaininfluence011survivalrateofcallus．BasedOiltheresultofstatingthewaterloserates，weightincreaseratesand