绢丝昆虫野桑蚕与柳蚕卵黄原蛋白的研究

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1、中文摘要本论文包括两部分主要内容。第一部分是野桑灏卵黄原蛋白的鉴定与cDNA序列鲍分撰，以及襄黄鳃放憋硬究。利用SDs—PAGE襄Wostefnblo瞧ng熬方法分析鉴定了野桑蚕卵黄原蛋白是由大小两个亚基组成，根据分子量marker得出分子量分嗣为175kD帮42蠡D。对不同整嗣稻不藏时期野黎蚕盎滚瀚sDS+淞GE分析滥明了，野桑蚕卵黄原嚣白存在性别、时期的特异性。通过对孵桑蚕吐丝期开始至第5同的雌体脂肪体总RNA的含量进行了比较得出，从吐丝期开始割第5只逐濒递蜷，与黪桑蚕蛉廒渡中熙黄原蛋囱懿含爨蛉变化是一致魍。剥崩昆虫卵黄原蛋白进化上的保

2、守憾，根据家蚕的VgcDNA序列设计4对特异性引物在鹭豢蚕翁总斟A逡零亍露pCR季广增，分鬟鬻翻了4条10∞bp左右静eDNA片段；对于3’．end和5’一end进行RAcE扩增，分别得到了2条looObp左右的cDNA片段，根据cDNA片段的重复性，从而解析黯j野桑鲞卵黄原骚白cDNA全序列。该序列含有5754碱基，走一令oRF维残，缡鹃17鹳个氨基酸，努黄原蛋白兹氨基酸序列和cDNA序列与家蚕的同源性分别为97，6％和98．1％。含有特定的酶镯识翻结构RSRR，努黄藩鬃自静体被酶韬为大小两个亚鏊，根据氨綦酸捺算静相对分子质量分别为161

3、．57lkD和40．794kD，如果考虑到翻译后的修饰，这与sDS．P_AGE的结果魑吻合的。该序列含有一个多聚丝氨酸区。出现在切割位点后弱17氨基酸处，DGQR穰GlCG分别出残在第158l莘爨1597氨基骏处，C求蠛含脊6个保守的半胱氨酸。根据已缀解析的18种昆虫卵黄原蛋白的氯基酸序列褥逡了系统树，结栗涯疆了跷虫郛黄原蛋自的一缀绐构在进纯上其商缀好的保守性，尤其是5种绢熊昆虫卵黄原蛋白。它们的氨基黢序列阍源性与RAPD分栀的结果是一致的。通过家蚕与野桑蚕卵的内容物的SDs．PAGE，分析了野桑蚕卵黄蛋自主要有露黄磷蛋叁(V攮)，舞难冥性

4、爨鑫(毯韶)霹30K蛋鑫缝残。遥过Native—PAGE分析推定了野桑蚕卵黄原蛋白在天然状态下的分子量约为440kD。第二部分是襁蚕生物攀特注以及舜黄原蛋白的签定。柳蚕(爿cf。瓣∞f跚PH曲flor)是吐丝结茧的经济鼹虫之～，属鳞翅目，大蚕蛾科，国内外对其耀关的研究较少，作为一种好生绢丝昆虫，对其研究具有很熏要的意义。本文通过嶷内饲养的方法，观察了柳蚕的生物学特性，在台肥地区幼虫四眠五龄，二化性，蛹滞育，全龄期达40d以上。通过扫描电子显微镜观察了柳蚕卵孔的显微特征，对其形态进行了描述，并与其它野蚕进行了比较。邋过SDS．PAGE积Wes

5、te融blo拄搬g鉴定了樱蚕趵露黄魇蛋岛是

6、薹!l大小两个甄基缀残，分子蘩分搿为{75kD和45kD，存在缝织、时期、性剽表达的差异性。关键词：野桑蚕柳蚕鳃黄愿蛋白鉴定c￡噬焱序列分析生物学特性ABSTRACTThismes强con墩ins{wom菇ofpartsThe螽rstpartis也eresearchofidenti6cationofvitellogeninandanalysisofitscDNAsequenco，andrese鲫chofcompositionofyolkprotei诖遮丑om妞r掰删妇r加口M∞re．Th嚣la塔e

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9、【worms．Sovefalprimersa∞designedaccordingtocDNAsequenceofViteliogenin证0D掰如wmoriandconserVatismofinsectVitellogenins．ThecDNAsequenceofvitellogeninin嚣聊l龟垮抛勰妇巍gisobt蠢ned

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