高尔夫球场狗牙根叶斑病病原学的研究

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1、华中农业大学硕士学位论文高尔夫球场狗牙根叶斑病病原学的研究姓名：房宽锋申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：黄俊斌20060601华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文乃如需保密，解密时间年月日是否保密独创性声明经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位啾毖易鬼希帆沙6年易月卅日J糊黼张力研獬名：裴删签名日期：砷自月W日。签名日期：7咿埠‘月矽日注：请将本表直接装订在学位论文的扉页和目录之间商尔夫球场狗牙根叶斑病病原学的研究摘要狗牙根草坪叶斑病是发生在高尔夫球场上的一种重要病害。2

2、003．2005年，从湖北省武汉市金银湖高尔夫球场与红莲湖高尔夫球场上采集狗牙根草叶斑病标本。对叶部病斑进行组织分离，并将分离的菌株进行单孢纯化和致病性测定。对致病菌株进行了形态学与分子鉴定、生物学特性研究以及对四种草坪草的侵染过程观察，研究结果如下。L形态学鉴定的结果表明该菌株为澳大利亚平脐蠕孢(aipolarisaustraliensis)。核糖体内转录间隔区(rDNA．n's)序列测定的结果表明，该菌株与GenBank中登陆号为AY923860的澳大利亚旋孢腔菌(Cochliobolusaustraliensis)序列同源

3、性达到99．61％。2．致病性测定结果表明，菌丝块接种及孢子悬浮液接种均能使健康植株叶片出现圆形或者不规则形褐色病斑，而且从病斑边缘病健交界处又重新分离到该病原菌。综合致病性测定和形态学及分子鉴定结果，确认该病病原为口功D肠恼australiensis，这是中国关于澳大利亚平脐蠕孢在高尔夫球场狗牙根草坪草上引起叶斑病的首次报道。3．寄主范围测定结果表明，小麦、水稻、玉米、早熟禾、日本结缕草、高羊茅、黑麦草、匍匐剪股颖均为澳大利亚平脐蠕孢的寄主。4．生物学特性研究结果表明，病原菌在15．35℃温度范围内都能够产孢，以20．30℃最

4、为适宜。在10—30℃范围内随着温度的升高，产孢量逐渐增加，到30。C产孢量达到高峰。适合菌丝体生长的温度为15．38℃，以25．35℃最为适宜。40℃茵丝停止生长。pH值在2．76-10．75范围内菌丝体均能生长，其中以4．84培．65最为适宜。在pH值在2．76．10．75范围内均可产孢，其中产孢最适宜pH值范围为4．84．6．41，偏酸性条件下有利于产孢。在供试的7种碳源中，以甘露醇和乳糖菌丝体生长势最好，以麦芽糖菌丝长势最差。产孢量则以乳糖为最高，以蔗糖最低。在供试的7种氮源之中，NaN03最有利于菌丝生长，而菌丝体利用

5、蛋白胨和甘氨酸效果最差。含KN03培养基产孢量最高，含蛋白胨培养基产孢量最低。PDA平板毒力测定结果表明，10％多氧霉素B粉剂、25％阿米西达乳油、80％代森锰锌粉剂、50％克菌丹粉剂、50％多菌灵粉剂、30％爱苗乳油、10％世高颗粒剂，其EC50依次为5912．965／zg／ml、1135．283,ug／ml、21．33029ug／ml、18．24744／zg／ml、9．646即g／m1、1．148368,ug／ml、0．526344．ug／ml。其中10％世高颗粒剂抑菌效果最好，10％多氧霉素B粉剂抑菌效果最差。5．将浓度为

6、5xl旷个孢子／ml澳大利亚平脐蠕孢分生孢子悬浮液喷施于生长20d左右的杂交狗牙根、高羊茅、早熟禾、黑麦草、早熟禾等几种草坪草活体叶片上，华中农业大学2006届硕士学位论文在23～25℃，Rh=95％条件下抚育。接种后不同时间点取样，对样品进行组织透明、染色，观察病原菌对寄主植物的侵染过程。结果表明，在四种寄主上接种后3h内可以观察到分生孢子的萌发，6h之内可以观察到附着胞的形成，在24h之内在四种寄主上观察到侵染菌丝。接种6h后，分生孢子萌发百分率在杂交狗牙根叶片上与其他寄主叶片上具有显著性的差异。接种12h后，叶片表面附着胞

7、的形成百分率在四种寄主间有显著性的差异。接种后48h，狗牙根与其它寄主相比，表皮细胞侵染菌丝形成百分率具有显著性差异。关键词：病原鉴定；澳大利亚平脐蠕孢；致病性测定；生物学特性；病菌侵染过程2-，11，1．i；；高尔夫球场狗牙根叶斑病病原学的研究AbstractCynodonleafspotisallimportantdiseaseingolfCourses．1nhesamplesiscollectedfromWuhanGold··SilverLakegolfCourseandE·-zhouRedLotusLakegolfcou

8、rsefrom2003to2005．Thepathogenwasisolatedfromtheleafspotandtheisolatewerepurifiedbysinglesporingapproaches．AndthenPathogenicitytests