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1、32草 业 科 学18卷 2期4ö2001PRATACULTURALSCIENCEVol.18,No.2狗牙根抗寒性测定技术熊 曦,吴彦奇,李 西(四川农业大学动物科技学院,四川雅安625014)摘要:总结狗牙根抗寒性测定技术的原理和方法,并对其进行评价。关键词:狗牙根;抗寒性;测定技术中图分类号:S543.903.4 文献标识码:A 文章编号:100120629(2001)0220032204X 狗牙根(Cynodondactylon)是暖季型草部位并烘干称重(有的需回收3次才能耗尽[1]坪草中最重要的草种之一,被广泛应用于贮备的碳水化合物量)。比较总干重的差异从[2][8
2、]全球温暖气候区,具有极大的生态及经济而得出抗寒性的高低。本方法是最早运用价值。其最适生长温度为26～32℃,气温低的狗牙根抗寒性实验室评价方法,具有操作[3]于15℃时即停止生长。在低温胁迫下,外简便,准确度高的优点,不足之处在于所花的部表现为叶片萎焉,卷曲,叶色变褐,最终整时间较长。[4]株干枯死亡,导致狗牙根草坪的绿期变短,1.2 冰冻再生长法 根据狗牙根在冰冻处成为狗牙根应用的最大限制性因素。而不同理后适宜条件(温室或生长箱)下恢复生长的品种的狗牙根表现出的抗寒性亦有不最低温度,确定其抗寒性强弱。具体操作从[5～7]同,因而狗牙根抗寒性的测定成为应用11月到次年5月每
3、隔1月从田间小区中取和进一步研究的基础。近40年来,国外学者样(直径10cm,高10cm)。用预先冷却到4从狗牙根的群体、个体、器官的生态学和形态℃的水浇灌样品土壤到饱和状态,再用铝箔学出发,采用了不同方法测定狗牙根的抗寒包裹起来。用铜—康铜合金热电偶插入样品性,这些方法大致可以分为以下三类。表土下2cm深的土壤中心监测温度。样品迅1生长恢复实验速放入-3℃下过夜,15h后每隔1h温度1.1暗室再生长法 狗牙根的冬季存活率下降1℃。当土壤温度在预定温度的±0.1与根和地下部分的碳水化合物储备量有密切℃内时,每隔1℃取出样品。如将Tifton44关系。根据这一原理通过收集到的地
4、上部总置于-4～-10℃7个温度下,Gordon’s量,间接的比较出草皮根层碳水化合物储备Gift置于-8～-14℃7个温度下,而后放在量,从而简便的鉴定不同狗牙根的抗寒性差4℃下过夜,一般需超过14h的解冻过程。异。本方法是测量草皮根层碳水化合物贮备解冻后,连续8周每周目测植物的再生长情量的最方便的方法之一。具体操作为入冬以况。得到的数据即为LST(最低存活温度),后从小区中取出同样规格的草皮块,修整成即再生长的最低温度。在大多数情况下,如果同等的重量后,浇足水(达总持水量的经预定的目标温度后没有观察到再生长的发60%),放入保持生长适宜温度的暗室,需要时补充水分到固定的重
5、量(在必要时可施用X收稿日期:2000207203作者简介:熊曦(19752),女,四川乐山人,四川农业杀真菌剂),每月回收一次新长出的(失绿的)大学草业科学系九八级在读硕士研究生。4ö2001PRATACULTURALSCIENCE(Vol.18,No.2)33生,则在更低的温度下也不会有再生长的发酶从叶片残渣中提取出来并水解。所有提取生。如果在一组重复中,一个品种的再生长温物待与对羟基苯甲酸肼反应后,以葡萄糖作度是不连续的,则最低的温度应是无再生长参比液比色,从而确定TNC含量。此方法的温度之前的那个温度。例如,经低温处理后一优点在于能定量的研究狗牙根抗寒性的差个品种的再
6、生长温度是-3、-4、-5和-7异,但目前仍有部分学者对这一方法的准确[9～11]℃,则这个重复的LST是-5℃。此方性持保留态度。法较为可靠,也是植物抗寒性测定所采用的2.3GC(色层层析)法 狗牙根在冷驯化末普遍方法。期膜脂脂肪酸的不饱和度相应增加,抗寒性2测定理化指标强的品种这种变化尤其明显。因而测定脂肪2.1PAGE凝胶电泳法 可溶性蛋白质在酸在冷驯化前后的变化即可鉴定一个品种抗狗牙根抗寒性锻炼中的变化相当明显,这与寒性的强弱。这种实验方法应用皂化反应原[9,12][18,19]通常认为的抗寒性理论是一致的。抗寒理,采用气体色层层析法分析,较为可锻炼期间可溶性蛋白含量
7、的增加,既可能有靠。新的合成,也可能从膜上或其它的结合形式2.4SEM(电子显微镜扫描)法 狗牙根在中降解释放。而最近的实验还表明,狗牙根在低温胁迫下,叶绿体解体或变形,从而导致光冷驯化期间合成了新的蛋白质,它们参与了合能力下降,而抗寒性高的草种在同样处理[13～15]抗冻性的发育过程。因而抗寒性有差异下却不发生此情况。因而用电镜观察叶绿体的不同品种狗牙根在抗寒锻炼末期电泳图谱的结构完好与否也能鉴定狗牙根抗寒性的高上表现出条带数和条带强弱都有差异。此方低,不足之处在于难以进行定量的研究,只能[20]法准
