番红花产量构成因子分析及离体再生体系研究

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1、浙江大学硕士学位论文番红花产量构成因子分析及离体再生体系研究姓名：邹凤莲申请学位级别：硕士专业：蔬菜学指导教师：卢钢;汪志平20050601摘要番红花(CrocussativusL．)，是鸢尾科番红花属多年生地下球茎植物，通过母球茎形成子球茎进行无性繁殖。因其柱头是一种贵重香精，在欧洲已有几百年的种植历史。近年来众多研究与临床实践表明，番红花素、番红花酸和番红花醛等多种番红花特有的成分，除了具有传统的活血化瘀、调经止痛等药用价值外，还具有高效的抗肿瘤、防癌、抗氧化、抗诱变等多种生理活性功效，是近年来国内外研

2、究的热点。以传统方式种植，球茎繁殖系数低，花柱产量低且采收耗时费工、劳动强度大，价格昂贵，柱头和球茎产量都满足不了市场需求。本论文在对番红花生长发育生物学研究的同时，以番红花不同时期各个器官为外植体进行再生体系的构建研究，并对实验中出现的真菌病害和污染真菌进行了分离和初步鉴定，取得了如下主要结果：(1)通过相关性分析，表明球茎鲜重与开花数间存在线性相关关系，球茎重=2．063*花数+11．228，R2=0．9555，10g以下单球茎均开0．25花，10一15g单球茎均开1’34花，152以上单球茎均开147

3、花；球茎鲜重与芽的关系为：球茎重=o8891+芽数+10．14，R2=O．849，10g以下单球茎平均2．25芽，10-15g单球茎平均3．49芽，15g以上单球茎平均5．oo芽。田间栽培实验表明番红花母球茎鲜重、留芽数、栽种时期都对于球茎鲜重有很大影响，母球茎越重，增重比例越大：留芽越多，株总重越重、均球茎越轻、主芽球茎也越轻；母球茎大。留芽数可适当增加，母球茎小应坚决剔除全部己萌发侧芽，但剔除侧芽将增大球茎染病风险；越早移栽越有利于子球茎的生长与形成，所以不开花的球茎可提早移栽。(2)球茎对”CoY．射

4、线的耐受能力随其鲜重减小而降低。低剂量”Coy．射线促进球茎休眠芽的萌发，1．09以下的球茎致死剂为30Gy，1．09以上球茎致死剂量为40Gy。(3)在愈伤组织的诱导过程中，外植体来源与所处的生长发育阶段是影响愈伤组织形成的关键，3月的新球茎及10月中旬的子房最适合诱导愈伤组织的形成。在不定芽的诱导过程中，外源激素的影响最大，2，4．D阻碍愈伤组织分化形成芽，但对小球茎诱导芽丛没有影响；高浓度的NAA促进根的分化而抑制芽的分化；较高浓度的6-BA与低浓度的NAA对诱导不定芽丛最合适。在MS+4mg·L-‘

5、6-BA+O．1mg·L-1NAA培养基中，愈伤组织芽丛诱导率为92．4％，小球茎所有萌发芽都能诱导形成芽丛，芽丛在同种培养基中继代增殖良好，延长继代间期，芽基部膨大形成小球茎。将芽切分接入1／2MS+0．1mg·L“NAA培养基，生根率15d后为90％，继续培养形成小球茎，此小球茎在5月之后进入休眠，9月抽出新芽，进入新一轮的生长周期；将生根芽移栽入培养基质，生长良好，15d后新根长2cm。(4)在大田栽培与组织培养过程中遭遇严重的真菌污染，球茎腐烂病害严重。经常规菌物分离后，初步鉴定为青霉菌(Penic

6、illiumsP)、镰刀菌(FusariumsP)和链格孢菌口lternariaalternata)，对链格孢菌的生物学特性研究表明该菌能单独引起番红花球茎干腐，与青霉菌或II浙江大学硕士学位论文番红花产量构成因子分析及离体再生体系研究镰刀菌互作时加重腐烂程度。环境和营养因子对该菌的生长繁殖影响较大：在10～35。C时，菌丝能生长并形成孢子，最适生长繁殖温度为28"C，孢子的致死温度为65Z：；在pH为4．0-7，0时，菌丝生长、孢子形成和萌发均良好，最适pH值为6．0：当空气相对湿度(RH)高于80％时，

7、菌丝才能生长并形成孢子，RH高于85％，孢子才能萌发；能直接利用葡萄糖和蔗糖，淀粉和甘油需分解后才能被良好利用；氮源以有机态氮和硝态氯为佳，铵态氨对其生睦繁殖有抑制作用。50％的多菌灵可湿性粉剂500X液浸泡20min以上能有效减轻各种球茎腐烂病病情。40％以上的试剂A能完全抑制三类菌的生长。关键词：番红花CrocussativusL．；发育生物学：离体培养：球茎腐烂病；链格孢菌lIIAbstractSaffron(CrocussativusL．1belongedtoIridaceaefamilyhasbe

8、encultivatedinEuropeformanycenturiesforitsstigmas，whichistheworldmostexpensivespiceandisingreatreputeasmedicinalagentwithvarioustherapeuticuses．NowtheSaffronisalsocultivatedinChina，lran，IndiaandotherAsiancoun